氣相色譜法測(cè)定臨安市售鮮筍中12種有機(jī)磷類(lèi)農(nóng)藥殘留

胡玉霞，李 倩，王朝杰，董亞萍

（臨安市產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)測(cè)中心，浙江臨安 311300）

氣相色譜法測(cè)定臨安市售鮮筍中12種有機(jī)磷類(lèi)農(nóng)藥殘留

胡玉霞，李 倩*，王朝杰，董亞萍

（臨安市產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)測(cè)中心，浙江臨安 311300）

用乙腈提取、濃縮，丙酮定容，采用毛細(xì)管氣相色譜-FPD檢測(cè)器對(duì)臨安市售鮮筍中敵敵畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷、二嗪磷、樂(lè)果、毒死蜱、馬拉硫磷、殺螟硫磷、對(duì)硫磷、甲基異硫磷、殺撲磷、丙溴磷等12種有機(jī)磷農(nóng)藥的殘留量進(jìn)行了測(cè)定。結(jié)果表明，本研究建立的檢測(cè)方法能夠在20 min內(nèi)較好地分離12種有機(jī)磷農(nóng)藥，峰面積與其質(zhì)量濃度有良好的線性關(guān)系，檢出限為0.005～1.000 mg·kg-1，加標(biāo)回收率為78.3%～88.7%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.6%～2.2%。該方法高效、簡(jiǎn)便，溶劑使用量更少，更符合現(xiàn)代檢測(cè)環(huán)保無(wú)害的要求，可用于日常蔬菜中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的測(cè)定。

氣相色譜；有機(jī)磷農(nóng)藥；鮮筍

有機(jī)磷農(nóng)藥是一類(lèi)廣譜、高效殺蟲(chóng)劑，品種繁多、價(jià)格低廉、殺蟲(chóng)效果好，在蔬菜種植養(yǎng)護(hù)中廣泛使用，但在環(huán)境中容易造成殘留，進(jìn)入食物鏈而影響人體健康［1-2］。蔬菜中農(nóng)藥殘留情況一直是當(dāng)前各級(jí)農(nóng)業(yè)主管部門(mén)農(nóng)產(chǎn)品監(jiān)測(cè)的重點(diǎn)和城鄉(xiāng)居民關(guān)注的熱點(diǎn)，并成為制約我國(guó)蔬菜及其制品出口的主要問(wèn)題。隨著國(guó)家對(duì)食品安全重視程度的日益提高，對(duì)相關(guān)檢測(cè)機(jī)構(gòu)的要求也越來(lái)越高，檢測(cè)任務(wù)也越來(lái)越重。這就要求農(nóng)藥殘留檢測(cè)不但要準(zhǔn)確精密，同時(shí)也要兼顧檢測(cè)速度和效率［3］。因此，準(zhǔn)確、快速測(cè)定此類(lèi)食品中的有機(jī)磷農(nóng)藥殘留具有重要意義。

目前，檢測(cè)有機(jī)磷農(nóng)藥的方法主要有分光光度法、熒光法、電化學(xué)法、膠束電動(dòng)色譜、電流動(dòng)分析法、傳感器法、氣相色譜法、液相色譜法、氣質(zhì)聯(lián)用法和液質(zhì)聯(lián)用法［4-11］。本文以我國(guó)農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)NY/T 761—2008《蔬菜和水果中有機(jī)磷、有機(jī)氯、擬除蟲(chóng)菊酯和氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥多殘留的測(cè)定》方法為基礎(chǔ)，采用毛細(xì)管氣相色譜外標(biāo)法，對(duì)敵敵畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷、二嗪磷、樂(lè)果、毒死蜱、馬拉硫磷、殺螟硫磷、對(duì)硫磷、甲基異硫磷、殺撲磷、丙溴磷等12種有機(jī)磷農(nóng)藥在臨安特產(chǎn)鮮筍中的殘留量進(jìn)行了分析研究。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

Agilent Technologies 7890A氣相色譜儀；FPD檢測(cè)器；5200H型超聲波清洗器（上海科導(dǎo)超聲儀器有限公司）；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（天津玻璃儀器廠）；Agilent DB-1701（30 m×0.32 mm×0.25μm）氣相色譜柱。乙腈、甲醇、丙酮均為色譜純，氯化鈉為分析純。

有機(jī)磷農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品：敵敵畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷、二嗪磷、樂(lè)果、毒死蜱、馬拉硫磷、殺螟硫磷、對(duì)硫磷、甲基異硫磷、殺撲磷、丙溴磷均為100μg·m L-1，由農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研檢測(cè)所提供。

鮮筍樣品按照隨機(jī)抽樣原則取自臨安市部分地區(qū)農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)，共100份，每份1.0～1.5 kg。

1.2 樣品前處理方法

參考MA?TOVSKá等［11］的方法，取1.0 kg新鮮樣品，取可食用部分切碎，用四分法取適量樣品放入組織搗碎機(jī)中充分搗碎，制備成分析樣品備用。準(zhǔn)確稱(chēng)取25.0 g樣品（精確到0.01 g），加入50.0 mL乙腈，超聲30 min后用濾紙過(guò)濾，收集40～50 m L濾液至裝有5 g氯化鈉和適量無(wú)水硫酸鎂的100 m L具塞量筒中，蓋上塞子，劇烈振蕩1 m in，室溫靜置30 m in，分層。吸取上層乙腈溶液10.00 mL放入150 mL的燒杯中，并置于60℃水浴，氮?dú)獯祾哒舭l(fā)近干后加入丙酮并定容至2.0 m L，混勻，待凈化。

將上述備用液全部轉(zhuǎn)移至5 m L容量瓶，再用約3 mL丙酮分次沖洗燒杯并定容，混勻后用0.2μm濾膜過(guò)濾后移入進(jìn)樣瓶中，待測(cè)。

1.3 色譜條件

色譜柱：Agilent Technologies DB-1701（30 m× 0.32 mm×0.25μm）；氣體：高純H2（≥99.999%）流速為75 m L·min-1；空氣流速為100 mL·min-1；尾吹氣：高純N2流速為60 m L·m in-1；進(jìn)樣量1μL，不分流；進(jìn)樣口溫度230℃；FPD檢測(cè)器溫度220℃；色譜柱升溫程序：初始溫度100℃恒溫1 m in，以15℃·m in-1的速率升溫至210℃，保持5 m in，以20℃·m in-1的速率升溫至250℃保持5 min；以外標(biāo)法定量。

1.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

分別精密量取各標(biāo)準(zhǔn)品溶液適量，用丙酮分別稀釋制成含上述各農(nóng)藥的混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液0.5 mg· L-1并于4℃冷藏保存?zhèn)溆谩?.5 mg·L-1的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液用正己烷稀釋成濃度分別為0.005 0、0.012 5、0.025 0、0.062 5、0.125 0、0.250 0 mg· L-1的標(biāo)準(zhǔn)溶液，按1.3節(jié)的色譜條件進(jìn)樣。

1.5 樣品測(cè)定

準(zhǔn)確稱(chēng)取各樣品，按1.2節(jié)的方法處理后，采用1.3節(jié)的條件進(jìn)行測(cè)定。

2 結(jié)果與分析

2.1 提取方法的優(yōu)化

2.1.1 提取溶劑的選擇

提取農(nóng)藥殘留物，溶劑的選擇非常重要。李艷芳等［12］研究表明，乙腈比較適合萃取各種極性農(nóng)藥。本研究也采用乙腈作為提取劑，乙腈對(duì)不同劑型的農(nóng)藥均有一定程度的溶解能力，適合于絕大多數(shù)農(nóng)藥殘留的提取。新鮮蔬菜中含有大量的水分，乙腈提取后不容易分層，因此，用無(wú)水硫酸鎂吸水的同時(shí)，加入大量的氯化鈉，使提取液鹽析分層。2.1.2 柱溫和載氣流速的選擇

色譜分析的原則是在盡可能短的時(shí)間將混合物完全分離，柱溫和載氣流速的選擇對(duì)氣譜法檢測(cè)十分重要。柱溫低，載氣流速小，分析時(shí)間過(guò)長(zhǎng)；柱溫高，載氣流速高，分離效果差。多次試驗(yàn)比較后發(fā)現(xiàn)，初始溫度100℃，以l5℃·m in-1的速率升至210℃，載氣流速100 m L·m in-1，色譜分析效果最好。

2.1.3 色譜參數(shù)的選取

色譜柱、程序升溫、載氣流量、進(jìn)樣口及檢測(cè)器溫度等是影響氣相色譜分離效果、分析時(shí)間及靈敏度的主要因素。經(jīng)比較HP-5與DB-1701 2款毛細(xì)管色譜柱發(fā)現(xiàn)，DB-1701能更有效地實(shí)現(xiàn)完全分離，所需要的分析時(shí)間也更短；在程序升溫、載氣、進(jìn)樣及檢測(cè)器溫度等部分采用1.3節(jié)所述的色譜參數(shù)，能在20 min內(nèi)實(shí)現(xiàn)各待測(cè)組分的完全分離，出峰峰形也比較理想，其他各項(xiàng)指標(biāo)也能滿足實(shí)際測(cè)試需要。

2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線、線性范圍與最小檢測(cè)限

用丙酮將農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品配制成不同質(zhì)量濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，在所確定的色譜條件下進(jìn)行測(cè)定。以各組分的峰面積（Y）對(duì)其質(zhì)量濃度（C）繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，線性范圍及最小檢測(cè)限見(jiàn)表1。各組分在線性范圍0.005～1.000 mg·L-1時(shí)的相關(guān)系數(shù)為0.997 2～0.999 9，表明本方法具有良好的線性關(guān)系，檢出限能滿足國(guó)標(biāo)規(guī)定的有機(jī)磷農(nóng)藥殘留限量分析。有機(jī)磷農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)品和空白鮮筍樣品的色譜圖見(jiàn)圖1和圖2，12種有機(jī)磷農(nóng)藥分離度良好，空白鮮筍樣品中沒(méi)有雜質(zhì)干擾峰。

圖1 有機(jī)磷農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)品的氣相色譜圖

圖2 空白鮮筍樣品的氣相色譜圖

2.3 精密度

取混合標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液連續(xù)進(jìn)樣5次，敵敵畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷、二嗪磷、樂(lè)果、毒死蜱、馬拉硫磷、殺螟硫磷、對(duì)硫磷、甲基異硫磷、殺撲磷、丙溴磷的峰面積積分值的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（relative standard deviation，RSD）分別為1.2%、1.1%、1.6%、1.5%、1.3%、1.6%、1.2%、1.2%、1.7%、1.8%、1.8%、1.9%、1.6%和1.8%，表明本研究建立的方法準(zhǔn)確、可靠。

表1 12種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品的標(biāo)準(zhǔn)曲線、相關(guān)系數(shù)、最小檢測(cè)限和定量限

2.4 加標(biāo)回收率

選擇無(wú)待測(cè)農(nóng)藥且雜質(zhì)盡量少的鮮筍作為空白，準(zhǔn)確稱(chēng)取并按高、中、低3個(gè)水平分別加入0.50、1.00、1.25 mg·kg-1的混標(biāo)溶液，同時(shí)做樣品空白對(duì)照。計(jì)算平均回收率及相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，結(jié)果表明，加標(biāo)回收率為78.3%～88.7%，RSD為0.6%～2.2%，均能滿足方法學(xué)要求（表2）。

表2 有機(jī)磷農(nóng)藥加標(biāo)回收率的測(cè)定（n=3）

2.5 樣品測(cè)定結(jié)果

本實(shí)驗(yàn)所抽取的100個(gè)鮮筍樣品中，12種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的測(cè)定結(jié)果均未檢出，表明臨安地區(qū)對(duì)鮮筍中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留控制效果較好。

3 討論

環(huán)境中影響農(nóng)藥殘留的原因很多，農(nóng)藥本身的性質(zhì)、環(huán)境因素以及農(nóng)藥的使用方法和使用劑量都將影響農(nóng)藥的殘留量。農(nóng)藥施用劑量超標(biāo)與農(nóng)作物農(nóng)藥殘留有著直接的關(guān)系［13］。本研究建立了毛細(xì)管氣相色譜-FPD檢測(cè)器檢測(cè)鮮筍中12種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的方法，在擬定的試驗(yàn)條件下，12種有機(jī)磷農(nóng)藥得到了很好的分離。在本文所摸索的色譜條件下檢測(cè)，樣品出峰時(shí)間縮短至20 min，整個(gè)分析從前處理到檢測(cè)僅需1.0 h，所需有機(jī)溶劑僅為幾十毫升，且一次可檢測(cè)全部有機(jī)磷農(nóng)藥殘留物，峰形尖銳、分離度好，自動(dòng)化程度高，便于處理大宗試樣，節(jié)約了人力物力。綜上所述，該檢測(cè)方法具有以下優(yōu)點(diǎn)：分析時(shí)間短；溶劑使用量少，對(duì)環(huán)境污染小；操作簡(jiǎn)便，整個(gè)過(guò)程比原方法更加高效、簡(jiǎn)便，溶劑使用量更少，更符合現(xiàn)代檢測(cè)環(huán)保無(wú)害的要求，適用于絕大部分蔬菜中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的測(cè)定。

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（責(zé)任編輯：侯春曉）

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：0528-9017（2016）12-2103-03

文獻(xiàn)著錄格式：胡玉霞，李倩，王朝杰，等.氣相色譜法測(cè)定臨安市售鮮筍中12種有機(jī)磷類(lèi)農(nóng)藥殘留［J］.浙江農(nóng)業(yè)科學(xué)，2016，57（12）：2103-2106.

10.16178/j.issn.0528-9017.20161258

2016-06-11

胡玉霞（1983—），女，山西陽(yáng)泉人，助理工程師，碩士，從事食品、藥品分析研究工作，E-mail：liqian34ban@163.com。