5-Fu作用于瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞后Caspase-3變化的研究

王 鵬，弓軍勝，李晉福，張寶林，鄭若楠

（1.山西醫(yī)科大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院 山西 太原 030001；2.山西醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院整形科 山西 太原 030001; 3.上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第九人民醫(yī)院 上海 200011）

5-Fu作用于瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞后Caspase-3變化的研究

王 鵬1,2，弓軍勝2，李晉福1，張寶林2，鄭若楠3

（1.山西醫(yī)科大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院 山西 太原 030001；2.山西醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院整形科 山西 太原 030001; 3.上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第九人民醫(yī)院 上海 200011）

目的：從蛋白層面證明瘢痕疙瘩、正常皮膚成纖維細(xì)胞中Caspase-3蛋白表達(dá)水平存在差異。通過(guò)5-fu(5-氟尿嘧啶)濃度梯度作用瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞后，觀察細(xì)胞中Caspase-3蛋白的表達(dá)，及細(xì)胞增殖、遷移和侵襲性變化。方法：臨床手術(shù)獲取瘢痕疙瘩、正常皮膚組織塊，培養(yǎng)瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞（keloid fibroblast KF）及正常皮膚成纖維細(xì)胞（normal skin fibroblast NSF），應(yīng)用免疫組織化學(xué)及Western blot檢測(cè)組織塊及細(xì)胞中Caspase-3蛋白的表達(dá)；將5-fu(5-氟尿嘧啶)濃度梯度作用瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞（KF）后，應(yīng)用Western blot檢測(cè)Caspase-3蛋白的表達(dá)；CCK-8法檢測(cè)KF細(xì)胞增殖情況；Trans-wells小室實(shí)驗(yàn)檢測(cè)KF細(xì)胞的體外遷移和侵襲能力。結(jié)果：瘢痕疙瘩組織、正常皮膚組織、KF、NSF中均有Caspase-3蛋白的表達(dá)；KF中Caspase-3蛋白表達(dá)水平明顯低于NSF，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，瘢痕疙瘩組織塊中Caspase-3蛋白表達(dá)水平明顯低于正常皮膚組織，差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；5-fu作用KF后，Western blot顯示隨著5-fu濃度的降低,KF中caspase-3蛋白表達(dá)減少,差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。CCK-8結(jié)果顯示，隨著5-fu濃度的降低,對(duì)KF增值活性的抑制不斷減弱，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；Trans-well侵襲結(jié)果顯示侵襲到下室的KF數(shù)目隨5-fu濃度的不斷降低，而增多。……