血清Afamin在冠心病中臨床意義

曾伯石，周青山

血清Afamin在冠心病中臨床意義

曾伯石，周青山

目的檢測(cè)冠心病(CHD)患者血清Afamin濃度水平，并探討Afamin在冠心病中的臨床意義。方法酶聯(lián)免疫反應(yīng)方法檢測(cè)167例CHD患者（CHD組）及127例健康對(duì)照者（對(duì)照組）血清Afamin水平，同時(shí)收集所有受試者血糖、血脂等臨床資料。結(jié)果CHD組血清Afamin濃度明顯高于對(duì)照組 (417.78±55.87vs231.67±71.71,P＜0.01)。相關(guān)分析表明，CHD組血清Afamin水平與MDA(r=0.271，P=0.011)、hs-CRP(r=0.191，P=0.021)、TNF-α(r=0.212,P=0.034)、HOMA-IR(r=0.161，P=0.021)水平呈正相關(guān)，但與HDL-C(r=-0.191，P=0.029)、GSH(r=-0.376，P＜0.01)水平呈負(fù)相關(guān)；多重線性回歸分析提示，MDA和HOMA-IR是影響Afamin水平的獨(dú)立相關(guān)因素；血清Afamin診斷冠心病ROC曲線下面積為0.957，最佳截?cái)帱c(diǎn)為460.11 ng/ml。結(jié)論血清Afamin與胰島素抵抗、氧化應(yīng)激密切相關(guān)，有助于冠心病診斷以及病情檢測(cè)。

Afamin；冠心病；胰島素抵抗；丙二醛

冠心病(coronary heart disease，CHD)主要是一種由于冠狀動(dòng)脈粥樣硬化導(dǎo)致心肌供血不足的臨床代謝綜合征[1]。冠心病發(fā)病率高，危害大，嚴(yán)重影響廣大人民的身心健康。冠心病的確切發(fā)病機(jī)制至今尚未明了，國(guó)內(nèi)學(xué)者現(xiàn)一致認(rèn)為內(nèi)皮細(xì)胞損傷是冠心病發(fā)生發(fā)展的中心環(huán)節(jié)[1-2]，而其損傷與內(nèi)皮細(xì)胞氧化應(yīng)激以及機(jī)體胰島素抵抗密切相關(guān)[1-2]。Afamin又稱維生素E結(jié)合蛋白，是一種主要由肝臟分泌的具有多種生物學(xué)效應(yīng)的糖蛋白[3]。既往研究發(fā)現(xiàn)，Afamin廣泛參與免疫、炎癥反應(yīng)[4]。近年研究發(fā)現(xiàn)，Afamin能夠與硫氧還蛋白結(jié)合，導(dǎo)致氧化應(yīng)激[5]；Afamin表達(dá)水平增強(qiáng)會(huì)導(dǎo)致胰島素抵抗相關(guān)[6]。鑒于氧化應(yīng)激和胰島素抵抗在冠心病發(fā)生發(fā)展中的重要作用[7]，本研究通過(guò)檢測(cè)血清Afamin在冠心病患者中的表達(dá)水平，以探討其在冠心病中的臨床意義。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象 收集2014年1月～2015年8月在我院心內(nèi)科導(dǎo)管室經(jīng)過(guò)冠狀動(dòng)脈造影明確診斷為CHD患者167例為CHD組，其中男86例，女81例，平均年齡（48.12±13.23）歲。選取同期健康體檢正常的127例為對(duì)照組，其中男65例，女62例，平均年齡（49.35±14.12）歲。所有操作和測(cè)量均征得受試者同意，并簽署知情同意書。

1.2 檢測(cè)指標(biāo)

1.2.1 人體生理指標(biāo) 包括身高、體重、腰圍，按相關(guān)公式計(jì)算人體質(zhì)量指數(shù)(BMI)。其中體重指數(shù)=體重/身高的平方。

1.2.2 血生化指標(biāo) 清晨抽取受試者空腹靜脈血，按照常規(guī)經(jīng)典方法檢測(cè)空腹血糖(FPG)、甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-c)、低密度脂蛋白(LDL-c)及超敏C-反應(yīng)蛋白(hs-CRP)水平以及空腹血糖水平(FBG)；采用南京建成生物公司相關(guān)試劑盒檢測(cè)丙二醛(MDA)水平；采用武漢谷歌生物有限公司相關(guān)試劑盒檢測(cè)血清Afamin和還原型谷胱甘肽(GSH)水平。利用放射免疫法檢測(cè)血清胰島素水平(FINS)，計(jì)算胰島素指數(shù)(HOMA-IR)。HOMAIR=FBG×FINS/22.5）。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS18.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量資料以±s表示，兩組間比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)。Afamin與血生化指標(biāo)之間的關(guān)系采用Pearson相關(guān)法分析；多元線性回歸探討影響血清Afamin因素。Logistic回歸分析冠心病發(fā)病的危險(xiǎn)因素；進(jìn)行受試者Afamin對(duì)CHD診斷工作特征(ROC)曲線分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組一般資料比較 CHD組和對(duì)照組在年齡、性別比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05），而兩組的BMI、腰圍、MDA、LDL-C、TG、TC、hs-CRP、HOMA-IR、HDL-C和GSH均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異 （P＜0.05或P＜0.01）。見表1。

表1 兩組一般資料比較

2.2 兩組血清Afamin水平比較 CHD組血清Afamin濃度明顯高于對(duì)照組 (417.78±55.87vs231.67± 71.71,P=0.000)。

2.3 相關(guān)分析以及多元線性回歸分析 CHD組血清 Afamin與年齡 (r=0.404，P=0.123)，BMI(r= 0.323，P=0.389)、腰圍(r=0.378，P=0.312)、LDL-C(r= 0.245，P=0.212)、TG(r=0.451，P=0.131)、TC(r=0.537，P=0.271)無(wú)相關(guān)性，而與HDL-C(r=-0.191，P=0.029)、GSH(r=-0.376，P=0.000)負(fù)相關(guān)，與MDA(r=0.271，P= 0.011)、hs-CRP(r=0.191，P=0.021)、TNF-α(r=0.212,P= 0.034)、HOMA-IR(r=0.161，P=0.021)正相關(guān)。以Afamin為因變量，上述與之呈顯著性關(guān)系的指標(biāo)作為自變量，進(jìn)行多元線性逐步回歸分析，結(jié)果顯示MDA、HOMA-IR是影響Afamin水平的重要因素。相關(guān)回歸方程YAfamin=321.36－12.26XMDA-9.25XHOMA-IR（R2=0.812, F=40.36，P=0.020）。

2.4 Logistic回歸分析冠心病診斷的危險(xiǎn)因素將表1中兩組間有差異的相關(guān)因素——BMI、腰圍、MDA、LDL-C、TG、TC、hs-CRP、HOMA-IR、HDL-C和GSH進(jìn)行Logisticc回歸分析，結(jié)果表明Afamin (OR=1.012，95%CI：1.007～1.102，P=0.034)，腰圍(OR= 1.213，95%CI：1.131～1.412，P=0.021)，hs-CRP（OR= 1.022，95%CI：1.013～1.125，P=0.041)是CHD發(fā)病的危險(xiǎn)因素。

2.5 血清Afamin冠心病診斷的ROC曲線 血清Afamin對(duì)冠心病診斷ROC曲線下面積為0.957，95%CI：0.933～0.980，最佳截點(diǎn)為460.11 ng/ml(敏感度為71.4%，特異度89.1%，P=0.039)，約登指數(shù)為0.606。見圖1。

圖1 血清Afam in診斷CHD的ROC曲線

3 討論

在冠心病發(fā)生發(fā)展過(guò)程中，存在諸多的病理生理方面的改變，其中氧化應(yīng)激在冠心病的發(fā)生發(fā)展進(jìn)程中起著至關(guān)重要的作用[1]。生理情況下，機(jī)體氧化應(yīng)激和抗氧化應(yīng)激系統(tǒng)處于穩(wěn)態(tài)平衡狀態(tài)，即機(jī)體內(nèi)產(chǎn)生氧自由基形成與脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)的終末產(chǎn)物和保護(hù)性抗氧化物質(zhì)處于動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài)。在冠心病發(fā)展過(guò)程中這種平衡被打亂，導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞出現(xiàn)氧化損傷，從而促使冠心病的發(fā)生發(fā)展[7]。

Afamin的基因位于人染色體1q21-22，包含8個(gè)外顯子，長(zhǎng)4174 bp。在冠心病模型大鼠中，Afamin表達(dá)降低，會(huì)導(dǎo)致氧化損傷發(fā)生，提示Afamin可以調(diào)節(jié)氧化應(yīng)激[8]。既往已對(duì)Afamin在腫瘤、炎性腸疾病、糖尿病等疾病臨床意義進(jìn)行大量的研究[9-11]，然而Afamin在冠心病患者血清表達(dá)水平以及臨床意義鮮見報(bào)道。本研究發(fā)現(xiàn)，冠心病組患者血清Afamin濃度明顯高于健康對(duì)照組；相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)，Afamin與HDL-C、GSH呈負(fù)相關(guān)，與MDA、hs-CRP、HOMA-IR呈正相關(guān)。Koninger在對(duì)Afamin在多囊卵巢綜合癥臨床意義進(jìn)行研究時(shí)亦發(fā)現(xiàn)，多囊卵巢綜合癥患者Afamin血清水平明顯高于正常對(duì)照組人群，Afamin與胰島素敏感性亦成正比，但同時(shí)發(fā)現(xiàn)Afamin與體重指數(shù)成正比[9]。Dieplinger等[10]發(fā)現(xiàn)，剔除Afamin基因時(shí)，增強(qiáng)大鼠胰島素敏感性。上述研究提示，血清Afamin濃度增高可能是導(dǎo)致胰島素抵抗的原因之一。其機(jī)制可能是Afamin可以激活NLRP3炎癥體，促使無(wú)活性的caspase-1前體轉(zhuǎn)化為活性caspase-1，后者介導(dǎo)IL-1β的釋放。Zhou研究發(fā)現(xiàn)，Afamin在多囊卵巢綜合癥患者炎癥調(diào)節(jié)過(guò)程中發(fā)揮重要作用，這可能是Afamin與hs-CRP呈正比的原因[11]。綜上所述，在血清Afamin增高時(shí)，可介導(dǎo)氧化應(yīng)激、胰島素抵抗以及炎癥的發(fā)生，最終導(dǎo)致冠心病發(fā)生發(fā)展。然而，血清Afamin在冠心病發(fā)病中的作用分子機(jī)制并未見明確報(bào)道。

目前在冠心病診斷方面問(wèn)題比較突出。雖然冠脈造影檢查是冠心病診斷以及病情檢測(cè)的 “金標(biāo)準(zhǔn)”，但因存在有創(chuàng)性、取樣標(biāo)本穿刺偏移、價(jià)格高昂、具有一定的風(fēng)險(xiǎn)等缺陷，嚴(yán)重制約著其在臨床中的廣泛應(yīng)用[12]。臨床迫切需要操作簡(jiǎn)單、且重復(fù)性好的無(wú)創(chuàng)診斷方法，既便于冠心病診斷，又利于病情監(jiān)測(cè)。血清生物標(biāo)志物診斷因其重復(fù)性好、取樣創(chuàng)傷小，近年來(lái)來(lái)在臨床CHD病情檢測(cè)方面得到廣泛應(yīng)用[13]。本研究通過(guò)繪制ROC曲線分析，發(fā)現(xiàn)血清 Afamin對(duì)冠心病檢驗(yàn)ROC曲線下面積為0.957，最佳截點(diǎn)460.11 ng/ml(敏感度為71.4%，特異度89.1%，P=0.039)，約登指數(shù)分別為0.606。提示血清Afamin用于冠心病疾病診斷以及病情監(jiān)測(cè)方面檢驗(yàn)效能良好，值得進(jìn)一步深入研究。

綜上所述，Afamin與冠心病發(fā)生發(fā)展中的氧化應(yīng)激、炎癥、胰島素抵抗緊密相關(guān)，Afamin在CHD的診斷和檢測(cè)方面具有重要的臨床意義和良好的研究前景。

[1] Khavinson VKh,Lin'kova NS.Molecular mechanisms of cardiovascular disease[J].Usp Fiziol Nauk,2014,45(3):57-65.

[2] Leopold JA.Antioxidants and coronary artery disease:from pathophysiology to preventive therapy[J].Coron Artery Dis, 2015,26(2):176-183.

[3] Lichenstein HS,Lyons DE,Wurfel MM,et al.Afamin is a new member of the albumin,a-fetoprotein,and vitamin D-binding protein gene family[J].J Biol Chem,1994,269:18149-18154.

[4] Liu H,Ren H,Spear BT.The mouse alpha-albumin(afamin) promoter is differentially regulated by hepatocyte nuclear factor 1alpha and hepatocyte nuclear factor 1beta[J].DNA Cell Biol, 2011,30:137-147.

[5] Voegele AF,Jerkovic L,Wellenzohn B,et al.Characterization of the vitamin E-binding properties of human plasma afamin[J]. Biochemistry,2002,41:14532-14528.

[6] Hurwitz BE,Klimas NG,Llabre MM,et al.HIV,metabolic syndrome X,inflammation,oxidative stress,and coronary heart disease risk:role of protease inhibitor exposure[J].Cardiovasc Toxicol,2004,4(3):303-316.

[7] Smith BW,Adams LA.Non-alcoholic fatty liver disease[J].Crit Rev Clin Lab Sci,2011,48:97-113.

[8] Nishio H,Dugaiczyk A.Complete structure of the human alpha-albumin gene,a new member of the serum albumin multigene family[J].Proc Natl Acad Sci USA,1996,93:7557-7561.

[9] Koninger A,Edimiris P,Koch L,et al.Serum concentrations of afamin are elevated in patients with polycystic ovary syndrome[J]. Endocr Connect,2014,3:120-126.

[10] Dieplinger H,Dieplinger B.Afamin-A pleiotropic glycoprotein involved invarious disease states[J].Clin Chim Acta.2015,446: 105-110.

[11] Seeber B,Morandell E,Lunger F,et al.Afamin serum concentrations are associated with insulin resistance and metabolic syndrome in polycystic ovary syndrome[J].Reprod Biol Endocrinol,2014,12:8814.

[12] Achenbach S.Computed tomography coronary angiography[J].J Am Coll Cardiol,2006,48(10):1919-1928.

[13] Spoletini I,Vitale C,Rosano GM.Biomarkers for predicting postmenopausal coronary heart disease[J].Biomark Med,2011,5 (4):485-495.

Clinical significance of serum Afamin in CHD

Zeng Boshi,Zhou Qingshan ICU,Renmin Hospital of Wuhan University,Wuhan,Hubei,430060,China

Objective To detect the levels of serum Afamin in patients with coronary heart disease (CHD),and to analyze the clinical significance of Afamin in CHD.MethodsEnzyme linked immunosorbent assay (ELISA)was used to detect the levels of serum Afamin in CHD patients(the CHD group,n=167)and healthy persons(the control group,n=127).Such clinical data as blood glucose and blood lipid of all subjects were collected.ResultsThe concentration of serum Afamin in the CHD group was much higher than that in the control group(417.78±55.87 vs 231.67±71.71;P＜0.01).As indicated by relevant analysis,the levels of serum Afamin in the CHD group was positively correlated to the levels of MDA(r=0.271,P=0.011),hs-CRP(r=0.191,P=0.021),TNF-α (r=0.212,P=0.034)and HOMA-IR(r=0.161,P=0.021)but negatively correlated to the levels of HDL-C(r=-0.191,P=0.029) and GSH(r=-0.376,P＜0.01);multiple linear regression analysis indicated that MDA and HOMA-IR were independent related factors affecting the levels of Afamin;the area under the ROC curve for the diagnosis of CHD with Afamin was 0.957,and the best cut-off point was 460.11 ng/m l.ConclusionSerum Afamin is closely related to oxidative stress,inflammation and insulin resistance in CHD.It is useful for the diagnosis and disease surveillance of CHD.

Afamin;CHD;insulin resistance;MDA

R 541

A

1004-0188（2016）12-1437-03

10.3969/j.issn.1004-0188.2016.12.025

2015-11-10）

430060武漢，武漢大學(xué)人民醫(yī)院重癥監(jiān)護(hù)科

周青山，E-mail：zhouqingshano6@medmail.com.cn