MSCT灌注成像評估胃癌組織表面通透性及其與微血管密度的相關性

陶敏敏 毛慶聰 何瑞軒*

隨著醫(yī)學影像學技術(shù)的不斷發(fā)展和創(chuàng)新，多層螺旋 CT（multislice spiral computed tomography，MSCT）已經(jīng)被廣泛應用于臨床，并在腫瘤研究領域越來越受到臨床的重視，其不僅應用于腫瘤早期篩查診斷中，而且應用于腫瘤術(shù)前評估、藥物有效性評估以及生物學行為研究中［1］。大量研究表明，腫瘤的生物學行為與其組織的微血管密度（microvessel density，MVD）有著密切的聯(lián)系［2］。本研究旨在運用MSCT對胃癌病灶進行灌注成像檢查，探討其在不同臨床病理因素下的表面通透性（permeability surface，PS）特征，及其與MVD的相關性，以期為胃癌的臨床治療提供有價值的參考依據(jù)。

1 臨床資料

1.1 一般資料 選取2014年2月至2016年9月期間，因胃癌在武警浙江省總隊嘉興醫(yī)院行手術(shù)切除并最終經(jīng)術(shù)后病理證實的54例患者作為觀察對象，其中男36例，女18例；年齡28～66歲，平均年齡（45.3±13.5）歲。所有觀察對象于術(shù)前1周均接受MSCT灌注成像檢查獲得病灶組織的PS值，并對術(shù)后病灶組織標本進行病理學檢查獲得MVD值。所有觀察對象在接受MSCT灌注成像前以及胃癌病灶手術(shù)切除前，均未接受任何形式的抗腫瘤治療。

1.2 MSCT灌注成像檢查 儀器：GE Light Speed 64 VCT；工作站分析軟件：ADW 4.4，CT Perfusion 4.0 體部腫瘤灌注程序；對比劑：碘普羅胺（規(guī)格：300mg I/ml，注射速率：4.5ml/s，劑量：50ml）。儀器參數(shù)：管電壓及管電流：120KV和200mA；掃描層厚及范圍：5mm和膈頂-肛門；掃描時間及曝光時間：50s和16.8s；域值范圍：0～140。清晨空腹狀態(tài)，于MSCT檢查前20min，囑咐觀察對象飲用2.5%等滲甘露醇1200ml，隨后并接受20mg用藥劑量的山莨菪堿進行肌肉注射。囑咐觀察對象取仰臥位，脫去金屬衣物及飾品并在腹部加以腹帶，MSCT檢查期間應作平靜呼吸。進行MSCT灌注成像檢查前，首先對觀察對象行常規(guī)CT平掃檢查，觀察胃癌病灶所在層面并以此作為MSCT灌注成像檢查的靶層面。在對比劑靜脈注射7s后，作MSCT灌注成像動態(tài)連續(xù)掃描，存儲灌注成像影像信息。影像信息導入灌注成像工作站進行分析處理時，將輸入動脈設定為腹主動脈，選取病灶的實性部位作為感興趣區(qū)（region of interest，ROI），系統(tǒng)自動分析生成ROI的時間-密度曲線并由此獲得病灶組織的PS值（最終取值為3次重復測量的平均值）。見圖1。

1.3 MVD分析 參照MSCT灌注成像檢查的ROI影像信息，術(shù)后獲取對應ROI胃癌組織標本，并使用10.0%甲醛液對組織標本進行固定后，以石蠟對組織標本進行包埋并切片。使用免疫組織化學染色方法（試劑盒：來源于美國MBI公司，CD34單克隆抗體染色）獲取ROI胃癌組織標本的MVD值（單位：條/200HP）［3］。經(jīng)染色后組織標本的微血管內(nèi)皮細胞呈現(xiàn)棕黃色-深棕色。MVD計數(shù)開始時，首先使用低倍視野（40倍鏡）對組織標本進行仔細觀察，尋找并確定組織標本中血管分布最豐富、密度最高的區(qū)域，然后使用高倍視野（200 倍鏡）對3個高倍視野內(nèi)的MVD值進行計數(shù)（計數(shù)時獨立的染色單位作為一個MVD計數(shù)值），取其均值作為最終取值［4］。見圖1。

1.4 統(tǒng)計學方法 采用SPSS19.0 統(tǒng)計軟件。計量資料以（s）表示，組間比較采用t檢驗。兩變量間的關系分析使用Pearson相關分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 一般資料 54例胃癌患者的術(shù)后病理結(jié)果顯示：腺癌患者合計44例，其中高分化腺癌患者4例，中分化腺癌患者22例，低分化腺癌患者18例；印戒細胞癌患者4例；黏液腺癌患者6例。TNMⅡ期患者16例，TNMⅢ期患者32例，TNMⅣ期患者6例。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者38例，淋巴結(jié)無轉(zhuǎn)移患者16例。本研究的分化組患者26例，由高分化腺癌患者+中分化腺癌患者共同構(gòu)成；未分化組患者共28例，由印戒細胞癌患者+低分化腺癌患者+黏液腺癌患者共同構(gòu)成。

2.2 胃癌在不同臨床病理特征中的PS比較 未分化組胃癌病灶組織的PS明顯高于分化組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組胃癌病灶組織的PS明顯高于淋巴結(jié)無轉(zhuǎn)移組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；TNMⅢ～Ⅳ期組胃癌病灶組織的PS明顯高于TNMⅠ～Ⅱ期組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 胃癌在不同臨床病理特征中的PS值（

表1 胃癌在不同臨床病理特征中的PS值（

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2.3 胃癌在不同臨床病理特征中的MVD比較 見表2。

表2 胃癌在不同臨床病理特征中的MVD（

表2 胃癌在不同臨床病理特征中的MVD（

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2.4 胃癌病灶組織的PS與其MVD之間的相關性 胃癌病灶組織的PS值與其MVD之間呈正相關，相關系數(shù) r=0.672，P 值 =0.000（P＜0.05）。見圖 2。

圖2 PS與MVD的相關性散點圖

3 討論

PS是指在腫瘤組織血液循環(huán)中的物質(zhì)成分從毛細血管腔經(jīng)過毛細血管內(nèi)皮到達組織間隙中的速率，PS值的大小不僅能良好地反映胃癌病灶組織中血管內(nèi)皮細胞的完整性情況，而且能客觀反映毛細血管壁的通透性情況［5］。本資料結(jié)果中，未分化組、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組以及TNMⅢ～Ⅳ期組胃癌病灶組織的PS均分別明顯高于相對應的分化組、淋巴結(jié)無轉(zhuǎn)移組以及TNMⅠ～Ⅱ期組，提示胃癌病灶組織的PS狀態(tài)與胃癌的發(fā)生發(fā)展有著密切關系。胃癌病灶組織的PS值越高，預示胃癌病灶可能具有更高的惡性程度和TNM分期級別，其發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的可能性增加。胃癌屬于血管依賴性腫瘤，其生長發(fā)展需要大量的血供營養(yǎng)物質(zhì)作為基礎。胃癌病灶的惡性程度和TNM分期級別越高，常伴隨大量毛細血管網(wǎng)的異常形成，使單位組織內(nèi)的血管密度和動-靜脈通道異常增加，加之新生血管的基膜完整性和成熟度較正常血管明顯下降，造成血管內(nèi)皮細胞之間的間隙明顯增寬，連接松散，血管內(nèi)物質(zhì)成分易從血管腔滲透至組織間隙，即胃癌病灶組織的PS明顯增大［6］。因此，運用MSCT灌注成像對胃癌病灶組織的PS進行定量分析，對判定胃癌病灶的分化及進展程度具有一定參考價值。

目前，臨床上公認的腫瘤血管生成評定“金標準”仍然是術(shù)后病理檢查所獲得的腫瘤組織MVD，借助于腫瘤組織的MVD指標可以對腫瘤組織結(jié)構(gòu)內(nèi)部的微血管生成情況以及分布情況進行客觀評估。本資料結(jié)果中，未分化組、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組以及TNMⅢ～Ⅳ期組胃癌病灶組織的MVD值均分別明顯高于相對應的分化組、淋巴結(jié)無轉(zhuǎn)移組以及TNMⅠ～Ⅱ期組，提示胃癌病灶組織中微血管生成狀態(tài)與胃癌的發(fā)生發(fā)展同樣密切相關。胃癌病灶分化程度越低，TNM分期級別越大，其組織內(nèi)部的微血管生成越旺盛，胃癌病灶組織的MVD越高。同時胃癌病灶內(nèi)部具有豐富的異常增生畸形血管網(wǎng)，有利于癌細胞以更快的速度向周圍正常組織及淋巴結(jié)進行轉(zhuǎn)移擴散，使患者病情進展加快。這與胃癌作為富血供惡性腫瘤的生長機制相一致。

本資料結(jié)果中，胃癌病灶組織的PS與其MVD呈正相關，相關系數(shù)r=0.672，提示胃癌病灶組織的PS與其MVD之間具有一致性趨勢，即胃癌組織的MVD水平越高，預示在進行MSCT灌注成像檢查時其PS值越大。利用MSCT灌注成像定量分析胃癌病灶組織的PS，可無創(chuàng)性地在一定程度上反映胃癌病灶組織的微血管生成狀態(tài)。上述兩者間的趨勢關系可能與胃癌病灶組織內(nèi)部大量異常新生的毛細血管具有高通透性，同時高度密集的新生血管網(wǎng)中存在大量動-靜脈短路有著密切關系。對研究結(jié)果綜合分析后，作者得出以下推測，胃癌組織的分化程度越差和TNM分期級別越高，預示其單位組織內(nèi)所具有的新生微血管密度越高，即MVD越大，MSCT灌注成像的PS值越大；反之即MVD、PS值越小。

［1］ 劉倩倩,黃小華,董國禮,等．多層螺旋CT灌注成像在胰腺癌診斷中的應用價值．中華臨床醫(yī)師雜志:電子版,2014,8(14):45-49．

［2］ 王更記, 楊文鋒, 付政, 等． 非小細胞肺癌18F-FLT PET/CT顯像與腫瘤微血管密度的相關性．中華核醫(yī)學與分子影像雜志,2015, 35(1):1-4．

［3］ 馬燕,李晶,任衛(wèi)東,等．超微血管成像與乳腺腫瘤微血管密度的相關性研究．臨床與病理雜志,2016,36(4):364-369．

［4］ 陳炳,趙振華,楊建峰,等．肝細胞癌磁共振擴散加權(quán)成像與腫瘤細胞密度及微血管密度的相關性研究．腫瘤學雜志,2015,21(5):440-442．

［5］ 徐官珍,陳玉峰,鄒文遠,等．MSCT在胃癌TNM分期與手術(shù)病理的對照研究．CT理論與應用研究,2015,24(3):429-435．

［6］ 王勇,成瑤,張曉勇．螺旋CT血管成像和灌注成像技術(shù)對胃癌血供和血流動力學評價．標記免疫分析與臨床,2014,21(5):589-592．