東莞地區HBsAg/TP聯合檢測試劑的應用分析

么俊卿+葉惠芬

[摘要]目的研究乙型肝炎病毒表面抗原/梅毒螺旋體抗體聯合檢測試劑（膠體金法）即HBsAg/TP聯合檢測試劑用于獻血者血液初篩的效果。方法選擇2014年9月～2015年12月，在東莞市中心血站獻血的獻血者為研究對象，其中2014年9月～2015年4月獻血的為對照組（43952人），初篩血液使用乙肝試紙條檢測血液，2015年5～12月獻血的為觀察組（45 810人），初篩血液使用HBsAg/TP聯合檢測試劑，比較兩者血液報廢率。結果使用HBsAg/TP聯合檢測試劑初篩血液后，血液因乙肝表面抗原陽性而報廢從0.68%下降至0.56%，差異有統計學意義（P<0.05）；血液因梅毒螺旋體抗體陽性而報廢的從0.68%下降至0.21%，差異有統計學意義（P<0.05）。結論使用乙型肝炎病毒表面抗原，梅毒螺旋體抗體聯合檢測試劑（膠體金法）進行血液初篩，操作簡單、可靠，能大大降低血液的報廢率，值得在各大血站推廣。

[關鍵詞]HBV；TP；HBsAg/TP聯合檢測試劑；血液初篩；實驗室檢測

當前我國乙肝病毒感染與梅毒疫情流行形勢日益嚴重，呈持續增長和局部高流行態勢，乙肝病毒與梅毒正從高危人群向一般人群擴散，在無償獻血人群中乙肝病毒與梅毒感染者檢出率不斷增多。乙型肝炎病毒和梅毒螺旋體病毒也是目前我國采供血機構對獻血者進行血液檢測的必檢項目，也是血液報廢的重要原因。當前梅毒的實驗室檢測方法主要有病原學檢查和血清學試驗，血清學試驗又梅毒螺旋體血球凝集試驗（TPHA）、熒光梅毒螺旋體抗體吸附試驗（rTA-ABS）、梅毒螺旋體明膠凝集試驗（TPPA）等；乙肝病毒的檢測主要為HBsAg、抗-HBV檢測等，而ELISA法在臨床應用的時間較早，金標法是近年建立起來的免疫學檢測法。為了提高工作效率，避免不必要的血液報廢，2015年5月，我站開始使用乙型肝炎病毒表面抗原/梅毒螺旋體抗體聯合檢測試劑（膠體金法，HBsAg/TP）對無償獻血者進行初篩，取得較好的成效，現報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料

選擇2014年9月～2015年12月，在東莞市中心血站獻血的獻血者為研究對象，共89762人，其中2014年9月～2015年4月獻血人數43 952人為對照組，其中男23 852例，女20000例；年齡19～67歲，平均（45.2±3.1）歲；血液初篩項目：血型、乙型肝炎表面抗原、血紅蛋白、谷氨酸氨基轉移酶；2015年5月～2015年12月獻血人數45 810人為觀察組，其中男24 810例，女21 000例；年齡18～68歲，平均（45.1±4.1）歲；血液初篩項目：應用HBsAg/TP聯合檢測試劑檢測乙型肝炎表面抗原和梅毒抗體，其他檢測項目與對照組相同。兩組的性別、年齡比較差異無統計學意義（P>0.05），具有可比性。

1.2檢測儀器和方法

初篩用廈門英科新創公司HBsAg/TP膠體金聯合檢測試紙條（批號7J0615，8F0619），復檢用北京萬泰生物科技有限公司梅毒螺旋體抗體診斷試劑盒（批號N20071207，N20090101）、珠海麗珠生物科技有限公司梅毒螺旋體抗體診斷試劑盒（批號20071107，20081223）、乙型肝炎病毒表面抗原診斷試劑盒（批號20140921，20151009）和羅氏診斷產品有限公司核酸檢測試劑盒（批號L046010，L274420）。所用試劑均為中國藥品生物制品檢定所批批檢合格，在有效期內使用。檢測儀器包括Thermo Electron移液器，TECANEVO 200/8全自動加樣系統，德國Dade BehringBEPIII全自動酶免疫分析系統，Hamilton STAR全自動混樣器COBAS AmpliPrep全自動提取儀COBAS Taqman Analyzer全自動擴增儀，儀器均在校準期內。

初篩為手工加樣，復檢采用ELISA雙抗原夾心法、ELISA雙抗體夾心法和核酸檢測法，由有資質的檢驗人員進行檢驗。對89762份標本不合格率進行分析，檢驗結果判定：兩種試劑均為無反應性定義為合格，無論其中一種試劑為反應性定義為不合格。

1.3統計學處理

選擇SPSS14.00軟件進行數據分析，計數資料以%表示，采用x²檢驗，計量資料以（x±s）表示，采用t檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

2.1兩組乙肝檢測情況比較

使用乙型肝炎病毒表面抗原/梅毒螺旋體抗體聯合檢測試劑（膠體金法）進行血液初篩后，因乙肝陽性而報廢率的血液從0.68%下降至0.56%，差異有統計學意義（P<0.05）。見表1。

2.2兩組梅毒檢測情況比較

經過檢測，梅毒螺旋體抗體陽性報廢率的血液從原來的0.68%下降至0.21%，差異有統計學意義（P<0.05）。見表2。

3討論

眾所周知，我國是乙肝大國，2014年乙型肝炎病例報告90多萬例，據估算全國約有3000萬乙型肝炎患者，全國各地血站按《獻血者健康檢查要求》，把乙型肝炎表面抗原檢測作為血液初篩的必檢項目，有效減低血液報廢率，梅毒近年來也呈流行趨勢，已不再局限于高危人群，不同人群均有抗-TP陽性者，而且以性傳播為主的梅毒，其感染者還有可能成為艾滋病毒的潛在傳播者。導致梅毒抗體陽性和獻血者乙肝表面抗原已成為導致血液報廢的重要原因，僅次于ALT不合格。而為防止血液傳染疾病，對獻血者的血液梅毒與乙肝病毒初篩檢測非常必要。

在早期為了方便獻血者，血站大多采用金標HBsAg試紙條對獻血者作HBsAg初篩，有效控制了因HBsAg陽性結果而導致的血液報廢率。但是當前隨著性病感染率在我國的逐年升高，在直接采血中因梅毒陽性而導致的血液報廢率也逐漸提高。乙肝表面抗原（HBsAg）為乙肝病毒的包膜蛋白，雖然本身沒有傳染性，但是HBsAg常伴隨乙肝病毒的存在，為此HBsAg陽性是乙肝病毒感染的標志。梅毒螺旋體是引起人類梅毒的病原體，梅毒主要通過性接觸、母嬰垂直傳播，也可通過血液傳播，當病原體侵入人體后，可刺激機體免疫系統產生梅毒螺旋體特異性抗體。HBsAg/TP聯合檢測試劑作為一項薪型體外診斷技術當前得到了廣泛應用，其應用原理是在硝酸纖維素膜上預包被金標抗HBsAg單抗和金標一特異性梅毒基因重組抗原，再對硝酸纖維素膜上的2條檢測線和對照線上依次包被抗-HBsAg單抗、特異性梅毒基因重組抗原和羊抗鼠IgG分別進行檢測，適用于乙型肝炎表面抗原和梅毒螺旋體早期感染的輔助診斷。

為了降低血液報廢率，保證血液質量，我站從2015年5月開始，對獻血者進行乙型肝炎病毒表面抗原，梅毒螺旋體的聯合檢測，取得了明顯的成效，梅毒螺旋體抗體陽性的檢測率明顯下降，與相關研究結果一致。同時乙型肝炎病毒表面抗原的陽性檢測率也有所降低，分析其原因可能是：（1）HBsAg/TP聯合檢測試劑，要求全血或血漿（血清）量為60～80μL，加樣15min后觀察和判斷結果，而以往單HBsAg檢測試劑要求全血或血漿（血清）量為70μL，在加樣10min后觀察和判斷結果，易出現假陰性，聯合試劑的加樣量增加了，觀察和判斷結果的時間也增加了，部分弱反應性的血液樣本也能被檢測出來；（2）血液初篩對環境有嚴格的要求，如溫度、濕度，2015年5月份開始，我站外采組更改了血液采集流程，血液初篩從以往在車外進行改為在車里進行，車箱內溫度維持在20～25℃之間，濕度維持在40%～70%，同時車箱內安靜不受干擾，更利于工作人員的操作，血液的加樣量和試劑反應時間等到保證，結果更加可靠。同時有血站認為，對于初次獻血者，需要做乙型肝炎病毒表面抗原，梅毒螺旋體的聯合檢測，而以往檢測合格的重復獻血者不需要做以上兩種檢測，本研究認為，此做法只適用于《血站技術操作規程（2012版）》要求，血液初篩項目只有血紅蛋白（Hb）和丙氨酸氨基轉移酶（ALT）血液檢測的血站，從降低血液報廢率，節約實驗室檢測成本的角度考慮，我們認為初次獻血者和重復獻血者檢測乙型肝炎病毒表面抗原，梅毒螺旋體是必要的。

總之，使用乙型肝炎病毒表面抗原/梅毒螺旋體抗體聯合檢測試劑（膠體金法）進行血液初篩，操作簡單、可靠，能大大降低血液的報廢率，值得在各大血站推廣。