紅色耐寒月季“MoHaЛNЗa”的快繁技術

李，周紅昕，于新海

（吉林省生物研究所，吉林長春130000）

紅色耐寒月季“MoHaЛNЗa”的快繁技術

（吉林省生物研究所，吉林長春130000）

紅色耐寒月季“MoHaЛNЗa”，是吉林省生物研究所從俄羅斯引進的一個全新的耐寒月季品種。本實驗以“MoHaЛNЗa”莖段為外植體，通過植物組織培養手段建立快速繁殖。該試驗獲得成功，豐富了東北地區耐寒花卉品種。

俄羅斯耐寒月季“MoHaЛNЗa”；組織培養；紅色耐寒月季；快速繁殖

相較于我國南方，北方城市綠化景觀水平相對較低，草花品種單一，壽命短，園林負擔沉重。針對此情況，可以借鑒俄羅斯等高緯度地區城市綠化的成功經驗，在寒溫帶城市地區綠化中引入可連續開花耐寒月季作為多年生小灌木花卉，不但觀賞性高，并且抗低溫效果好，因此應用前景非常廣闊。

1 材料與方法

1.1 外植體建立

材料為馴化2年的紅色耐寒月季“MoHaЛNЗa”。選取帶芽莖段的最好時期是5月末。材料選取當年生半木質化枝條中飽滿而未萌發的側芽。首先，將選好的枝條去葉，用牙刷蘸洗衣粉水輕輕刷洗后放入裝有多菌靈的三角瓶中震蕩清洗5分鐘。再用流水沖洗1~2小時，剪成6~8厘米左右帶腋芽的莖段。超凈臺上，將莖段先用70%酒精溶液浸泡1分鐘，再置于0.1%的升汞溶液中消毒12分鐘,然后用無菌水沖洗4次，濾紙吸干后接種。

1.2 離體芽誘導培養

將無菌莖段分別接種于不同配方培養基上誘導萌芽。誘導培養基以MS為基本培養基，加入不同濃度的細胞分裂素和生長素。后用正交法添加不同劑量的6-BA與不同濃度的NAA進行配比試驗。組成4種培養基：第一種MS+6-BA0.50mg/L+NAA0.10mg/L、第二種MS+6-BA0.50mg/L+NAA0.20mg/L、第三種MS+6-BA1.00mg/L+NAA0.10mg/L、第四種MS+6-BA1.00mg/L+NAA0.20mg/L。每種培養基均接種2到3個無菌莖段，培養2周后統計離體芽誘導率。

1.3 叢生芽繼代增殖培養

將誘導培養基上已萌發的“MoHaЛNЗa”嫩芽切下轉接到4種不同濃度的細胞分裂素和生長素的繼代培養基中進行繼代增殖培養。繼代培養基為：第五種MS+6-BA0.50mg/L+NAA0.10mg/L、第六種 MS+6-BA1.00mg/L+NAA0.10mg/L、第七種 MS+6-BA0.50mg/L+NAA0.20mg/L、第七種MS+6-BA1.00mg/L+NAA.20mg/L。每種培養基接入3～5株嫩芽，接種時單芽莖段長1厘米至2厘米左右，培養4周后統計叢生芽的數量以及高于1厘米的芽數。

1.4 試管苗壯苗培養

將生長旺盛的叢生苗切成單株接入到2種不同配方的壯苗培養基中培養，每瓶接10～15株。4周后統計試管苗的生長情況。組成2種壯苗培養基為：第九種MS+NAA0.10mg/L、第十種MS+NAA0.20mg/L。

1.5 試管苗生根培養

將生長鍵壯，高度為5厘米左右的試管苗接入到生根培養基中。

每種培養基接入5~10個單株，接種15天后統計生根情況。

2 結果與分析

2.1 離體牙的誘導結果

離體芽的誘導很快，接種7天后離體芽開始萌動，芽萌動后培養3周后，結果顯示：第一種的培養基離體芽少，出芽率為75%；第二種的出芽率為100%，離體芽生長細弱；第四種的離體芽萌動后產生愈傷組織；第三種出芽率為100%，且生長健壯。

反復試驗，結果表明：適合離體芽誘導的培養基為：第三種。

2.2 叢生芽繼代增殖結果

耐寒月季“MoHaЛNЗa”在4種繼代增殖培養基中培養4周后，芽的增殖倍數和大于2厘米芽的比率存在著差異。其中第六種和第八種兩種培養基，增殖的叢生芽數量多，且生長健壯，芽的增殖倍數分別為2.16倍和3.3倍，高于2厘米的芽占75.%和71.7%，明顯高于其他培養基。

第五種的培養基中，叢生芽生長細弱，高于2厘米的芽僅占18.25%；第七種的培養基中，繼代芽產生愈傷組織。

反復試驗，結果表明：適合“MoHaЛNЗa”繼代增殖的培養基為第六種。

2.3 試管苗壯苗培養

將生長旺盛的叢生苗切單株接入2種培養基培養4周后統計試管苗的生長情況。結果顯示：第九種培養基中試管苗有70%生長健壯，30%有分化情況；第十種培養基中試管苗100%生長鍵壯。

反復試驗，結果表明：適合“MoHaЛNЗa”試管苗壯苗培養基為第十種。

2.4 試管苗的生根培養結果

將生長粗壯的耐寒月季接入到生根培養基上培養10天后開始長出白色的根，根系發達，粗壯，葉片深綠，長勢良好，生根率達為95%，平均根長位1.5厘米和2.5厘米。

3 結論

經過兩年的試驗，建立了俄羅斯耐寒月季“MoHaЛNЗa”的組培快繁體系，組培苗能夠在長春地區露地安全越冬，其越冬成活率在80%以上。該研究的結果給規模化繁殖提供了可行性，極大地保存和豐富了東北地區耐寒花卉品種。

[1]王軍娥.牡丹組織培養技術的研究[D].西北農林科技大學.2008

[2]C. Leifert,Helen Camotta,W. M. Waites.Effect of combinations of antibiotics on micropropagated Clematis, Delphinium,Hosta, Iris and Photinia [J]1992,Plant Cell, Tissue and OrganCulture(02):153-160.

S685.12

A

10.14025/j.cnki.jlny.2017.22.023

李，碩士，助理研究員，研究方向：生物工程。