丙型肝炎病毒抗原、抗體及核酸標志物檢測結果的關聯性研究

梁曉燕

丙型肝炎病毒抗原、抗體及核酸標志物檢測結果的關聯性研究

梁曉燕

目的 探討丙型肝炎病毒抗原、抗體和核酸標志物檢測結果的相關性。方法 對302份血漿樣本的HCV RNA載量、HCV Ag和抗-HCV指標分別使用HCV RNA定量試劑、HCV核心抗原試劑盒、HCV抗體試劑進行檢測。結果 HCV RNA載量上升，HCV Ag和抗-HCV陽性符合率上升，各血清指標在不同HCV RNA載量的陽性率對比，差異具有統計學意義（P＜0.05）。HCV RNA陽性樣本中，基因分型檢測率為46.51%。結論 HCV RNA基因分型試劑的檢測能力不高，效果差，需進一步篩查，應聯合早期確診進行HCV感染診斷。

丙型肝炎病毒抗原；抗體；核酸標志物；檢測

丙型肝炎是常見傳染性疾病，其主要通過丙型肝炎病毒（HCV）感染致病，目前我國感染丙型肝炎發病率為3.2%，而實驗室檢查是診斷丙型肝炎重要手段[1-2]。在本次研究中對HCV RNA載量、HCV Ag和抗-HCV指標采用相應檢測方法。現將結果表示如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇我院2010年11月—2015年11月收集的302份人血漿樣本，對所有樣本的HCV不同標志物采用相應方法檢查。

1.2 方法

（1）HCV Ag檢測：使用兩步法免疫檢測原理檢測，將HCV單克隆抗體包被微粒子與HCV抗原結合，進行沖洗，加入吖啶酯標記HCV抗體結合物沖洗，添加激發液與預激發液，采用相對發光單位（RLUs）表示。樣本濃度≥3.00 fmol/L，HCV抗原呈陽性。（2）HCV Ab檢測：采用化學發光微粒子免疫技術檢測，對人血清、血漿內HCV抗體行定性檢測。方法同HCV Ag檢測，吖啶酯標記物為鼠抗人抗體結合物。比較反應中化學發光信號與HCV Ag檢測的HCV抗體，確定cut-off信號，若樣本內化學發光信號＞cut-off值，HCV抗體呈陽性。（3）HCV RNA檢測：采用樣本核酸提純系統、實時熒光定量PCR儀以及體外反轉錄聚合酶鏈式反應檢測技術，選擇HCV基因組的5’端高度保守區作為目標序列，確保完全檢測到相對應的1、2、3、4、5、6基因型。

1.3 統計學方法

采用SPSS 18.0軟件對數據進行分析處理，計數資料以率表示，采用χ2檢驗，以P＜0.05表示差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 HCV RNA載量與HCV Ag和HCV Ab含量的相關性分析

HCV RNA陽性86份，檢出率為28.48%；HCV Ag陽性45份，檢出率為14.90%；抗-HCV陽性142份，檢出率為47.02%。HCV RNA載量≥500 IU/ml 24份，HCV Ag濃度≥3.00 fmol/L陽性22份，陽性率為91.67%；抗-HCV信號值/判斷值≥1有23份，陽性率為95.83%。HCV RNA載量在30～500 IU/ml 18份，HCV Ag濃度≥3.00 fmol/L 9份，陽性率為50.00%；抗-HCV信號值/判斷值≥115份，陽性率為83.33%。其中HCV RNA載量＜30 IU/ml 44份，HCV Ag濃度≥3.00 fmol/L陽性5份，陽性率為11.36%；抗-HCV信號值/判斷值≥1的陽性33份，陽性率為75.00%。HCV RNA載量上升，HCV Ag和抗-HCV陽性符合率也上升，各血清指標在不同HCV RNA載量的陽性率對比，差異有統計學意義（P＜0.05）。

2.2 HCV RNA載量與基因分型的相關性分析

86份HCV RNA陽性樣本中，有四個基因型（1、2、3、6），總檢出40份，檢測率為46.51%（40/86），其中基因1型32份，2型4份，3型1份，6型3份。HCV RNA載量≥500 IU/ml 24份，基因分型檢查率100.00%；HCV RNA載量在30～500 IU/ml份，其中1型血漿樣本12份，6型血漿樣本1份，基因分型檢測率為72.22%；HCV RNA載量＜30 IU/ml 44份，其中1型血漿樣本1份，2型血漿樣本1份，基因分型檢測率為4.55%。另外有46份樣本不能夠檢測出基因型別。

3 討論

丙型肝炎主要是通過HCV感染所致，主要傳染途徑為輸血、吸毒以及針刺等方式[3]。患者在早期癥狀不明顯，因此需要采用血清學和分子生物學進行檢查。前者主要是運用已知抗原或抗體進行病原學檢測，該檢測方法操作簡單、敏感性較高，但是此方法存在抗體生成的窗口期[4]。后者主要是經已知HCV序列設計特異性引物，具有高敏感性及特異性，并且還能夠縮短檢測窗口期，對于早期丙型肝炎病毒感染患者具有顯著診斷意義[5-6]。

在本次研究中，在所有血漿樣本中，HCV RNA陽性檢出率為28.48%；HCV Ag陽性檢出率為14.90%；抗-HCV陽性檢出率為47.02%。在HCV RNA載量不斷上升的同時，HCV Ag和抗-HCV陽性符合率也顯著上升，各血清指標在不同HCV RNA載量的陽性率對比，差異有統計學意義（P＜0.05）。其與侯健、谷金蓮[7-8]等研究結果相類似。說明在HCV RNA陽性和抗-HCV陰性時提示患者為急性丙型肝炎，并且患者大部分為免疫力較低者；而當HCV RNA和抗-HCV均為陽性時，即確診為急性丙型感染；若抗-HCV陽性，HCV RNA陰性時，提示患者為慢性丙型肝炎或其處于恢復期。所有86份HCV RNA陽性樣本中，總共檢測出基因分型40份，基因分型檢測率為46.51%（40/86）。說明HCV RNA基因分型試劑的檢測有待提高。

綜上所述，HCV RNA基因分型試劑的檢測能力并不高，無法達到滿意效果，需要進一步篩查，應與早期確診進行聯合診斷HCV感染情況。

[1] 章武戰，陳俊華，劉生華，等. 抗HCV篩查血液透析患者丙型肝炎病毒感染的風險[J].中國現代醫生，2015，53（9）：100-103.

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[6] 李靜芳，齊紅圓，王云龍，等. 抗丙型肝炎病毒抗體膠體金免疫層析法的建立[J]. 現代預防醫學，2015，42（6）：1078-1080，1107.

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[8] 谷金蓮，于洋，梁爭論，等. 丙型肝炎病毒不同標志物檢測結果的相關性分析[J]. 微生物學免疫學進展，2015，43（6）：26-29.

Correlation of Detected Results of HCV Ag, Antibody, Nucleic Acid Marker

LIANG Xiaoyan Faculty of Basic Medicine, Nanyang Medical College, Nanyang He’nan 473000, China

Objective To investigate correlation of detected results of hepatitis C virus antigen (HCA Ag), antibody, nucleic acid marker. Methods HCV RNA load, HCV Ag and anti-HCV index of 302 plasma samples were detected by HCV RNA quantitative reagent, HCV core antigen reagent, HCV antibody reagent. Results HCV RNA load increased, positive accordance rate of HCV Ag and anti-HCV increased, positive rate of serum indexes in different HCV RNA loads had difference (P < 0.05). Detection rate of genotyping was 46.51% in HVC RNA positive samples. Conclusion HCV RNA genotyping reagent has no high detectability with bad effect and needs screening. It needs early diagnosis to conf i rm HCV infection.

HCV Ag; antibody; nucleic acid marker; detection

R446

A

1674-9316（2017）10-0110-02

10.3969/j.issn.1674-9316.2017.10.061

南陽醫學高等專科學校基礎醫學部，河南 南陽 473000