尿NGAL和Kim—1對(duì)2型糖尿病腎病早期診斷的意義

摘要：目的 探討2型糖尿病（T2DM）患者尿NGAL和Kim-1的改變及其對(duì)糖尿病腎病（DN）早期診斷的臨床意義。方法 選擇2型糖尿病（T2DM）患者80例，根據(jù)尿清蛋白排泄率（UAER）分為3組，正常清蛋白尿（NA）組20例、微量清蛋白尿（MA）組35例、臨床腎病（CN）組25例；同期選取非腎病患者20例作為對(duì)照組。應(yīng)用ELISA法檢測(cè)患者尿NGAL（uNGAL）水平，應(yīng)用免疫速率散射比濁法檢測(cè)血清Cystatin C水平，分析尿NGAL及血清Cystatin C水平與腎小球?yàn)V過(guò)率（GFR）之間的相關(guān)關(guān)系。結(jié)果 ①M(fèi)A組、CN組患者尿NGAL和血清Cystatin C水平均較對(duì)照組升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），其中CN組患者尿NGAL和血清Cysta tin C水平最高分別為（95.56±32.68）ug/L和（4.73±1.62）mg/L。②Pearson相關(guān)分析：糖尿病患者尿NGAL和血清Cystatin C水平與GFR均呈負(fù)相關(guān)（r值分別為-0.312和-0.412，P<0.05），且尿NGAL與GFR的相關(guān)性更密切。結(jié)論 糖尿病患者尿NGA與GFR有較好的相關(guān)性，尿NGAL和血清Cystatin C是診斷早期DN敏感而準(zhǔn)確的指標(biāo)，有望用于臨床監(jiān)測(cè)。

關(guān)鍵詞：NGAL；Cystatin C；糖尿病腎病；早期診斷

Abstract：Objective Explore the type 2diabetes mellitus（T2DM）patients serum NGAL，Cystatin C change and to the diabetes nephrosis（DN）earlydiagnosis of clinical significance.Methods Selection type 2diabetes mellitus（T2DM）in 80cases，According to the urinary albumin excretion rate（UAER）intothree groups，Is temperamental predominance proteinuria（making）group of 20cases，trace qing proteinuria（MA）group 35examples，clinical disease（CN）group in 25；Select the same period the kidney disease patients 20cases as control group.Application ELISA detection of patients with urinary NGAL（uNGAL）level Application immune rate than scattering turbidity method to detect serum Cystatin C level，analysis and the Cystatin urine NGAL C level and estimated glomerular（GFR）the relationship between.Results ①M(fèi)A group，CN groups of patients NGAL urine and serum Cystatin C level than control group，the difference was statistically significant increased（P<0.01），including CN groups of patients NGAL urine and serum Cysta tin C level is the highest for respectively 95.56+/-32.68ug/Land（4.73±1.62mg/L.（2）Pearson correlation analysis：patients with diabetes NGAL urine and serum Cystatin C level and do all negative correlation（P<0.05），and NGAL and the correlation of urine do more closely.Conclusion Diabetic patients with urinary NGAL do have good correlation，urine NGAL and serum Cystatin C is sensitive and accurate diagnosis of early DN index，is expected to used for clinical monitoring.

Key words：NGAL；Cystatin C；Diabetic nephropathy；Early diagnosis

中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白（NGAL），近年有研究認(rèn)為該蛋白有可能參與糖尿病的發(fā)生發(fā)展。研究表明其不僅參與多種腎臟病變過(guò)程中表現(xiàn)突出，還參與腎臟形態(tài)的形成及修復(fù)。胱抑素C（Cystatin C）是一個(gè)比較接近理想的內(nèi)源性指標(biāo)。本研究檢測(cè)DN患者尿NGAL和血清Cystatin C水平，并評(píng)價(jià)它們對(duì)DN早期診斷的意義。

1資料與方法

1.1一般資料 按WHO的糖尿病診斷和分型標(biāo)準(zhǔn)，收入我院2011年1月～4月2型糖尿病（T2DM）患者80例。按照尿清蛋白排泄率（UAER）分為正常清蛋白尿（NA）組20例，UAER<20Lg/min，男12例，女8例，平均年齡（55.5±8.2）歲；微量清蛋白尿（MA）組35例，20 Lg/min[UAER[200Lg/min，男12例，女13例，平均年齡（58.3±7.6）歲；臨床腎病（CN）組25例，UAER>200Lg/min，男11例，女14例，平均年齡（61.3±6.4）歲。對(duì)照組選取20例無(wú)其它的疾病，男12例，女8例，平均年齡（56.5±5.8）歲。

1.2方法 標(biāo)本收集清晨采取受試者靜脈血3ml，與促凝管中，4000r/min離心10min，取上清液取上清液存于-80℃冰箱保存。同時(shí)收集晨尿5m，l置于試管中，4000r/min離心15min，取上清液置于離心管中，凍存于-80℃冰箱中。

1.3實(shí)驗(yàn)方法 血清Cysta tin C采用美國(guó)美國(guó)貝克曼DXC800生化分析儀，試劑使用寧波美康，采用免疫速率透射比濁法測(cè)定，嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操。尿NGAL水平用ELISA方法檢測(cè)，ELISA試劑盒購(gòu)自上海滬峰ELISA專(zhuān)賣(mài)，實(shí)驗(yàn)步驟按試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。根據(jù)標(biāo)本的吸光度值，計(jì)算出各標(biāo)本相應(yīng)的NGAL濃度。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 1310軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。所有計(jì)量資料以（x±s）表示。尿NGAL和血清Cystatin C水平與GFR的相關(guān)分析采用線性回歸分析及person直線相關(guān)分析。

2結(jié)果

2.1糖尿病組與對(duì)照組患者各檢測(cè)指標(biāo)比較 NA組患者的各種指標(biāo)均正常，CN組患者的UAER較其他各組均升高（P<0.01），MA組患者的UAER較對(duì)照組明顯升高（P<0.01）。MA組及CN組的血清Cysta tin C與對(duì)照組相比，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，（P<0.05，見(jiàn)表1）。NA組、MA組、CN組患者的尿NGAL（uNGAL）水平均較對(duì)照組高，隨著UAER的增加而逐漸升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。各組患者尿NGAL和血清Cystatin C的水平見(jiàn)表1。

2.2相關(guān)性分析 T2DM患者尿NGAL水平與GFR水平呈顯著負(fù)相關(guān)（r=-0.312，0.4510；P<0.05）；血清Cystatin C水平與GFR水平呈顯著負(fù)相關(guān)（r=-0.4120，P

3討論

近年來(lái)，糖尿病（DM）被認(rèn)為是一種慢性、低度炎癥的亞臨床過(guò)程，NGAL蛋白作為一種新的急性時(shí)相反應(yīng)蛋白，作為1種炎性因子參與糖尿病的發(fā)生發(fā)展。目前，糖尿病腎病已是終末期腎衰的首位病因，所以對(duì)糖尿病腎病早期診斷及治療的研究具有重要的意義。目前以反映腎小球損傷為主的實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)診斷DN敏感性不高，所以難以及時(shí)準(zhǔn)確的發(fā)現(xiàn)早期腎臟損傷。有研究認(rèn)為，在DN進(jìn)展中，腎小管損傷要比腎小球損傷出現(xiàn)早[1]。但也有研究認(rèn)為，糖尿病腎病時(shí)腎小管的損傷可能要比腎小球的損傷早[2]，這提示我們可以積極追尋某種能反映腎小管損傷的靈敏指標(biāo)，從而能及時(shí)準(zhǔn)確的發(fā)現(xiàn)腎臟的早期損傷，為患者減少痛苦。

NGAL是具有類(lèi)似于轉(zhuǎn)鐵蛋白的鐵轉(zhuǎn)運(yùn)功能[3，4]。研究發(fā)現(xiàn)，NGAL它不僅是促進(jìn)腎臟祖細(xì)胞轉(zhuǎn)化為腎小管上皮細(xì)胞的重要因素[2]，而且在腎臟受損時(shí)還能誘導(dǎo)腎小管上皮細(xì)胞再生，促進(jìn)腎功能的恢復(fù)[5]。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)檢測(cè)糖尿病患者尿液中NGAL蛋白的活性，從而了解NGAL在糖尿病腎病進(jìn)展中的意義，近期研究認(rèn)為，NGAL主要在近端小管表達(dá)，同事也存在于遠(yuǎn)端腎單位[6]。

作為反映腎小球?yàn)V過(guò)率（GFR）的指標(biāo)，血清Cr易受肌肉量、肉食的攝入量及體內(nèi)代謝水平等許多因素的影響，此外，由于腎臟對(duì)血清Cr的代謝有很大的貯備能力，只有當(dāng)GFR有很大程度的下降時(shí)血清Cr的濃度才出現(xiàn)增高。Cy-sC可作為反映GFR（腎小球?yàn)V過(guò)率）的靈敏標(biāo)志物，當(dāng)腎小球出現(xiàn)輕微損傷時(shí)，血中CysC濃度即可出現(xiàn)升高，腎臟是清除循環(huán)中Cys-C的唯一器官，所以血清Cys-C濃度主要由GFR決定，血清并隨著病情的加重而逐漸增高，因此，目前CysC被公認(rèn)為腎功能早期損傷的標(biāo)志物之一。Cys-C是一種理想的反映GFR變化的內(nèi)源性標(biāo)志物[7]。因此，Cys-C是在特定條件下反映腎臟功能是否正常的有用的篩選工具。Cys-C相對(duì)于肌酐是否具有顯著性的優(yōu)勢(shì)，還需要在其他病組中做更充分的工作。

綜上所述，T2DM并發(fā)腎損傷患者尿NGAL水平明顯升高，且與腎損傷程度相關(guān)，血清Cysta tin C水平明顯升高，因此，尿NGAL和血清Cysta tin C可以做為判定T2DM并發(fā)腎損傷的可靠指標(biāo)，通過(guò)檢測(cè)T2DM患者尿NGAL和血清Cysta tin C的水平可以為T(mén)2DM并發(fā)腎損傷的干預(yù)和治療提供一些參考。

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