2011-2015年九江市職業暴露人群血清學和環境禽流感病原學監測結果分析

熊火梅，張紅波，梁劍鋒，余福平

(九江市疾病預防控制中心，江西九江333000)

2011-2015年九江市職業暴露人群血清學和環境禽流感病原學監測結果分析

熊火梅，張紅波，梁劍鋒，余福平

(九江市疾病預防控制中心，江西九江333000)

目的了解九江市2011年至2015年職業暴露人群H5N1禽流感病毒抗體水平和環境中禽流感病毒的感染狀況，以期為九江市人感染高致病性禽流感的防控提供技術支持。方法馬紅細胞血凝抑制試驗（HI）檢測禽類養殖人群H5N1血凝素抗體；real-time PCR對環境標本進行A型檢測，對A陽性進一步檢測H5、H7和H9亞型；結果1340份職業人群血清H5N1血凝素抗體均為陰性；5個年度中1461份環境標本禽流感病毒核酸檢測A型陽性率為30.94%，其中H5、H7、H9陽性率分別為10.47%（153/1461）、0.55%（8/1461）、21.77%（318/1461），A未分型陽性率為3.90%（57/1461）。結論九江市禽類中存在H5、H7、H9亞型感染，存在人感染高致病性禽流感的風險，應加強禽流感病毒感染監測。

禽流感病毒；外環境；職業暴露人群；病原學監測

禽流感是由A型流感病毒（avian influenza virus，AIV）引起的一種禽類（家禽和野禽）傳染病，其發生和傳播與自然條件、候鳥遷徙、家禽養殖和活禽交易等密切相關[1]。近年來，禽流感疫情頻頻發生，江西省也是禽流感病例報告發生比較頻繁的地區，在過去幾年間報告過人感染H10N8[2]、H7N9和H5N1等禽流感疫情。九江位于江西的北部，四省通行，部分縣（區）環鄱陽湖，人口流動大，禽類養殖多，鳥類活動頻繁，是著名的候鳥棲息地。根據《全國“職業暴露人群血清學和環境高致病性禽流感監測方案”（2011年版）》，我市自2011年開始設置2個國家級禽流感監測點，2015年根據《江西省活禽經營市場人感染禽流感監測方案（2015版）》，又新增加了兩個省級禽流感監測點，此次新增監測點屬于候鳥棲息地，在候鳥遷入至遷出期間選擇采集候鳥棲息地環境標本，可為鄱陽湖地區內禽流感發生與傳播提出預警。現就2011－2015年九江市職業暴露人群血清學和外環境禽流感病原學進行分析，為本地區禽流感防控措施和職業暴露人群風險評估工作提供科學依據。

1 材料與方法

1.1 標本來源根據《全國職業暴露人群血清學和環境高致病性禽流感監測方案》的要求及九江市禽類養殖業分布情況確定監測點，以家禽規模養殖場（戶）、家禽散養集中地區和城鄉活禽市場的暴露人群作為監測對象，采集血液標本，離心后收集血清；每年2、3、6、7、10、11月份在各個監測點采集籠具表面、禽類糞便、清洗禽類污水、禽類飲水及宰殺禽類案板表面等環境標本。

1.2 試劑環境標本核酸檢測采用RT-PCR，按照商品化試劑盒操作。血清學血凝素抗體檢測由國家流感中心提供A/Hubei/1/2010、Anhui/1/2005、CM/HK/5052/2007(H5N1)、A/GZ/1/2013(H5N1)滅活抗原和馬紅血球。所有試劑和耗材均在有效期內使用。

1.3 實驗方法

1.3.1 血清學測定H5N1抗體水平采集被調查者靜脈血5ml，分離血清，送往江西省疾控中心和國家流感網絡實驗室采用紅細胞血凝抑制試驗檢測，人血清對H5N1抗原的抑制效價≥1∶80判定為陽性。

1.3.2 核酸檢測所有外環境中采集的拭子標本提取病毒RNA后，實時熒光定量PCR進行A型流感病毒核酸檢測，對A型陽性標本再進行H5、H7和H9檢測。其中2011年有25個A型陽性標本未進一步分型，其余A陽性均已檢出型別。

1.4 數據分析將有關數據錄入Excel2007軟件進行整理，通過SPSS 19.0軟件進行統計分析，率的比較采用χ2檢驗及Fisher精確概率法，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 職業暴露人群血清學監測1340人份職業暴露人群血清H5N1血凝素抗體檢測均為陰性。

2.2 環境標本高致病禽流感病原學監測2011－2015年共檢測1461份環境標本，檢測陽性標本452份，其中H5陽性標本153份，H7陽性標本8份，H9陽性標本318份，A未分型標本57份。陽性率逐年升高，各年總體陽性率差異有統計學意義（χ2＝72.75，P<0.01），2015開始檢出H7亞型，均為H7N9，詳細見表1。

2.3 不同類型環境標本禽流感病毒核酸檢測結果1461份標本中，各類型環境標本均有陽性檢出，其他類型、籠具表面擦拭、禽類糞便、禽類飲用水等環境標本陽性率較高。不同標本類型檢測陽性率總體差異有統計學意義（Fisher精確概率法，P< 0.05）見表2。

3 討論

近年來，禽流感病毒跨越種間屏障，由H5、H7、H9亞型感染引起人禽流感病例均有報道[3-5]，尤其是2013年發生了新型H7N9禽流感的流行，對公眾健康造成了嚴重的損害和巨大的經濟損失[6]。九江市連續5年對1340名職業暴露人群血清學監測結果顯示，A（H5N1）抗體檢測均為陰性，與廣州、浙江、贛州等地[7-9]監測結果一致。環境標本禽流感病原學監測顯示，九江市禽類相關外環境樣本中有禽流感病毒的存在，標本陽性檢出率為30.94%，流行強度呈逐漸上升的趨勢。從監測年份來看，2011年－2012年、2012年－2013年陽性率有明顯的增加，兩兩比較除2014年與2013年和2015年沒有統計學差異外，其余各年陽性率差異均有統計學意義。在亞型檢測中，2011年-2014年檢測到的主要型別為H5、H9和A未分型禽流感病毒，未檢出H7亞型禽流感病毒，以H9亞型陽性率最高，占總陽性率70.35%（318/452），顯示低致病性的H9禽流感病毒是本地區的主要流行型別，同Shi W及朱碧柳等調查的結果一致[10，11]。高致病性H5亞型檢出率明顯高于H7亞型，且易于和H9混合感染，在活禽交易市場禽類飲水標本中檢出1例H5/H7/H9混合感染，不同亞型病毒如果在同一禽類個體中混合感染，將增加其相互重配進而產生新亞型的可能，應加強關注。

表1 2011年－2015年九江市禽流感環境標本核酸檢測情況

表2 2011年-2015年九江市不同種類標本禽流感病毒核酸檢測情況

標本類型病原學分析顯示，糞便標本、禽類飲水、籠具表面擦拭物的陽性率較高，提示人群喂養與接觸活禽市場的籠具時感染禽流感的危險較高。2015年在城鄉活禽市場采集的其他型別（禽類羽毛等）標本陽性率最高，且3月份在城鄉活禽市場的籠具表面擦拭標本中首次檢出H7N9禽流感病毒。同年4月我市在流感常規監測中檢出首例人感染H7N9禽流感[12]，在患者生活附近活禽交易市場外環境應急監測也檢出H7N9陽性標本，為人感染禽流感病例提供了流行病學證據。可見H7N9禽流感病毒當時在多個市場傳播，使活禽市場成為人感染禽流感病毒的主要來源地[13-15]，應是今后監測工作的重點。

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Analysis of poultry breeding population serologic features and environmental avian influenza virus surveillance results in Jiujiang city from 2011 to 2015

XIONG Huomei，ZHANG Hongbo，LIANG Jianfeng，YU Fuping.
Jiujiang Center for Diesease Control and Prevention，Jiujiang Jiangxi 333000，China.

ObjectiveTo understand the antibody levels of H5N1 avian influenza virus among poultry breeding population and the virus distribution in Jiujiang city，and provide evidence for the prevention and control of human infection with avian influenza virus.MethodsHemagglutination inhibition(HI)test was used to detect H5N1 hemagglutinin antibody in poultry breeding population.The samples of environment were detected the nucleic acid of avian influenza A with real-time PCR，and the positive samples were further tested for H5，H7 and H9 nucleic acid.ResultsA total of 1340 serum samples from poultry breeding population were negative for H5N1 hemagglutinin antibody.While in 621 environment samples，the positive rate of avian influenza A virus was 30. 94%，including H5 positive rate 10.47%(153/1461），H7 positive rate 0.55%（8/1461），H9 positive rate21.77%(318/1461），untyped A positive rate 3.90%(57/1461）.ConclusionThere were H5，H7 and H9 avian influenza viruses in monitoring areas of Jiujiang city，presenting highpathogenic avian influenza risk to human.So avian influenza virus infection monitoring should be strengthened on poultry breeding population.

Avian influenza virus；Environmental samples；Occupational exposure population；Pathogen monitoring

R446.62，R373.1+3

A

1674-1129(2016)06-0715-03

10.3969/j.issn.1674-1129.2016.06.006

2016-09-05；

2016-11-23)

熊火梅，女，1975年12月出生，碩士，主管技師，臨床檢驗診斷學，研究方向病毒病原學檢測，E-mail：xionghuomei@126. com.