細胞粘附分子CD44在腎病綜合征、慢性腎小球腎炎患者外周血表達水平

楊惠忠

[摘 要] 目的：檢測細胞粘附分子CD44在腎病綜合征（Nephrotic syndrome，NS）、慢性腎小球腎炎（Chronic glomerulonephritis，CGN）患者外周血表達水平，探討其臨床意義。方法：選取我院2013年7月～2016年7月收治的57例NS患者、69例GGN患者及同期60名健康體檢者，分別納入NS組、GGN組及對照組，采用流式細胞儀檢測3組受試者外周血單個核細胞CD44表達水平，并分析CD44表達水平與NS患者、GGN患者血漿白蛋白（ALB）、膽固醇（CE）、肌酐（Cr）、尿素氮（BUN）的相關性。結果：CGN組患者外周血CD44表達水平高于NS組，NS組患者外周血CD44表達水平高于對照組，差異有統計學意義（P<0.05）。Pearson相關分析示，外周血CD44表達水平與NS患者ALB呈負相關，與CE呈正相關，與CGN患者Cr、BUN呈正相關（P<0.05）。結論：NS、CGN患者外周血CD44表達水平超出正常范圍，可能通過免疫機制參與NS、CGN的發生發展，同時，外周血CD44表達水平與患者腎功能存在一定相關性，對于輔助病情判斷亦具有一定價值。

[關鍵詞] 細胞粘附分子；CD44；腎病綜合征；慢性腎小球腎炎

中圖分類號：R692 文獻標識碼：A 文章編號：2095-5200（2016）06-094-03

DOI：10.11876/mimt201606035

腎病綜合征（Nephrotic syndrome，NS）、慢性腎小球腎炎（Chronic glomerulonephritis，CGN）發病有多種因素參與，其中免疫損傷是二者發生過程中的共同環節 [1]。細胞免疫、體液免疫平衡失調是導致腎臟疾病發病并進展至終末期腎衰竭、影響患者生存質量的主要原因[2]。作為細胞粘附分子家族重要成員，CD44主要參與細胞與細胞、細胞與基質間特異性粘連過程，在腫瘤、器官移植排斥反應、自身免疫性疾病的發生發展中扮演著重要角色[3]。本研究就NS、CGN患者外周血CD44表達水平進行了檢測與分析，探討CD44在腎小球病變中作用機制。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院2013年7月—2016年7月收治的57例NS患者、69例GGN患者及同期60名健康體檢者，分別納入NS組、GGN組及對照組。NS患者、GGN患者均經病史、體格檢查、實驗室檢查或腎臟病理組織學檢查，并參照改善全球腎臟病預后組織（KDIGO）慢性腎臟疾病診療指南（2012年版）確診[4]，且入組前未接受相關治療，排除合并感染、肝功能異常、其他免疫性疾病者，健康體檢者血壓、蛋白尿均處于正常范圍內，既往無腎病史、嚴重感染史及免疫性疾病。各組受試者年齡、體質量指數（BMI）、性別等一般臨床資料比較，差異無統計學意義（P>0.05）。本研究經我院醫學倫理委員會批準，受試者均知情同意并簽署書面協議。

1.2 研究方法

1.2.1 外周血CD44表達水平檢測 于入組次日清晨抽取受試者空腹肘靜脈抗凝血2 mL，使用淋巴分離液分離，以1×106/mL提取單個核細胞懸液，取細胞懸液100 μL，依次加入20 μL CD44-FITC（法國Immunotech公司）及陰性對照羊抗鼠IgG1-FITC（法國Immunotech公司），避光處理30 min后，使用Epics Altra 型流式細胞儀（美國Beckman Coulter公司）上機檢測[5]。CD44表達水平計算方法[6]：CD44陽性細胞百分比=（待測標本內標記陽性細胞數/受檢細胞總數）×100%-非特異結合細胞百分比。比較各組受試者外周血CD44表達水平的差異。

1.2.2 腎功能相關指標檢測及相關性分析 于入組次日清晨抽取NS組、CGN組患者空腹肘靜脈抗凝血2 mL，使用AU5800全自動生化分析儀（美國Beckman Coulter公司）對其血漿白蛋白（ALB）、膽固醇（CE）、肌酐（Cr）、尿素氮（BUN）進行檢測，運用Pearson法計算CD44表達水平與ALB、CE、Cr、BUN的相關性。

1.3 統計學分析

數據采用SPSS19.0進行分析，性別以（n/%）表示，并采用χ2檢驗，年齡、BMI、CD44表達水平等計量資料以（x±s）表示，相關性分析采用Pearson法，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 外周血CD44表達水平

CGN組患者外周血CD44表達水平高于NS組，NS組患者外周血CD44表達水平高于對照組，差異有統計學意義（P<0.05）。見表1。

2.2 外周血CD44表達水平與腎功能相關指標相關性

Pearson相關分析顯示，外周血CD44表達水平與NS患者ALB呈負相關，與CE呈正相關，與CGN患者Cr、BUN呈正相關（P<0.05）。見表2。

3 討論

細胞粘附分子是一類來自不同基因的配體/受體分子，具有介導細胞信號轉導、調節細胞增殖分化等作用，在近年來腎臟疾病的機制研究中得到了廣泛關注[7-8]。

研究發現，CD44在人類和大鼠正常腎臟組織中幾乎無表達，腎小囊上皮細胞、亨氏拌升支粗段小管上皮細胞以及遠端小管上皮細胞可見少量表達，但在腎臟疾病中，CD44蛋白表達往往處于異常增高狀態[9]。Fogo等[10]

發現，系膜增生性腎炎患者外周血CD44表達水平明顯升高，且與系膜細胞活化增殖、腎小球內炎癥細胞浸潤具有密切關聯；鄒麗萍等[11]指出，CD44可促進機體炎癥因子分泌，參與炎癥反應。本研究就CD44在NS、CGN患者外周血內表達水平進行了檢測，結果表明，NS、CGN患者外周血CD44表達水平均處于異常升高狀態，考慮與CD44誘導淋巴細胞在腎組織內廣泛浸潤、活化炎癥和產生炎性因子等作用有關[12]，說明CD44在NS、CGN發生發展過程中扮演了重要角色。

本研究相關性分析結果可見，CD44表達水平與NS患者ALB呈負相關，與CE呈正相關，其機制可能為：CD44具有調節細胞游走功能作用，可通過促進淋巴細胞在腎間質內廣泛浸潤，造成外周血淋巴細胞數量或功能異常、淋巴細胞亞群間比例失衡，而T淋巴細胞功能失調被認為是NS發病的重要機理之一[13-14]，而NS患者以高脂血癥、低白蛋白血癥為主要表現[15]，故隨著NS患者外周血CD44表達水平的升高，其CE逐漸升高，ALB逐漸下降。

通過對CD44與CGN患者腎功能相關指標的分析，可以發現，CD44表達水平與患者Cr、BUN呈正相關，與ALB、CE無明顯相關性，與CGN患者腎臟病理生理改變具有一致性：CGN患者腎小球濾過率的下降可導致肌酐清除率降低，繼而導致體內Cr、BUN水平大幅上升，且其上升程度與患者病情具有密切關聯[16]，而CD44可與透明質酸配體結合，上調細胞活素類物質、化學活素類物質表達，參與CGN細胞免疫病理過程，促進巨噬細胞向腎小球、腎小管間質浸潤，導致病情進展[17]。此外，Maruyama等[18]發現，腎臟疾病患者尿液內CD44細胞密度亦呈現明顯增高狀態，說明CD44對系膜細胞及系膜基質的影響在NS、CGN發生發展過程中可能發揮了一定作用。

因此，可以認為，細胞粘附分子CD44在NS、CGN患者外周血表達水平均呈現異常增高狀態，說明CD44在NS、CGN發病過程中扮演了重要角色，與此同時，CD44與患者腎功能相關指標具有顯著相關性，亦可為患者病情判斷提供一定參考。本研究為NS、CGN發病機制的深入了解及臨床防治策略的制定提供了思路，但需要注意的是，由于目前臨床對于腎臟疾病的確切發病機制尚無明確闡釋，關于CD44對NS、CGN發生發展的具體機理仍有待更深層次的研究加以了解。

參 考 文 獻

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