聯(lián)合檢測CTGF和PAI-1對原發(fā)性IgA腎病病情評估價值研究

施穎 沈衛(wèi)強

聯(lián)合檢測CTGF和PAI-1對原發(fā)性IgA腎病病情評估價值研究

施穎 沈衛(wèi)強

目的 探討聯(lián)合檢測結(jié)締組織生長因子（CTGF）和纖溶酶原激活物抑制物-1（PAI-1）對原發(fā)性IgA腎?。≒IgAN）患者病情評估的價值。方法 ELISA法檢測50例PIgAN患者（PIgAN患者組）血清CTGF和PAI-1水平，并根據(jù)病理Lee氏分級法將PIgAN患者組分為輕度組（Ⅰ～Ⅲ級）和重度組（Ⅳ～Ⅴ級），采用ROC曲線和曲線下面積（AUC）評價CTGF和PAI-1在PIgAN病情評估中的價值。另設(shè)年齡、性別相匹配的30例健康體檢者作為對照組。結(jié)果 PIgAN患者組血清CTGF和PAI-1水平均明顯高于對照組（均P＜0.05）。重度組患者血清CTGF和PAI-1水平均明顯高于輕度組（均P＜0.05）。血清CTGF和PAI-1單獨評估患者病情時，ROC曲線的AUC分別為0.844（95%CI：0.736～0.995，P＜0.05）、0.900（95%CI：0.811～0.988，P＜0.05），而兩者聯(lián)合檢測評估病情時，其AUC為0.927（95%CI：0.856～0.998，P＜0.05）。結(jié)論 聯(lián)合檢測血清CTGF和PAI-1對PIgAN患者病情評估有較高價值。

原發(fā)性IgA腎病 結(jié)締組織生長因子 纖溶酶原激活物抑制物-1 ROC曲線 血液 診斷

【 Key words】 Primary immunoglobulin A nephropathy Connective tissue growth factor Plasminogen activator inhibitor-1 Receiver operating characteristic curve Blood Diagnosis

IgA腎?。↖gAN）是指以IgA為主的免疫球蛋白彌漫沉積于腎小球系膜區(qū)及毛細血管襻而引起的原發(fā)性腎小球病變[1]。目前，對IgAN的診斷和病情評估主要采用經(jīng)皮腎穿刺組織病理活檢，但此為有創(chuàng)性檢查，有發(fā)生并發(fā)癥的風險。因此，尋找到創(chuàng)傷小、可重復、能準確評估IgAN患者病情的血清指標臨床意義重大。研究表明，結(jié)締組織生長因子（CTGF）和纖溶酶原激活物抑制物-1（PAI-1）在原發(fā)性IgAN（PIgAN）患者病情發(fā)生、發(fā)展中起著重要作用[2-3]。本研究通過檢測PIgAN患者血清CTGF和PAI-1水平，探討兩者對PIgAN病情評估的價值，以期為臨床診治提供參考。

1 對象和方法

1.1 對象 選取2014年6月至2015年6月本院腎內(nèi)科新發(fā)PIgAN患者50例（PIgAN患者組），均行經(jīng)皮腎穿刺組織病理活檢確診。排除標準：（1）3個月內(nèi)使用過細胞毒藥物、糖皮質(zhì)激素等免疫抑制劑；（2）其他疾病引起的繼發(fā)性IgAN患者；（3）近期有嚴重感染、嚴重心肺腦疾病、惡性腫瘤、非甾體類抗炎藥應(yīng)用史患者；（4）穿刺組織標本腎小球數(shù)＜6個的PIgAN患者；（5）表現(xiàn)為急性腎功能不全的PIgAN患者。PIgAN患者組中男29例，女21例；年齡20～56（36.72±10.07）歲。另擇同期健康體檢者30例作為對照組，其中男17例，女13例；年齡21～57（37.28±9.84）歲。PIgAN患者組與對照組性別、年齡比較均無統(tǒng)計學差異（均P＞0.05）。本研究獲患者和家屬知情同意并簽署知情同意書。

1.2 檢測方法 PIgAN患者組于入院時采集晨起空腹外周靜脈血5ml，對照組于體檢時采集空腹外周靜脈血5ml。兩組標本離心20min（3 000r/min）靜置，收集上層血清，保存于-80℃低溫冰箱待檢測。血清CTGF和PAI-1水平測定采用ELISA法。Human CTGF ELISA試劑盒購自上海酶聯(lián)生物科技有限公司，Human PAI-1ELISA試劑盒購自上海西唐生物科技有限公司，具體操作嚴格按照說明書進行；誤差控制在10%以內(nèi)，重復2次，取平均值。

1.3 病情評估 采用病理Lee氏分級法[4]進行PIgAN患者組病情評估。（1）Ⅰ級：大多腎小球正常，偶爾輕度系膜增寬(節(jié)段)伴/不伴細胞增生，無腎小管和間質(zhì)損害；（2）Ⅱ級：腎小球示局灶系膜增生和硬化（＜50%），罕見小新月體，無腎小管和間質(zhì)損害；（3）Ⅲ級：彌漫腎小球系膜增生和增寬（偶爾局灶節(jié)段），偶有粘連和小新月體，偶有局灶間質(zhì)水腫和細胞浸潤，罕見腎小管萎縮；（4）Ⅳ級：重度彌漫系膜增生和硬化，部分或全部腎小球硬化，＜45%的腎小球有新月體，有明顯的腎小管萎縮和間質(zhì)浸潤；（5）Ⅴ級：與Ⅳ級相似，但更嚴重，＞45%的腎小球有新月體。將病理Lee氏分級Ⅰ～Ⅲ級作為輕度組，Ⅳ～Ⅴ級作為重度組。

1.4 統(tǒng)計學處理 應(yīng)用SPSS18.0統(tǒng)計軟件；計量資料以表示，兩組間比較采用t檢驗；以PIgAN病情分級為狀態(tài)變量（Ⅳ～Ⅴ級為陽性，Ⅰ～Ⅲ級為陰性），血清CTGF和PAI-1水平為檢驗變量，繪制ROC曲線并計算曲線下面積（AUC）。

2 結(jié)果

2.1 PIgAN患者組與對照組血清CTGF和PAI-1水平比較 見表1。

表1 PIgAN患者組與對照組血清CTGF和PAI-1水平比較

由表1可見，PIgAN患者組血清CTGF和PAI-1水平均明顯高于對照組，兩組比較差異均有統(tǒng)計學意義（均P＜0.05）。

2.2 PIgAN患者組中輕度組和重度組患者血清CTGF和PAI-1水平比較 PIgAN患者組中輕度組患者31例（62.00%），重度組患者19例（38.00%）；輕度組和重度組患者血清CTGF和PAI-1水平比較見表2。

表2 輕度組和重度組患者血清CTGF和PAI-1水平比較

由表2可見，重度組患者血清CTGF和PAI-1水平均明顯高于輕度組，兩組比較差異均有統(tǒng)計學意義（均P＜0.05）。

2.3 血清CTGF和PAI-1水平對PIgAN病情評估的ROC曲線 見圖1。

圖1 血清CTGF和PAI-1水平對PIgAN病情評估的ROC曲線

由圖1可見，單獨以血清CTGF水平評估PIgAN病情的ROC曲線AUC為0.844（95%CI：0.736～0.995，P＜0.05）；單獨以血清PAI-1水平評估PIgAN病情的ROC曲線AUC為0.900（95%CI：0.811～0.988，P＜0.05）；聯(lián)合檢測血清CTGF和PAI-1水平評估PIgAN病情的ROC曲線AUC為0.927（95%CI：0.856～0.998，P＜0.05）。

3 討論

IgAN是最常見的原發(fā)性腎小球腎炎，約20%～30%的患者在確診后20～25年內(nèi)不可逆地進展為終末期腎病。盡管目前對PIgAN的診治水平有了較大提高，但其確診仍依賴于腎穿刺組織病理活檢。如能從血清中尋找到創(chuàng)傷小、敏感、便捷、可重復、能準確評估PIgAN患者病情的指標，將有利于早期診斷、指導治療及預測預后。目前認為細胞外基質(zhì)積聚IgA，導致腎間質(zhì)纖維化和腎小球硬化在PIgAN的發(fā)生和發(fā)展中有重要影響。

CTGF是于1991年在培養(yǎng)的人臍靜脈內(nèi)皮細胞中分離出來的細胞因子，在人體許多組織均有表達，尤以腎臟含量為最高。CTGF具有調(diào)控細胞增殖、分化，促進細胞黏附、增生和細胞外基質(zhì)合成等作用。Nonaka等[5]研究發(fā)現(xiàn)CTGF在腎小管中的表達水平與腎小管損傷的程度密切相關(guān)。轉(zhuǎn)化生長因子-β（TGF-β）是目前發(fā)現(xiàn)的最強促腎臟纖維化因子[6]，陶少平等[7]研究證實，CTGF可在TGF-β誘導下參與成纖維細胞或腎小管上皮細胞細胞外基質(zhì)的合成，最終導致間質(zhì)纖維化的發(fā)生。

PAI-1是一種絲氨酸蛋白水解酶抑制劑，其活性的改變能夠調(diào)節(jié)細胞外基質(zhì)的積聚與降解[8]。周文華等[9]通過動物實驗發(fā)現(xiàn)，PAI-1表達水平上調(diào)可使腎小球內(nèi)纖維蛋白沉積，抑制系膜細胞基質(zhì)的降解。Grandaliano等[10]亦證實在IgAN患者中PAI-1表達增高，PAI-1可促進IgAN患者腎小管間質(zhì)纖維化，參與IgAN的發(fā)生。本研究結(jié)果顯示，PIgAN患者的血清CTGF和PAI-1水平均明顯高于對照組，重度組均明顯高于輕度組，結(jié)合文獻分析表明，CTGF和PAI-1在PIgAN的發(fā)生和發(fā)展中起重要作用。

同時，本研究通過ROC曲線對CTGF和PAI-1對PIgAN患者病情評估的價值進行研究。結(jié)果表明，CTGF和PAI-1均可單獨評估PIgAN病情，而聯(lián)合檢測CTGF和PAI-1對病情評估價值更大。因此本研究認為，在PIgAN患者中聯(lián)合檢測血清CTGF和PAI-1水平，有助于判斷及預測患者病情，對指導臨床治療決策有一定意義。

[1] Tatematsu M,Yasuda Y,Morita Y,et al.Complete remission within 2 years predicts a good prognosis after methylprednisolone pulse therapy in patients with IgA nephropathy[J].Clin Exp Nephrol, 2012,16(6):883-891.

[2] 張麗英,夢雅平.CTGF在IgA腎病腎組織中的表達與臨床病理關(guān)系[J].中國中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志,2012,13(1):67-69．

[3] 丁瑞,陳香美,劉述文,等.PAI-1基因4C4G基因型與IgA腎病易感性及臨床表現(xiàn)的關(guān)系[J].中華醫(yī)學遺傳學雜志,2006,23(4):449-451．

[4] 茹涼,張欣,朱洪濤,等.IgA腎病患兒血管緊張素Ⅱ變化的臨床意義[J].臨床兒科雜志,2014,32(8):736-739.

[5] Nonaka TakahashiS,Fujita T,TakahashiT,et al.TGF‐beta 1 and CTGF mRNAs are correlated with urinary protein level inIgA nephropathy[J].J Nephrol,2008,21(1):53-63.

[6] KalliakmaniP,Nakopoulou L,Tsakas S,et al.Urinary interleukin-6 (IL-6)and transforming growth factor(TGF-β)levels incorticosteroidtreated patients with IgAnephropathy[J].Clin Nephrol,2011, 76(2):144-150.

[7] 陶少平,陳學峰,孫艷,等.黃芪注射液對糖尿病腎病患者血轉(zhuǎn)化生長因子原-β1及Ⅳ型膠原水平的影響及其意義[J].中國中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志,2006,7(3):156-157.

[8] 張艷輝,王慧,杜宇,等.纖溶酶原激活物抑制物-1基因4G/5G多態(tài)性與內(nèi)蒙古漢族人群IgA腎病患者病理特點的相關(guān)性研究[J].包頭醫(yī)學院學報,2010,26(2):8-11.

[9] 周文華,孔麗麗,賈冶,等.GSK3β抑制劑對糖尿病腎病大鼠腎組織TGF-β1和血清PAI-1表達的影響[J].中國實驗診斷,2013,17(4): 634-638．

[10] Grandaliano G,Pontrellip,Cerullo G,et al.Protease activated receptor 2 expression in IgA nephropathy:a potential role in the pathogenesis of interstitial fibrosis[J].J Am Soc Nephrol,2003, 14(8):2072-2083.

Clinical value of serum CTGF and PAI-1 in patients with primary immunoglobulin A nephropathy

SHI Ying,SHEN Weiqiang. Department of Urology,Deqing People's Hospital,Huzhou 313200,China

Objective To investigate serum connective tissue growth factor(CTGF)and plasminogen activator inhibitor-1 (PAI-1)levels in patients with primary immunoglobulin A nephropathy(PIgAN). Methods The serum CTGF and PAI-1 levels were assayed by using ELISA in 50 patients with PIgAN and 30 health subjects(control group).According to the Lee's pathological grading,the cases were divided into mild group and severe group.The receiver operating characteristic(ROC) curve was used to analyze prognostic values of serum CTGF and PAI-1 levels for PIgAN patients. Results The serum levels of CTGF and PAI-1 in patients with PIgAN were higher than those in control group (both P＜0.05).Compared with the mild group, the serum levels of CTGF and PAI-1 in severe group were increased significantly (all P＜0.05).ROC curve showed the AUC of CTGF and PAI-1 was 0.844(95%CI:0.736～0.995,P＜0.05)and 0.900(95%CI:0.811～0.988,P＜0.05)respectively;whereas the AUC of combined CTGF and PAI-1 was 0.927(95%CI:0.856～0.998,P＜0.05).Conclusion The combination of serum CTGF and PAI-1 levels may improve the evaluation of disease severity for patients with PIgAN.

2016-01-06）

（本文編輯：李媚）

313200 德清縣人民醫(yī)院內(nèi)四科

施穎，E-mail：yyt1982@sina.com