自擬消癖湯治療雄性大鼠乳腺增生實(shí)驗(yàn)研究

李春甫，齊 山*，王長宏，王 璞

(1.吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院中醫(yī)科，長春 130033；2.吉林大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院2013級(jí)，長春 130033)

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自擬消癖湯治療雄性大鼠乳腺增生實(shí)驗(yàn)研究

李春甫1，齊 山1*，王長宏1，王 璞2

(1.吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院中醫(yī)科，長春 130033；2.吉林大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院2013級(jí)，長春 130033)

目的 觀察自擬消癖湯對(duì)雄性大鼠乳腺增生的治療效果，以指導(dǎo)男性乳房肥大癥的治療作用研究。方法 腹腔注射給予苯甲酸雌二醇(1.0mg/kg)，1次/d，連續(xù)20d，以復(fù)制雄性大鼠乳腺增生模型。60只SPF級(jí)Wistar雄性大鼠隨機(jī)均分為正常對(duì)照(等溶生理鹽水)組、模型(等溶生理鹽水)組、三苯氧胺(1.8mg/kg)組、自擬消癖湯低、中、高(2.5、5、7.5mL/kg)劑量組，各組大鼠均于復(fù)制模型結(jié)束后腹腔注射給藥,2次/d，連續(xù)30d。采用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法測定大鼠血清雌二醇(E2)、睪酮(T)的水平，觀察大鼠乳腺組織結(jié)構(gòu)變化，對(duì)比評(píng)價(jià)療效。結(jié)果 與正常對(duì)照組比較，模型組乳腺增生明顯，血清E2增加,血清T含量減少；差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。與模型組比較，三苯氧胺組與自擬消癖湯低、中、高劑量組大鼠乳腺增生均有不同程度減輕，血清E2水平降低，血清T水平升高,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；與三苯氧胺組比較,自擬消癖湯高劑量組大鼠血清E2水平降低,血清T水平升高,乳腺組織增生程度明顯減輕，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論 自擬消癖湯對(duì)雄性大鼠乳腺增生有明顯的抑制作用，療效顯著。

自擬消癖湯；雄性大鼠；乳腺增生

男性乳房肥大癥指男性乳腺腺體組織良性增厚、呈婦乳樣改變，是最為常見的男性乳腺疾病[1-3]?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)對(duì)未達(dá)到手術(shù)指征者多采用抗激素藥物治療，毒副作用較大，停藥后復(fù)發(fā)概率高，對(duì)已達(dá)手術(shù)指征者采取手術(shù)[4]治療，但術(shù)后并發(fā)癥又是困擾患者及醫(yī)生的一大難題[5]，風(fēng)險(xiǎn)較大。本實(shí)驗(yàn)[6]觀察自擬消癖湯對(duì)雄性大鼠乳腺增生的治療效果，為男性乳房肥大癥的治療提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1．1 材料

1．1．1 動(dòng)物 SPF級(jí)Wistar雄性大鼠48只，體質(zhì)量240～260 g，2月齡。由吉林大學(xué)白求恩醫(yī)學(xué)部動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供，編號(hào)：SCXK(吉)2011-0016。

1．1．2 藥品 苯甲酸雌二醇注射液(杭州動(dòng)物藥品廠，批準(zhǔn)文號(hào):獸用字(2011)110302441)，濃度:2 mg/mL。三苯氧胺片(寧波天衡制藥有限公司，批號(hào)：110621，規(guī)格：10 mg/片，60片)。自擬消癖湯(柴胡15 g，枳殼10 g，陳皮15 g，香附10 g，川芎15 g，赤芍15 g，穿山甲7．5 g，荔枝核15 g，王不留行15 g，三棱10 g，莪術(shù)10 g，菟絲子15 g，山楂15 g，甘草10 g)，冷水浸泡2 h，常規(guī)2煎，2次水煎液混合并濾過，約30 mL。

1．1．3 試劑 雌二醇放免藥盒(體外診斷試劑)(天津九鼎醫(yī)學(xué)生物工程有限公司，國藥準(zhǔn)字S10950184)。睪酮放免藥盒(體外診斷試劑)，天津九鼎醫(yī)學(xué)生物工程有限公司，國藥準(zhǔn)字S10940111。

1．1．4 儀器 高速冷凍離心機(jī)(天津久圣永康實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司)，生物組織自動(dòng)包埋機(jī)(德國美康公司)，旋轉(zhuǎn)式薄片切片機(jī)(德國美康公司)，顯微鏡(日本奧林巴斯株式會(huì)社)。其他：電子秤、帆布手套、橡膠手套、口罩、帽子、鑷子、剪刀、刀片、載玻片、蓋玻片、注射器、包埋盒、染色劑、操作臺(tái)、灌胃針等。

1．2 方法

1．2．1 分組及給藥 大鼠自由攝食飲水，室溫控制在20～25 ℃，相對(duì)濕度40%～60%，飼養(yǎng)1周，將大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、模型組、三苯氧胺組和自擬消癖湯低、中、高劑量組，每組10只。腹腔注射給予苯甲酸雌二醇(1．0 mg/kg)，1次/d，連續(xù)20 d，以復(fù)制雄性大鼠乳腺增生模型[7]。對(duì)照組正常飼養(yǎng),注射等溶生理鹽水連續(xù)50 d；模型組復(fù)制模型后連續(xù)注射等溶生理鹽水20 d；余各組大鼠均于復(fù)制模型結(jié)束后腹腔注射給藥，2次/d，連續(xù)30 d[8]。

1．2．2 檢測項(xiàng)目 將6組大鼠分別經(jīng)1%戊巴比妥鈉按40 mg經(jīng)腹腔注射麻醉后，從心臟中抽取2 mL血液，3 000 r/s離心，取上層血清，應(yīng)用放免分析法測定血清中雌二醇(E2)、睪酮(T)的含量；再用脫頸椎方法處死所有大鼠，觀察腹部皮膚高度，取下腹部皮下與肌肉間組織，用10%福爾馬林液固定，石蠟包埋、切片，HE染色，在光鏡下觀察，做病理分析。參照宋愛莉等[9]乳腺增生病理診斷標(biāo)準(zhǔn)分為4類。無增生：乳腺小葉不增生，腺體數(shù)量極少，腺泡不擴(kuò)張，處于靜止期狀態(tài)。輕度增生:個(gè)別腺泡有輕度增生，無擴(kuò)張，腺泡及導(dǎo)管內(nèi)有分泌物。中度增生：乳腺小葉大部分增生，少數(shù)腺泡有輕度擴(kuò)張，腺上皮增生層次增多腺泡及導(dǎo)管內(nèi)有分泌物。重度增生：乳腺小葉大部分增生，多數(shù)腺泡有明顯擴(kuò)張，腺上皮增生層次增多，腺泡及導(dǎo)管內(nèi)有較多分泌物。

2 結(jié)果

2．1 各組生化指標(biāo)變化比較 見表1。

表1 各組大鼠性激素變化比較

注:與對(duì)照組比較，#P<0．05；與模型組比較，△P<0．05；與中藥高劑量組比較，▲P<0．05

2．2 各組病理變化比較 與對(duì)照組比較，模型組大鼠乳腺標(biāo)本都有腺泡數(shù)量明顯增加，上皮增生呈假復(fù)層現(xiàn)象，嚴(yán)重者甚至堵塞導(dǎo)管，導(dǎo)管擴(kuò)張，內(nèi)含大量分泌物，周圍反應(yīng)性間質(zhì)明顯減少，染色變深，膠原增生，失去疏松狀態(tài)；中藥低、中劑量組與三苯氧胺組腺泡較模型組相比雖均有不同程度的減輕，但仍有半數(shù)以上乳腺標(biāo)本腺泡數(shù)量明顯增加，導(dǎo)管擴(kuò)張明顯，內(nèi)含較多分泌物，周圍結(jié)締組織較正常乳腺組織減少。與中藥低、中劑量及三苯氧胺組相比，中藥高劑量組大鼠小葉數(shù)、平均腺泡數(shù)、腺泡直徑明顯減小，腺腔內(nèi)分泌物明顯減少。增生程度見表2。

表2 各組大鼠乳腺組織增生程度結(jié)果(n=10)

注:與三苯氧胺組及中藥低、中劑量組比較，#P<0．05

3 討論

男性乳房肥大癥[10-12]，中醫(yī)病名為“乳癖”“乳癘”。陳實(shí)功在《外科正宗·乳痛第二十六論》中總結(jié)：“男子乳疾與婦人微異，女損肝胃，男損肝腎，蓋怒火房欲過度，以致肝虛血燥，腎虛精虧，血脈不得上行，肝經(jīng)無以榮養(yǎng)，遂結(jié)腫痛”，中醫(yī)學(xué)在治療乳腺增生根據(jù)辨證論治,但對(duì)乳腺增生的分型尚未統(tǒng)一,治療方法也不盡相同[13-14]。男子乳疾與女子乳疾病因與病機(jī)存在差異，男性乳疾與肝、腎有密切關(guān)系。故腎虛肝郁為發(fā)病之本，氣滯、痰凝、血瘀為發(fā)病之標(biāo)。而男性乳房肥大癥又為男性乳腺疾病中最常見的，故男性乳房肥大癥的發(fā)病與肝、腎的關(guān)系密切，所以治療指向也離不開肝、腎兩臟，治本當(dāng)疏肝、補(bǔ)腎，治標(biāo)當(dāng)行氣導(dǎo)滯、活血化瘀、祛痰散結(jié)。自擬消癖湯為主，在治療上以疏肝理氣，補(bǔ)益肝腎為本病治則，兼見化瘀、散結(jié)、祛痰之功效，本方應(yīng)用柴胡、陳皮、香附、枳殼疏肝解郁，理氣行滯；川芎乃“血中之氣藥”，行活血行滯之功；三棱長于破血中之氣，以破血通經(jīng)，莪術(shù)善破氣中之血，以破氣消積，二藥伍用，氣血雙施，活血化瘀、行氣止痛、化積消塊力彰；穿山甲活血散結(jié)、消癰潰堅(jiān)，有“走竄十二經(jīng)”之功；王不留行奏活血、通經(jīng)、消腫之效；赤芍清熱涼血、散瘀止痛；荔枝核行氣散結(jié)；菟絲子補(bǔ)腎益精；佐山楂行氣散瘀，數(shù)藥配伍共奏疏肝散結(jié)、導(dǎo)滯化癖之功，療效頗佳。

本實(shí)驗(yàn)由于條件限制，未深入研究藥代動(dòng)力學(xué)、毒理學(xué)等研究，將在今后的實(shí)驗(yàn)研究中進(jìn)一步完善。

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Self designed Xiaopi decoction on treating hyperplasia of mammary gland in male rat

LI Chunfu1,QI Shan1*,WANG Changhong1,WANG Pu2

(1.Department of Traditional Chinese Medicine,Sino-Japanese Union Hospital of Jilin University,Changchun 130033,China;2.Clinical Medical College,Jilin University,Changchun 130033,China)

Objective To observe the therapeutic efficacy of self designed Xiaopi decoction on hyperplasia of mammary gland in the male rats,to guide the therapeutic study on treatment of male breast hypertrophy.Methods The formation of mammary gland hyperplasia by ip estradiol benzoate(1.0mg/kg),twice a day for 20 d.Sixty SPF Wister male rats were divided into normal control group(isovolumic normal saline),model group(isovolumic normal saline),tamoxifen group(1.8 mg/kg),and self designed xiaopi decoction low,medium and high dose groups (2.5，5，7.5 mL/kg).The groups were given ig administration,once a day for 30 d.The concentrations of rats serum estradiol(E2)and testosterone(T)were detected by ELISA.Observe the changes of mammary gland organization structure and compare the curative effects.Results Compared with the normal control group,model group,the concentrations of serum E2was increased and T was reduced.The differences were statistically significant(P<0.05).Compared with the model group,the degree of mammary gland hyperplasia in rats have reduced which in tamoxifen group and self designed Xiaopi decoction low,medium and high dose groups to some extent,the concentrations of serum E2was decreased and Serum T was increased,there was statistical significant difference(P<0.05).Compared with the tamoxifen group,the concentrations of serum E2was decreased and Serum T was increased in self designed Xiaopi decoction high dose groups,the degree of mammary gland hyperplasia in rats have reduced obviously,there was statistical significant difference(P<0.05).Conclusion The self designed Xiaopi decoction has significant curative effect on hyperplasia of mammary gland in the male rats.

self designed Xiaopi decoction;male rats;hyperplasia of mammary gland

10.13463/j.cnki.cczyy.2016.06.009

吉林大學(xué)科技立項(xiàng)項(xiàng)目“自擬消癖湯對(duì)乳腺增生的治療作用研究”(3R211A683430)。

李春甫(1990-)，女，碩士研究生，主要從事中西醫(yī)結(jié)合治療月經(jīng)不調(diào)。

R

A

2095-6258(2016)06-1126-03

2015-11-26)

*通信作者：齊 山,副教授,副主任醫(yī)師,碩士研究生導(dǎo)師,電話-13514465973,電子信箱-qishan1968@163.com