黃通湯對鼻咽癌放療增敏作用機制的探討△

陳笑軍李永春呂　英　范　欽（1．　廣東省中醫院　廣州　510120；2.南方醫科大學南方醫院　廣州510515；3.南方醫科大學　廣州　510515）

黃通湯對鼻咽癌放療增敏作用機制的探討△

陳笑軍1李永春2呂英2范欽3*（1．廣東省中醫院廣州510120；2.南方醫科大學南方醫院廣州510515；3.南方醫科大學廣州510515）

鼻咽癌是我國南方常見的惡性腫瘤之一，由于其特殊的病理類型、生物學行為和解剖結構，放射治療（放療）仍是鼻咽癌的首選治療方法，用有效的措施抑制腫瘤的放射抗拒、提高腫瘤放射治療的敏感性、改善腫瘤的局部控制率已經成為提高腫瘤放療療效的關鍵。本文探討中藥方劑黃通湯參與逆轉CCND1/CDK6的表達而實現放射增敏作用的機制。

黃通湯 鼻咽癌 放療 基因調控

鼻咽癌（Nasopharyngeal carcinoma，NPC）是我國南方常見的惡性腫瘤之一［1，2］，由于其特殊的病理類型、生物學行為和解剖結構，放射治療（放療）仍是鼻咽癌的首選治療方法，然而不同NPC個體的放射敏感性存在很大的差異，許多患者治療一段時間后出現局部復發，這可能與腫瘤中存在或放療過程中出現對射線抗拒的細胞成分有關［3，4］，初次接受照射時，往往敏感性較高，多次照射后，存活下來的腫瘤細胞誘導出了更強的放射抗拒性，從而導致治療的失敗［1，5］。采用有效的措施抑制腫瘤的放射抗拒、提高腫瘤放射治療的敏感性、改善腫瘤的局部控制率已經成為提高腫瘤放療療效的關鍵。揭示放療抗拒的分子機制，使藥物通過調控機體相關蛋白的表達水平，高效特異地逆轉放射抗拒及激活放療敏感性，成為放療增敏臨床研究和實踐的新熱點，亦將對鼻咽癌的臨床診療產生深遠的影響。

從祖國傳統醫學的觀點來看，鼻咽癌放療后存在放療后復發和轉移的風險（放射抗拒），原因在于接受放化療的鼻咽癌患者，在放射線及化療藥物作用下，內損臟腑，發生了傷陰耗氣之變，進一步促進了鼻咽癌基本病機，主要是正虛血瘀、邪毒滯留相互作用的劣性演變。針對這些情況，放化療期間的中醫增效減毒療法（放射增敏）可及隨證加減用藥能發揮較好防治效用，減輕甚至防止并發癥和后遺癥的發生。

近年來，國內外學者開始研究并關注中醫藥在鼻咽癌放射增敏中的作用。趙真豪等［6］小結了鼻咽癌放化療后中醫治療的進展。黃曉萍等［7］報道中醫辨證分型對鼻咽癌放療后的療效；駱華春等［8］采用益氣養陰方對氣陰兩虛型鼻咽癌進行干預，發現生存質量明顯改善。黃通湯各組分黃芪、姜黃、大黃、烏梅對鼻咽癌放射增敏作用均有報道［1，9，10，11］。黃通湯對放療后鼻咽癌患者效果很好，已作為兩個附屬醫院協定方使用，組方已于近期申報發明專利（受理號201610010044.1）。

黃通湯（組成比例：黃芪30g、姜黃20g、大黃10g、烏梅5g）方中黃芪甘溫，入脾肺二經，善補肺脾之氣，為補氣諸藥之最，有補中益氣、利水升陽之功，為治本之要藥。《別錄》云：“補丈夫虛損，五勞羸瘦、止渴益氣。”《本經逢原》云“黃芪性雖溫而能通調血脈，流行經絡，可無礙于壅滯也”。《本經疏證》云：“黃芪利營衛之氣，故凡營衛間阻滯，無不盡通，所謂源清流自潔也。”姜黃味辛、苦，性溫，既入血分能活血化瘀，又入氣分能行氣而止痛，為破血行氣之品。《日華子本草》云：熱，無毒。治癥瘕血塊，癰腫，通月經，治撲損瘀血，消腫毒，止暴風痛冷氣，下食。《本草衍義補遺》：“東垣云：味苦甘辛，大寒無毒。治癥瘕血塊、癰腫，通月經，消腫毒。其主治功力烈于郁金。又治氣為最。”二者共為君藥，黃芪補氣，使營衛氣足，姜黃活血行氣，能行能和。二藥配伍有補氣活血之功。臣以大黃（制）性味大苦大寒，性秉直遂，可清熱瀉火解毒，并借其瀉下通便之功，使放療之毒邪下泄清解。大黃與黃芪配伍一瀉一補，大黃與姜黃相伍祛瘀生新，君臣相配有益氣活血解毒之功，方中佐以烏梅味酸而澀，氣厚善斂，善能生津止渴、益精開胃，助君藥黃芪益氣生津，并防臣藥大黃苦寒傷其陰津。諸藥相合寓補氣于祛瘀之中，寓解毒于生津之內，益氣而不留瘀，解毒而不傷津，補泄并用，氣津雙補，扶正祛邪。

基因研究

國內外研究表明：細胞周期調控是放射敏感性最重要的決定因素［12］。射線損傷的關鍵靶是DNA，DNA雙鏈斷裂或單鏈斷裂，啟動損傷應答信號（damage response signaling DDR），關鍵損傷監測相關基因（RAD、BRCA、NBSL）與傳遞基因（ATM、CHK）啟動細胞周期調控機制，激活DNA損傷檢測點（DNA damage checkpoint）暫時阻滯細胞周期進展，放射線引起的細胞周期阻滯主要發生在G1/S期和G2/M期。G1/S阻滯可阻止損傷DNA的異常復制，G2/M阻滯可避免有缺陷的染色體分離，細胞周期阻滯使損傷的DNA可以進行修復，如果修復不成功則啟動凋亡［13］。

CDK6是G1期的重要調控分子。CDK6的異常表達被證實與多種腫瘤的發生發展相關，已報道的鼻咽癌、肺癌、乳腺癌、大腸癌等惡性腫瘤中，CDK6的表達均上調［14～16］。近年來有關CDK6表達情況與腫瘤放療敏感性的關系已有報道，Whiteway［17］等研究發現，成神經管細胞瘤患者中CDK6過表達，用RNAi技術干擾腫瘤細胞系ONS-76的CDK6表達，明顯抑制細胞增殖且放射敏感性顯著增強，提示CDK6是與放射敏感性相關的重要分子。

癌細胞在射線治療過程中，射線誘導的CCND1/CDK6過表達是細胞G1/S期關口放射抵抗的重要原因，中藥能逆轉CCND1/CDK6的表達而實現放射增敏。研究表明：lnc-CCND1調控CCND1表達，并與放射敏感性相關；lnc-CDK6表達與CDK6正相關，調控實驗證明CDK6非常有可能是lnc-CDK6 cis作用的靶基因。在中藥黃通湯的干預下，lnc-CDK6或將通過CCND/ CDK信號途徑下調CDK6的表達，從而使細胞出現G1/S期阻滯而獲得對射線更高的敏感性。

小結

鼻咽癌放療后證治規律的初步研究顯示，正虛血瘀當為該過程的重要病機，需要益氣活血，扶助正氣。只有正氣充沛，才能與癌毒抗衡，降低復發與轉移幾率。但是，邪毒滯留或伏毒問題也不能忽視，需要合理兼顧余邪清理以及伏邪清解，方能合理實施康復治療，達到康復治療目的。因此根據鼻咽癌放療后康復期的病機特點及主要證候，結合臨床特點，兼顧中醫“急則治標，緩則治本”的原則，臨床多以益氣活血、解毒養陰為其治療大法。

［1］Wang，Q.Fan，H.Liu，Y.Yin，Z.Cai，H.Liu，J.Wang，Z. Shao，M.Sun，X.Diao，J.Liu，Y.Tong，L.Fan，Q.Curcumin enhances the radiosensitivity in nasopharyngeal carcinoma cells involving the reversal of differentially expressed long non-coding RNAs.Int J Oncol，2014，44（3）：858-864.

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［3］王啟瑞，范昊寧，殷志新，等.姜黃素對CNE-2細胞放射敏感性及機制的影響［J］.中國中藥雜志，2014，39（3）：507-510.

［4］王志遠，陳龍華，袁亞維，等，鼻咽癌放射敏感性與MDR1基因多態性的相關性［J］.山東醫藥，2011，51（29）：16-18.

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［6］趙真豪，王丹，張柳.鼻咽癌放化療后中醫治療進展［J］.黑龍江中醫藥，2013，42（2）：75-77.

［7］黃曉萍，邱寶珊，黎靜.中醫辨證治療對放化療鼻咽癌患者生存率的影響［J］.廣州中醫藥大學學報，2015，32（4）：637-640.

［8］駱華春，林貴山，程惠華.益氣養陰方對氣陰兩虛型鼻咽癌患者生存質量的影響［J］，實用癌癥雜志，2012，27（2）：155-156.

［9］陳增邊.注射用黃芪多糖對鼻咽癌放射治療患者免疫功能的影響［J］.臨床醫學，2010，30（5）：23-24.

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△論文基金號：廣東省科技計劃項目（2013A032500003）；廣州市海珠區科技計劃項目（2013-cg-29）

R739.63

B

1672-8351（2016）08-0143-02