對血液透析機(jī)專用消毒液性能的研究

張海悅 閆小娟 魏 瀅 王 姝 孫景春 韓 峰

(1.長春工業(yè)大學(xué) 吉林 長春 130000；2.吉林省富生醫(yī)療器械有限公司 吉林 長春 130000 )

血液透析機(jī)是進(jìn)行血液透析的專用儀器。而進(jìn)行血液透析是臨床上治療終末期腎功能衰竭和農(nóng)藥中毒等疾病的主要方法。臨床研究發(fā)現(xiàn)，進(jìn)行血液透析治療需要在完全無菌的條件下進(jìn)行。因此，對血液透析機(jī)進(jìn)行消毒的質(zhì)量直接關(guān)系到進(jìn)行血液透析治療的效果[1]。目前，臨床上主要使用血液透析機(jī)專用消毒液對血液透析機(jī)進(jìn)行消毒。為了研究血液透析機(jī)專用消毒液的性能，我們進(jìn)行了本次研究。現(xiàn)將研究結(jié)果報(bào)告如下：

1 進(jìn)行性能檢測的方法和結(jié)果1

本次研究使用的血液透析機(jī)專用消毒液由吉林省某藥企提供。該消毒液的主要成分為次氯酸鈉和磷酸三鈉。

1.1 進(jìn)行理化檢驗(yàn)

1.1.1 進(jìn)行pH值的測定 我們將用于研究的血液透析機(jī)專用消毒液平均分成三份，將這三份消毒液分別標(biāo)記為001號(hào)、002號(hào)和003號(hào)。我們按照《中華人民共和國藥典》（2010年版）第二部附錄中規(guī)定的VIpH值測定方法對這三組消毒液進(jìn)行pH值測定，共進(jìn)行三次平行的測定，并取測定的平均值作為結(jié)果。測定的結(jié)果見表1。

表1 進(jìn)行pH值測定的結(jié)果

1.1.2 進(jìn)行有效氯含量的測定 精密吸取三份樣品各10mL，將其置于100ml的容量瓶中，用蒸餾水對其進(jìn)行稀釋，并向容量瓶中加入100mL 的碘溶液、10ml濃度為2 mol/L的硫酸、10ml 濃度為100g/L的碘化鉀溶液，然后搖動(dòng)容量瓶，使所有液體混合均勻。此時(shí)，容量瓶中的液體呈現(xiàn)棕色。向容量瓶的邊緣滴數(shù)滴蒸餾水和碘溶液，蓋上瓶蓋，然后將容量瓶在暗處放置5min。打開瓶蓋，讓容量瓶邊緣的蒸餾水流入瓶內(nèi)。向容量瓶中加入硫代硫酸鈉滴定液(裝于25 mL的滴定管中，應(yīng)邊滴邊搖動(dòng)容量瓶），以便對容量瓶中的游離碘進(jìn)行滴定。待容量瓶中的液體呈淡黃色時(shí)，向其中加入10滴濃度為5g/L 的淀粉溶液，使容量瓶中的液體變成藍(lán)色，然后繼續(xù)向容量瓶中滴入硫代硫酸鈉滴定液，使容量瓶中液體的顏色完全消失。完成上述操作后，記錄硫代硫酸鈉滴定液的使用量，并使用空白試驗(yàn)對測定的結(jié)果進(jìn)行校正。本試驗(yàn)可重復(fù)進(jìn)行3次，取 3 次測得的平均值進(jìn)行有效氯含量的計(jì)算。進(jìn)行計(jì)算的公式為：

其中，X 代表有效氯的含量；c 代表硫代硫酸鈉滴定液的濃度； Vst 代表滴定使用的硫代硫酸鈉滴定液量；m 代表容量瓶中所含消毒液的質(zhì)量；1mL濃度為1mol/L的硫代硫酸鈉滴定液等于0.03545g的有效氯。進(jìn)行有效氯含量測定的結(jié)果見表2。

1.1.3 進(jìn)行有效氯穩(wěn)定性的測定 用加速試驗(yàn)法將三份血液透析機(jī)專用消毒液一同置于54℃的溫箱中存放14天。然后按照1.1.2中的方法對這三份消毒液樣品進(jìn)行有效氯穩(wěn)定性的測定。測定的結(jié)果見表3。

表2 進(jìn)行有效氯含量測定的結(jié)果

表3 進(jìn)行有效氯穩(wěn)定性測定的結(jié)果

1.2 進(jìn)行微生物殺滅試驗(yàn)

1.2.1 進(jìn)行細(xì)菌定量殺滅試驗(yàn)（懸液法）[2]（1）制備菌懸液 本次試驗(yàn)的指標(biāo)菌為金黃色葡萄球菌( ATCC 6538)和大腸桿菌(8099) 。本次試驗(yàn)使用的指標(biāo)菌均由軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院消毒檢測中心提供。對指標(biāo)菌進(jìn)行分離培養(yǎng)，然后取典型的指標(biāo)菌菌落接種在培養(yǎng)基的營養(yǎng)瓊脂斜面上，24小時(shí)后，用胰蛋白胨生理鹽水(TPS)對新鮮的培養(yǎng)物進(jìn)行沖洗，從而制備成菌懸液。試驗(yàn)開始后，用濃度為30 g /L的牛血清白蛋白溶液對菌懸液進(jìn)行稀釋，并配制成含菌量為1×107 ～ 5×107cfu /ml 和 1×106 ～ 5×106 cfu /ml的兩組試驗(yàn)用菌懸液。

（2）進(jìn)行中和劑鑒定測試 將金黃色葡萄球菌和大腸桿菌作為試驗(yàn)菌株，設(shè)5個(gè)試驗(yàn)組（培養(yǎng)基）。按照懸液定量殺菌試驗(yàn)的程序?qū)?組培養(yǎng)基進(jìn)行中和劑鑒定試驗(yàn)。試驗(yàn)的結(jié)果為，第3組、第4組和第5組培養(yǎng)基中有相似數(shù)量的試驗(yàn)菌生長，其組間菌落數(shù)誤差率≤15%，第1組培養(yǎng)基中未見試驗(yàn)菌生長，第2組培養(yǎng)基中試驗(yàn)菌的數(shù)量比第1組多，但比第3組、第4組和第5組少。結(jié)果見表4。

表4 進(jìn)行中和劑鑒定測試的結(jié)果

（3）進(jìn)行懸液定量殺菌試驗(yàn) 本試驗(yàn)在20℃的水浴條件下進(jìn)行。將所有試驗(yàn)用的液體在恒溫狀態(tài)下放置5 min。將1mL 的菌懸液加入到4 mL的消毒液中制成陽性對照用稀釋液，放置一段時(shí)間后，吸取此菌藥混合液0.5mL，將其加入到裝有4.5 ml中和劑的試管中，并混合均勻。將此試管放置10 min，然后吸取1mL的此混合液，將其傾注在瓊脂培養(yǎng)基內(nèi)，搖勻。待此混合液凝固后，將培養(yǎng)基放在37℃的環(huán)境中培養(yǎng)48 小時(shí)，然后記錄培養(yǎng)基中活菌的數(shù)量。此試驗(yàn)可反復(fù)進(jìn)行3 次。此試驗(yàn)的結(jié)果見表5。

表5 進(jìn)行懸液定量殺菌試驗(yàn)的結(jié)果

1.2.2 進(jìn)行模擬滅菌試驗(yàn) 本次試驗(yàn)的細(xì)菌載體為截?cái)嗟尼t(yī)用止血鉗。用無菌移液器將0.02 mL 的含有大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的菌懸液滴于止血鉗上，并涂勻，然后將止血鉗放在37℃的溫箱內(nèi)進(jìn)行干燥處理，從而制成染菌載體。取20個(gè)染菌載體，將每個(gè)載體浸泡在10mL的血液透析機(jī)專用消毒液中進(jìn)行滅菌處理，處理時(shí)的溫度為20℃±1℃ 。完成上述操作后，將所有染菌載體取出并移入裝有10 mL TSB 的試管內(nèi)( 共20支試管) 進(jìn)行定性培養(yǎng)，然后將這20支試管分為陽性對照管（3根）和陰性對照管（17根），并進(jìn)行相關(guān)的處理。對所有試管連續(xù)進(jìn)行7天的培養(yǎng)，然后觀察培養(yǎng)的結(jié)果。此試驗(yàn)可重復(fù)進(jìn)行3次。此試驗(yàn)的結(jié)果為：所有染菌載體經(jīng)胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)7天后，陽性對照管的回收細(xì)菌數(shù)值為7. 36×105 ～1. 36×106cfu/件，陰性對照管無細(xì)菌生長。此試驗(yàn)的結(jié)果為滅菌合格。

1.3 進(jìn)行除鈣效果試驗(yàn)

取4支試管，將其分別設(shè)定為1號(hào)管、2號(hào)管、3號(hào)管和4號(hào)管。在每個(gè)試管內(nèi)加入30mL的碳酸鈣沉淀液，然后向1號(hào)管內(nèi)加入反滲透水10mL，向2號(hào)管內(nèi)加入消毒液10mL，向3號(hào)管內(nèi)加入濃度為50%的磷酸三鈉10mL，向4號(hào)管內(nèi)加入次氯酸鈉10mL。完成上述操作后，觀察這4支試管中的液體在5min后、10min后、30min后、5小時(shí)后和24小時(shí)后出現(xiàn)的現(xiàn)象。結(jié)果顯示，試驗(yàn)進(jìn)行24小時(shí)后，2號(hào)管中已無沉淀物，3號(hào)管中有少量的沉淀物，1號(hào)管和4號(hào)管中有大量的沉淀物。詳情見圖1和圖2。

圖1 試驗(yàn)開始時(shí)

圖2 試驗(yàn)進(jìn)行24小時(shí)后

2 討論

使用血液透析機(jī)專用消毒液是臨床上對血液透析機(jī)進(jìn)行消毒的主要方法。血液透析機(jī)專用消毒液的主要成分為次氯酸鈉和磷酸三鈉。其中，次氯酸鈉的分子很小，而且不帶電荷，故次氯酸鈉不僅能夠破壞細(xì)菌的外殼，還能進(jìn)入到細(xì)菌的內(nèi)部破壞其體內(nèi)蛋白、核酸和酶的合成，從而起到殺死細(xì)菌的作用。同時(shí)，次氯酸鈉產(chǎn)生的氯離子還能顯著地改變細(xì)菌體內(nèi)的滲透壓，使其因喪失活性而死亡。磷酸三鈉是一種可用于清洗金屬物品的緩蝕劑。它可與水中的鈣、鎂等物質(zhì)發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，生成不溶性的磷酸鈣和磷酸鎂等磷酸鹽類物質(zhì)。這些磷酸鹽類物質(zhì)沒有粘性，不會(huì)像肥皂中的鈣、鎂那樣粘附在金屬物品的表面。此外，磷酸三鈉還具有滲透和乳化的作用，能夠增強(qiáng)水的潤濕作用，從而可有效地去除粘附在金屬表面的污垢[3-4]。

本次試驗(yàn)的結(jié)果證實(shí)，血液透析機(jī)專用消毒液具有品質(zhì)穩(wěn)定、殺菌效率高和能夠清除碳酸鈣的作用。