2013年-2015年宜春市麻疹實驗室監測結果分析

謝海珍，陳玉紅，黃秋艷

(宜春市疾病預防控制中心，江西宜春336000)

2013年-2015年宜春市麻疹實驗室監測結果分析

謝海珍，陳玉紅，黃秋艷

(宜春市疾病預防控制中心，江西宜春336000)

目的分析宜春市2013年-2015年麻疹監測結果，探尋麻疹流行特點和變化規律，為控制和消除麻疹提供有力依據。方法收集宜春市各醫療機構于2013年-2015間所有麻疹疑似病例血清學和病原學樣本(咽拭子)，血清樣本采用ELISA檢測麻疹病毒IgM抗體，咽拭子樣本采用熒光PCR進行麻疹病毒核酸檢測，并對檢測結果進行分析。結果麻疹疑似病例血清標本699例，血清陽性標本17例，咽拭子標本651例，病毒核酸陽性標本11例。時間分布主要集中在4-9月；年齡主要分布在小年齡＜8月齡、3齡組及40歲以上年齡組。結論有必要對疑似的所有發熱、出疹病例開展麻疹核酸PCR及血清IgM同步檢測。全面提高目標人群免疫水平，達到控制、消除的目的。

麻疹；IgM；核酸檢測；病原學檢測

1 材料與方法

1.1 標本采集由宜春市轄區內各市、區、縣疾控中心根據《全國麻疹監測方案》要求對所有麻疹疑似病例采集血清學樣本699例和病原學樣本（咽拭子）651例，同時采集到靜脈血、咽拭的疑似病例共62例；靜脈血常規分離血清，咽拭子標本保存在3ml麻疹病毒標本運輸液(含5%牛血清、終濃度2000U/ml青霉素、200μg/ml鏈霉素和25U/ml制霉菌素的細胞培養液)中，冷藏運送。

1.2 標本檢測

1.2.1 檢測程序血清標本采用ELISA檢測麻疹病毒IgM抗體，咽拭子標本采用熒光PCR進行麻疹病毒核酸檢測。2013年1-4月份麻疹疑似病例病原學咽拭子標本直接送省疾控中心進行麻疹核酸檢測，5月份以后的標本由市疾控中心進行麻疹核酸檢測，所有麻疹核酸檢測陽性的標本再送省疾控中心進行病毒分離。

1.2.2 麻疹病毒IgM抗體檢測采用《麻疹病毒IgM抗體診斷試劑盒(酶聯免疫捕捉法)》(珠海海泰生物制藥有限公司)檢測麻疹IgM抗體，嚴格按照試劑盒說明書進行操作，在有效期內使用。結果計算S/N值(S/N值=樣品A值/陰性對照A值平均值，陰性對照A值平均值＜0.07，按0.07計算，陰性對照A值平均值≥0.07，則按實際值計算)。S/N值≥2.1，判為陽性，S/N值＜2.1，判為陰性。酶標儀是安圖2010型。

1.2.3 麻疹病毒核酸檢測

1.2.3.1 病毒RNA提取按照美國Promega公司生產的Maxwell16 Viral Total Nucleic Acid Purification Kitey及配套儀器Maxwell16 Instrument操作說明提取病毒RNA。

1.2.3.2 Realtime RT-PCR檢測提取的病毒RNA按照廣州達安基因試劑公司提供的試劑盒說明配置反應體系，經50℃反轉錄15min，95℃變性15min，再按94℃×15s→55℃×45s，循環40次，反應體系為25μl。熒光通道檢測選用FAM通道。

1.2.3.3 結果判斷擴增曲線無對數增長期或Ct值＞38判為陰性，曲線有明顯的對數增長期且Ct值≤38判為陽性。

2 結果

2.1 麻疹病毒病原學檢測結果及流行病學特征

2.1.1 麻疹病毒血清IgM抗體及核酸檢測結果2013年-2015年全市共檢測麻疹疑似病例血清標本699例，血清陽性標本17例，咽拭子標本651例，病毒核酸陽性標本11例。其中血清IgM抗體及核酸同時為陽性標本10例。2013年沒有陽性病例，2014年麻疹血清IgM抗體和核酸檢測陽性者為同一人，實驗室診斷病例1例，2015年實麻疹血清IgM抗體陽性16例，其中核酸檢陽性者9例，另有一例血清IgM抗體陰性而核酸陽性，故實驗室診斷病例17例，2013年-2015年宜春市實驗室診斷病例共計18例。見表1。

表1 麻疹疑似病例標本檢測陽性率

2.1.2 流行病學特征18例實驗室診斷病例地區分布僅在袁州區、高安市、萬載縣、銅鼓縣4個市、區縣，分別為袁州區6例、高安市7例、萬載縣1例、銅鼓縣1例。時間分布主要集中在4-9月份（見圖1）；年齡主要分布在小年齡＜8月齡及〈18歲以上年齡組（見表2），最小發病年齡為4月齡，最大為43歲。麻疹疫苗免疫史：無MCV免疫史6例，免疫史不詳9例，免疫史不詳的比例與年齡沒有很明顯相關性。

圖1 2013-2015年宜春市麻疹實驗室診斷病例月分布圖

表2 2013年～2015年宜春市麻疹病例發病年齡構成比

3 討論

宜春市近年來麻疹發病接近消除的水平，但2015年麻疹疫情出現抬頭趨勢，消除麻疹的目標也面臨很大挑戰。為加大對麻疹疫情監控力度，盡早對麻疹疑似病例進行實驗室確診，及時阻斷麻疹病毒傳播，2013年4月，宜春市在血清學診斷基礎上，引進了麻疹病毒realtime RT-PCR檢測技術，建立了麻疹和風疹病毒病原學核酸快速診斷實驗室網絡，進一步縮短麻疹病例實驗室診斷時間，彌補ELISA法檢測血清特異性IgM抗體在發病早期存在一定程度的漏檢[3]。ELISA法是基層麻疹監測網絡實驗室通用的檢測手段，但一些處于感染早期(出疹3d內)或免疫功能低下的患者體內麻疹IgM抗體滴度比較低，容易造成漏檢[4，5]。且風疹與麻疹在臨床上難以鑒別，為確?？刂坪拖檎罟ぷ鞯募皶r有效性，有必要對疑似的所有發熱、出疹病例開展麻疹和風疹的PCR(real－time PCR)及特異性免疫球蛋白M(IgM)同步檢測。本調查中有1例核酸檢測陽性而血清IgM為陰性，所以對早期血清IgM陰性的疑似病例也可用此法復檢，可增加疑似病例的麻疹診斷率。但也要結合麻疹疫苗接種史、核實接種疫苗等情況綜合判斷，避免假陽性[6]。

調查表明，18例病例主要分布在袁州區及高安市兩個人口密度較大的區、市；而且麻疹發病有明顯的季節特征，主要集中在4-9月，發病高峰在春、夏季，因此，在麻疹高發季節來臨前，應加強對托幼機構、學校等場所的疫情監測，有針對性地開展強化免疫的相關措施，避免麻疹暴發流行；袁州區6例病例全部是9個月及以下嬰兒，且均未接種過麻疹疫苗，發病率較高的主要原因是該時期的嬰幼兒尚未到麻疹疫苗的基礎免疫時間，其自身遺傳母親相應抗體的水平較低，建議加強袁州區常規免疫規劃管理，提高人群免疫成功率，擴大易感人群疫苗接種范圍，定期開展挨家挨戶“掃蕩式”的查漏補種工作，對高危人群適時開展強化免疫，消除免疫空白，而高安市7例均為18歲以下病例，大部分人麻疹病例免疫史不詳，致使免疫空白、免疫失效和免疫裂隙，成為發病的主要原因。也有可能是隨著其接種麻疹疫苗的時間比較久遠、體內麻疹抗體水平已明顯下降、極易感染麻疹病毒而致病[7，8]。由此可見，成人已成為麻疹發病的高危人群，應適時開展大齡兒童的強化免疫工作[9]。

麻疹陽性病例中，有6例血清IgM抗體陽性而核酸檢測為陰性，提示我市麻疹病例咽拭子標本采集還是存在很大問題，而且近年我國其他省份都開始出現新的基因型別，因此，需要進一步提高陽性病例咽拭子標本采集率和病毒分離率，盡可能獲得更多的毒株，及時發現新的基因型別，為麻疹防控策略提供科學依據[10]。

建議各級疾控中心高度重視加強特殊人群如邊遠貧困地區兒童的免疫接種，有針對性的強化免疫，如加強成年人的麻疹疫苗接種，盡可能消除免疫空白地區，全面提高目標人群免疫水平，達到控制、消除、消滅麻疹的目的。同時定期開展人群免疫成功率調查和健康人群免疫水平監測，對本市有效控制麻疹的發生有著重要意義。

【致謝】感謝江西省疾病預防控制中心疾病控制檢驗所對本研究的大力支持。

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R511.1，R446.62

A

1674-1129(2016)06-0791-02

10.3969/j.issn.1674-1129.2016.06.034麻疹是一種傳染性很強的呼吸道傳染病，嚴重危害兒童健康，2013年，我國國務院《衛生事業發展“十二五”規劃》提出了要努力實現消除麻疹的目標[1]。2013年4月起江西省麻疹/風疹疑似病例病原學的核酸快速診斷網絡正式建立并開始運轉[2]。宜春市自建立麻疹核酸實時熒光定量PCR (real－time PCR)實驗室以來，為控制和消除麻疹工作起到了推進作用。為了進一步提高麻疹監測水平，科學地分析現階段麻疹流行因素，探索麻疹發病原因，本研究對2013年-2015年宜春市麻疹實驗室監測的1350份疑似麻疹病例的樣本結果進行分析。

2016-07-26；

2016-11-30)