油菜花粉中揮發性成分的GC-MS分析

王 麗， 賈 安， 黃 濤，常麗萍

(黃河科技學院，河南鄭州 450006)

油菜花粉中揮發性成分的GC-MS分析

王 麗， 賈 安， 黃 濤，常麗萍

(黃河科技學院，河南鄭州 450006)

[目的]建立提取、分析油菜花粉中所含揮發油成分的方法。[方法]通過4種方法提取油菜花粉揮發性成分，分別為用蒸餾水作溶劑采用甲法(適合密度<1的揮發油)、乙法(適合密度>1的揮發油)對油菜花粉揮發油進行提取，提取后的殘渣再用無水乙醚進行二次提取并濃縮，最后一種方法則用環已烷直接對油菜花粉揮發油進行提取并濃縮，最后得到4個樣品，通過氣質聯用方法對以上樣品進行分析測定。[結果]甲法、無水乙醚及環已烷所提成分相對較多，且均為直鏈烷烴，如C27H56、C28H58。其中無水乙醚與環已烷所提取的浸膏得率相對較高，分別為8.55%、8.63%。[結論]環已烷提取揮發油的效果最好。油菜花粉中所含揮發油均為直鏈烷烴。

油菜花粉；揮發油；成分；GC-MS

花粉含有豐富的功能性物質，如蛋白質、維生素、微量元素、黃酮類化合物[1]，這些物質協同作用于機體，調節機體的多種功能，平衡體內營養，增強新陳代謝，防止毛細血管通透性的障礙。花粉還能促進內分泌腺的發育，提高和調節內分泌腺分泌，因此對由內分泌功能紊亂引起的疾病有治療作用。油菜花粉中所含谷氨酸、脯氨酸等20多種氨基酸[2]，可以改善前列腺組織的血液循環，減輕水腫，緩解前列腺肥大引起的尿道梗阻[3]。油菜花粉能增強毛細血管強度、低血脂[4-5]，對治療糖尿病、貧血、便秘、防癌抗癌等均有療效[6]。為了更好地了解油菜花粉的藥效物質，筆者對其揮發性成分進行GC-MS分析、鑒定，以期為開發利用花粉資源提供依據。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 儀器。WB-2002型水浴鍋(鄭州長城科工貿有限公司)；R-1002N型旋轉蒸發儀(鄭州長城科工貿有限公司)；SHB-ⅢA型循環水式多用真空泵(鄭州長城科工貿有限公司)；KQ2200E型超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)；DHG9076A型電熱恒溫鼓風干燥箱(上海精宏實驗設備有限公司)；1810-C型石英自動雙重純水蒸餾器(金壇市晶玻實驗儀器廠)；AL204型電子天平[梅特勒—托利多儀器(上海)有限公司]；XFB-500型高效中藥粉碎機(吉首市中誠制藥機械廠)；Theremo DSQⅠⅠ 型氣質聯用儀，賽默飛世爾科技中國有限公司)。

1.1.2 試材。油菜花粉，采自于新疆昭蘇縣。無水乙醚，天津市風船化學試劑科技有限公司；石油醚，天津市風船化學試劑科技有限公司；環己烷，天津市德恩化學試劑有限公司；試驗所用水均為蒸餾水，所用試劑均為分析純。

1.2 方法

1.2.1 提取分離。該試驗采用4種提取方法得到4個樣品。將采集的油菜花粉用XTB-500型高速中藥粉碎機打成粉末，過40目篩，精密稱定2份粉末分別為50.003 2、50.005 1 g，分別移入容量為500 mL的圓底瓶里，用4倍量的蒸餾水，分別用甲法、乙法揮發油提取器進行提取，提取時間為1 h，過濾，再用4倍量蒸餾水進行二次提取，時間為1 h。將提取器內上下層分離，從而得到揮發油，在揮發油中加入少量無水硫酸鈉以去除夾雜的極少水分，再用無水乙醚進行萃取，使其自然揮干、無乙醚味為止，甲法、乙法分別得到樣品1、樣品2。

上述2種方法提取后合并濾渣(110.003 2 g)，先用1.8倍量的無水乙醚回流提取，提取1 h，然后將剩余殘渣再加1.5倍無水乙醚回流提取，時間為1 h，最后將剩余殘渣再用1.5倍量無水乙醇回流提取30 min，過濾，將3次提取液合并，通過減壓濃縮成浸膏，即為樣品3。

精密稱定油菜花粉5.002 4 g，用100 mL環已烷回流提取，連續提取2次，每次提取時間為30 min，合并2次濾液，減壓濃縮得浸膏為0.431 7 g，浸膏用50 mL環已烷溶解，放兩小勺無水硫酸鈉，揮干后再用環已烷萃取，將萃取液移至小瓶中，自然揮干待測，即為樣品4。

1.2.2 樣品氣質聯用的測定條件。Rts-Ms(30 mm×0.25 mm 0.25涂層)，高純He氣為載氣，進樣溫度280 ℃，分流進樣(10∶1)，進樣量1.5 μL，載氣流速1.5 μL/min，程序升溫起始溫度40 ℃，保持1 min后以10 ℃/min升至250 ℃，保持20 min，質譜接口250 ℃，E2源溫度250 ℃，電子轟擊能量60 ev，掃描范圍50～650 amu，全離子掃描，采集延遲3 min，歸一化法計算相對含量。

2 結果與分析

2.1 各樣品浸膏率 樣品1、樣品2的浸膏得率分別為1.15%、0.08%。樣品2因為得率太低，放棄該樣品。樣品3的浸膏量為9.406 7 g，所得浸膏率為8.55%，樣品4的浸膏得率為8.63%。可見，水蒸氣蒸餾法提取效果不好，回流提取法效果更加明顯，且用環已烷試劑所提取的浸膏得率最多，因此環已烷的提取效果最好。

2.2 氣質聯用分析 經測定，用蒸餾水作溶劑的甲法所提浸膏樣品1、無水乙醚所提浸膏的樣品3、環已烷所提浸膏的樣品4的GC-MS分離總流程圖如圖1所示。由表1～3可見，從樣品1中分析鑒定出10個化學成分，其中相對含量最高的是9號所對應的分子式為C28H58的化合物，其含量為31.57%；樣品3分析鑒定出6個化學成分，其中相對含量較高的是3號與5號，分別所對應的分子式為C28H58、C29H60的化合物，含量分別為41.71%、46.00%；樣品4中分析鑒定出9個化學成分，其相對含量較高的分別是分子式為C28H58、C27H56的化合物，含量分別為38.36%、44.78%。由此可見，用蒸餾水作溶劑的甲法、無水乙醚及環已烷所提成分種類均較多，且均為直鏈烷烴。

表1 樣品1中各成分的GC-MS所得的相對含量

表2 樣品3中各成分的GC-MS所得的相對含量

圖1 樣品1(a)、樣品3(b)和樣品4(c)的GC-MS總離子流程圖Fig. 1 Total ion flow chart of sample 1 (a), sample 3 (b) and sample 4 (c) by GC-MS

3 小結

(1)從樣品浸膏率來看，水蒸氣蒸餾法提取效果不好，回流提取法效果更加明顯，且用環已烷試劑所提取的浸膏得率最多，為8.63%，因此環已烷的提取效果最好。

(2)用蒸餾水作溶劑的甲法、無水乙醚及環已烷所提成分種類均較多，且均為直鏈烷烴，如C27H56、C28H58。

表3 樣品4中各成分的GC-MS所得的相對含量

[1] 謝姣,王華,任延遠,等.松花粉的功效及應用展望[J].食品與藥品,2011,13(3):139-141.

[2] 鄧倩,童珊珊,丁麗霞,等.松花粉活性成分分析方法及藥理作用的研究進展[J].藥物分析雜志,2012,32(1):171-178.

[3] 魏淑蓮,王佳旭,李文婕,等.前列腺康在女性前列腺病中的作用[J].臨床合理用藥雜志,2015,8(1):176-178.

[4] 程道梅.蜂花粉營養成分及其在老年營養保健中的作用[J].中國食物與營養，2011,17(3):85-88.

[5] 郭雪微,盧梃,鮑艷江,等.油菜蜂花粉黃酮類化合物抗氧化等作用的臨床觀察[J].北京中醫藥,2011,30(7):488-491.

[6] 孫毅,楊義芳,楊必成,等.油菜蜂花粉生理活性及作用機制研究進展[J].中國蜂業,2010,61(9):5-9.

GC-MS Analysis of Volatile Composition of Rape Pollen

WANG Li,JIA An，HUANG Tao et al

(College of Huanghe Science and Technology,Zhengzhou,Henan 450006)

[Objective] The research aimed to establish extraction and analysis method of volatile oil contained in rape pollen.[Method]By four different extraction methods of volatile components of rape pollen, using distilled water as solvent,respectively by A method (for volatile oil density less than 1), B method (for volatile oil density greater than 1) to extract the volatile oil of rape pollen,extraction residue was extracted with anhydrous ether for two times and concentrated,and finally a method was to directly with cyclohexane on the volatile oil of rape pollen extracted and concentrated, got 4 samples at last, through the GC-MS analysis method to determine the above samples.[Result]A method, anhydrous ether and cyclohexane by composition was relatively more, and for the straight-chain alkanes, such as C27H56, C28H58. The anhydrous ether and cyclohexane extract extraction rate of extractum was relatively high, respectively 8.55%, 8.63%.[Conclusion] Cyclohexane extraction of volatile oil have the best effect. Rape pollen contained in the volatile oil are alkanes.

Rape pollen;Volatile oil;Component;GC-MS

鄭州市國際合作項目(141PGJHZ541)。

王麗(1979- )，女，河南鄧州人，副教授，碩士，從事中藥質量標準研究。

2016-11-09

S 634.3

A

0517-6611(2016)34-0119-02