LKB1 VEGFR2 ARK5在非小細胞肺癌中的表達及意義

王姝

LKB1 VEGFR2 ARK5在非小細胞肺癌中的表達及意義

王姝

目的探討LKB1、VEGFR2、ARK5在人非小細胞肺癌（NSCLC）發生、發展中的作用。方法應用免疫組化S-P法檢測LKB1、VEGFR2、ARK5在50例非小細胞肺癌標本和10例癌旁正常肺組織標本中的表達。結果LKB1在癌旁正常肺組織中的陽性表達率明顯高于NSCLC組織（P＜0.05）；VEGFR2、ARK5在NSCLC組織中的陽性表達率明顯高于癌旁正常肺組織（P＜0.05）。LKB1、VEGFR2、ARK5在NSCLC組織中的表達與患者的年齡、性別、組織學類型無關（P＞0.05）；與臨床分期存在相關性（P＜0.05），與淋巴結轉移有相關性（P＜0.05）；在組織學分級中，NSCLC高分化組與低分化組比較，三者陽性表達率均有顯著性差異（P＜0.05）。結論LKB1、VEGFR2、ARK5均在NSCLC中表達，與NSCLC臨床病理特征密切相關，共同參與NSCLC的發生發展。

非小細胞肺癌 LKB1 VEGFR2 ARK5

肺癌是呼吸系統最常見的惡性腫瘤，非小細胞肺癌（NSCLC）是肺癌的主要類型，發病率和病死率均較高。目前的研究熱點之一是從蛋白表達層面來判斷腫瘤的進展和預后。LKB1具有促進細胞凋亡作用，其失活可能會導致細胞無節制的生長及促進腫瘤新生血管的形成；VEGF是目前公認的腫瘤血管生成的重要刺激因子，與VEGFR2結合后可促進腫瘤血管生成、浸潤和轉移。另外，當腫瘤細胞處于代謝應激狀態時，ARK5被激活，可以暫緩細胞生長以降低能量消耗、抑制細胞凋亡及炎癥反應。本文探討LKB1、VEGFR2、ARK5在NSCLC發生、發展中的作用。

1 臨床資料

1.1 一般資料 選擇2010年1月至2012年12月本院手術切除非小細胞肺癌標本50例，所有病例術前均未作放療、化療、生物治療等抗腫瘤治療。男33例，女17例；年齡35～74歲，平均年齡（57.2±8.6）歲。其中鱗癌26例、腺癌24例。高分化癌14例、中分化癌23例、低分化癌13例。有淋巴結轉移23例、無淋巴結轉移27例。TNM分期依據2009年國際抗癌聯盟（UICC）TNM分期標準，Ⅰ～Ⅱ期39例、Ⅲ～Ⅳ期11例。另選取癌旁正常肺組織10例為對照組。常規固定石蠟包埋切片。

1.2 方法 采用免疫組織化學技術S-P法。用試劑公司提供的已知LKB1、VEGFR2、ARK5陽性的切片為陽性對照，磷酸鹽緩沖液PBS代替一抗作陰性對照。

1.3 統計學方法 采用SPSS 17.0軟件。數據用陽性率表示（%），采用χ2檢驗及Spearman等級相關方法檢驗顯著性及相關性。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 LKB1、VEGFR2和ARK5蛋白表達染色結果 LKB1在癌組織及癌旁正常肺組織中均有表達，其陽性顆粒主要位于細胞質，細胞核也有少量表達，呈棕黃色顆粒；在癌組織中檢測到VEGFR2的陽性表達，陽性表達呈棕黃色顆粒，定位于細胞膜上和細胞質內；在癌組織中同樣檢測到ARK5的陽性表達，在細胞質內呈現棕黃色顆粒。而在癌旁正常肺組織中均未檢測到VEGFR2、ARK5的陽性表達。

2.2 LKB1、VEGFR2和ARK5蛋白表達與臨床特征的關系 LKB1、VEGFR2、ARK5在癌組織中的表達與患者的年齡、性別、組織學類型無相關性（P＞0.05），與臨床分期、淋巴結有無轉移、不同分化程度差異有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 LKB1、VEGFR2和ARK5陽性表達表達與臨床特征的關系［n（%）］

3 討論

LKB1基因是具有普遍作用的抑癌基因，目前研究認為LKBl 基因在抑制細胞增殖、誘導細胞極性及調控細胞能量代謝等方面發揮重要作用，其功能異常還與肺癌的發生密切相關［1］。本資料結果表明，LKB1在癌組織中低表達，分化程度低、TNM分期晚、淋巴結轉移陽性組中LKB1的表達亦呈降低趨勢，提示LKB1蛋白可能是NSCLC發生的關鍵性屏障，在控制腫瘤的發生、發展及分化過程中起著十分重要的負調控作用，其高表達可以抑制腫瘤的生長、浸潤和轉移。這與文獻報道［2-3］一致。LKB1與患者的年齡、性別無明顯相關性，與組織學類型亦無相關或關聯較少（這與Koivunen等的研究報道不一致，分析原因考慮可能與研究人群的種族差異［4］及本組研究標本量少有關）。目前認為，新生血管的生成有利于腫瘤的生長，且提供腫瘤轉移的通道。故抑制腫瘤血管的生成可被認為是治療腫瘤的有效途徑之一。而VEGFR2的主要功能是在各種生理病理情況下介導新生血管的生成。據本資料結果可以推測 VEGFR2的高表達可能導致腫瘤血管生成增加、腫瘤生長及轉移加速。近年來研究認為惡性腫瘤如肺癌、前列腺癌、肝癌、乳腺癌、子宮內膜癌及卵巢癌等，其發展、轉移、預后與血管內皮細胞生長因子及其受體家族相關［5］。本資料結果與文獻報道一致。但到目前為止，恩度、舒尼替尼等一部分相關藥物已投入臨床使用，但效果欠理想，分析原因可能惡性腫瘤新生血管的形成機制多重復雜，故未來研發多靶點藥物可能會有更廣泛的臨床應用。

腫瘤細胞的過度增殖，必然導致其周圍能量缺乏。此時ARK5被激活，使腫瘤細胞渡過代謝應激狀態、抑制腫瘤細胞的凋亡、促進腫瘤的侵襲與轉移及促進毛細血管的生成。轉移能力強的肺癌組織在腫瘤的發生、浸潤、轉移過程中可能更易處于能量缺乏狀態，從而導致ARK5的高表達。ARK5可作為判斷腫瘤細胞惡性程度及有無發生浸潤轉移的一個參考指標。但同時提示ARK5在肺癌中的表達與組織性類型差異無統計學意義，考慮可能與兩組研究標本量均偏少（50例左右）以及本組研究所選鱗癌標本中低分化者居多而文獻中的相關標本低、中、高分化者平均分布有關。

綜上所述，LKB1、VEGFR2、ARK5可作為反映NSCLC生物學行為的可靠指標，對指導治療有參考價值。

［1］Vaahtomeri K,Makela TP.Molecular mechanisms of tumor suppression by LKB1.FEBS Lett,2011,585(7)：944.

［2］Roy BC,Kohno T,Iwakawa R,et al. Involvement of LKB1 in epithelial-mesenchymal transition(EMT)of human lung cancer cells. Lung Cancer, 2010,7(2)：136-145.

［3］Slack-Davis J, Dasilav J O, Parsons S J. LKB1 and Src：antagonistic regulators of tumor growth and metastasis. Cancer Cell, 2010, 17(6)： 527-529.

［4］Suzuki Y, Oonishi T, Kudo T, et al. Lkb1,TP16,Egfr, and KRAS somatic mutations in lung adenocarcinomas from a Chiba Prefecture Japan cohort. Drug Discoveries ＆ Therapeu- tics, 2012,6(1)：24-30.

［5］Koukourakis MI, Limberis V, Tentes I, et al. Serum VEGF levels and tissue activation of VEGFR2/KDR receptors in patients with breast and gynecologic cancer. Cytokine, 2011, 53(3)：370-375.

ObjectiveTo study the expression of LKB1、VEGFR2、ARK5 on genesis and development of non-small cell lung cancer. Method The expression of LKB1、VEGFR2、ARK5 was detected by the S-P immunohistochemistry method in 50 cases of non-small cell lung cancer and 10 cases of normal lung tissue adjacent to the tumors. Result（1）Expression of LKB1 in normal lung tissue was a signifi cantly higher level than that in NSCLC（P＜0.05）. The expression level of VEGFR2 and ARK5 proteins in NSCLC was signifi cantly higher than that in normal lung tissue（P＜0.05）.（2）In NSCLC，the expression of LKB1、VEGFR2、ARK5 proteins has nothing to do with age，sex and histological type.The positive expression of LKB1 protein was significantly higher in well-differentiated，without lymph node metastasis tissues and StageⅠ-ⅡNSCLC than that in poorly differentiated，with Lymph node metastasis tissues and Stage Ⅲ-Ⅳ（P＜0.05）.ConclusionExpression of LKB1、VEGFR2、ARK5 in NSCLC suggests that they may play an important role in the development of NSCLC.

NSCLC LKB1 VEGFR2 ARK5

215600 江蘇省張家港市第一人民醫院呼吸內科