肥胖癥兒童肝纖維化指標與血清GPDA活性變化的研究

譚曉霞，黃珍珍，徐曉紅

(麗水市婦幼保健院檢驗科，浙江 麗水 323000)

肥胖癥兒童肝纖維化指標與血清GPDA活性變化的研究

譚曉霞，黃珍珍，徐曉紅

(麗水市婦幼保健院檢驗科，浙江 麗水 323000)

目的 探討肥胖癥兒童肝纖維化指標透明質酸(HA)、層粘連蛋白(LN)、血清Ⅲ型前膠原肽(PCⅢ)、Ⅳ型膠原(CⅣ)與血清甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶(GPDA)活性的變化及其在臨床上的應用價值。方法 對2015年6月至2016年2月在麗水市婦幼保健院兒科門診診斷為肥胖癥的159例6～15歲肥胖癥兒童(肥胖癥組)和42例9～14歲正常健康兒童(正常對照組)進行肝纖維化指標與血清GPDA活性的比較，并對結果進行分析。結果 與正常對照組相比，肥胖癥組HA、PCⅢ水平均明顯升高(t值分別為7.403、5.405，均P<0.05)，以PCⅢ升高明顯；肥胖癥組GPDA活性差異有統計學意義(t=8.965，P<0.01)。肥胖癥患兒治療前后GPDA活性、HA及PCⅢ指標比較，各檢測項目均出現降低，差異均有統計學意義(t值分別為6.452、5.684、4.369，均P<0.05)。PCⅢ與GPDA呈正相關(r=0.602，P<0.05)。結論 肥胖癥兒童GPDA活性與PCⅢ水平的改變是其肝臟病變的早期敏感指標，兩者的動態監測，對于診斷、療效觀察有一定的臨床意義。

肥胖癥；透明質酸；層粘連蛋白；Ⅲ型前膠原肽；膠原；甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶

肥胖癥兒童發病率逐年增加是造成青少年無癥狀轉氨酶增高的主要原因，部分可以轉化為肝纖維化和肝硬化，甚至終末期肝病[1],肝纖維化為病程發展的重要環節。甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶(glycylproline dipeptidyl aminopeptidase,GPDA)是一種二肽氨基肽酶，它廣泛存在于肝、腎、唾液腺、結締組織和血清中。國內外有關研究表明，肝膽疾病患者血清GPDA顯著上升[2]。近年來對GPDA的研究報道，以消化系統腫瘤患者GPDA的變化多見，本文對肥胖癥患兒肝纖維化指標及GPDA的變化進行研究，對其在臨床上的意義進行探討和分析。

1材料和方法

1.1研究對象

選取2015年6月至2016年2月在麗水市婦幼保健院兒科門診診斷為肥胖癥的兒童共159例為肥胖癥組，其中男性97例，女性62例；年齡6～15歲，平均(10.67±2.59)歲；體質量指數(BMI)為(28.26±4.31)kg/m2，其位于2000年全國學生體質調研同年齡同性別第95百分位以上，符合肥胖兒童的診斷標準[3]。同時選取愿意在本院進行治療的肥胖癥患兒43例，進行治療前后對比。取同期在本院體檢中心接受體檢的部分健康兒童為正常對照組，按序隨機入組，經常規檢查排除心、肝、腎、肺等疾病，共42例，其中男性29例，女性13例；年齡9～14歲，平均(11.06±1.29)歲；BMI為(16.97±1.23)kg/m2，其位于2000年全國學生體質調研同年齡同性別第85百分位以下[3]。兩組患兒性別構成、平均年齡差異均無統計學意義(均P>0.05)。

1.2檢測方法

1.2.1甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶的測定

采用連續監測法，即GPDA催化反應底物甘氨酰脯氨酰對硝基苯胺對甲苯磺酸鹽水解，生成甘氨酰脯氨酸和對硝基苯胺，后者的含量與GPDA活性呈正比。測定試劑盒由溫州伊利康公司提供。測定儀器為OLYMPUS AU640全自動生化分析儀。

1.2.2肝纖維化指標的測定

采用放射免疫法，透明質酸(hyaluronic acid，HA)、層粘連蛋白(1aminin，LN)、血清Ⅲ型前膠原肽(serum type Ⅲprocollagen，PCⅢ)、Ⅳ型膠原(type Ⅳcollagen，CⅣ)試劑盒均購自上海海軍研究所。測定儀器為中佳光電GC-1200γ放射免疫計數器。

1.3統計學方法

采用SPSS 19.0軟件分析數據，呈偏態分布的計量資料用中位數表示，組間比較用非參數檢驗的兩個獨立樣本的Mann-WhitneyU檢驗；血清GPDA與肝纖維化指標之間的相關性用Pearson相關分析,以P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

2.1兩組兒童肝纖維化指標與甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶活性的比較

與正常對照組相比，肥胖癥組的HA、PCⅢ水平升高明顯(均P<0.05)，尤其以PCⅢ明顯；肥胖癥組GPDA活性差異有統計學意義(P<0.01),見表1。

表1 兩組兒童肝纖維化指標與GPDA活性比較±S)

2.2肥胖癥患兒治療前后甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶活性、透明質酸與Ⅲ型前膠原肽的比較

選取的43例本院治療肥胖癥患兒治療后GPDA活性、HA及PCⅢ指標均有所降低，且差異均有統計學意義(均P<0.05)，見表2。

2.3相關結果分析

肥胖癥患兒GPDA與各肝纖維化指標HA、LN、PCⅢ、CⅣ經相關性分析顯示均呈正相關(r值分別為0.348、0.113、0.602、0.144，均P<0.05)；其中與PCⅢ相關性較強，有一定的臨床意義，進一步選擇分析GPDA與PCⅢ間的相關性，回歸方程為：Y=26.307X-61.782，r=0.602，P<0.05。

3討論

肥胖的真正含義是人體內脂肪細胞增多或細胞體積增大，或者兩種情況同時存在，導致體內脂肪成分顯著增高。有研究表明，兒童、青少年肥胖很有可能延續至成年人，并且與許多成年期慢性疾病，如高血壓、高脂血癥、糖尿病及動脈粥樣硬化性心、腦血管疾病有非常密切的關系，導致這些疾病的患病率和病死率急劇上升[4]，因此如何早期預防與治療是降低此類疾病發生的一重要環節。

3.1肥胖癥患兒肝纖維化指標和甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶檢測的狀況

已往研究結果證實血清肝纖維化指標HA、LN、PCⅢ和CⅣ是實驗室反映細胞外基質代謝的重要血清學指標，其含量升高表明患者體內已開始啟動肝纖維化，與肝纖維化的活性呈相關性[5]。因此可以認為此類指標是臨床判斷肝纖維化程度和評價抗纖維化治療療效的一種主要非創傷性指標[6-7]。本研究發現肥胖癥患兒存在血清PCⅢ和HA異常，特別是PCⅢ表現異常，因此認為肥胖癥患兒已存在一定程度的纖維化傾向。

GPDA于1966年被發現迄今，其生理功能尚未能完全闡明。已知GPDA與機體膠原蛋白的肽鏈降解及更新有關。GPDA主要是能特異性地水解N末端為甘氨酰脯氨酸的肽鍵，而膠原分子中富含此種結構，故某些疾病膠原代謝的變化有可能改變此酶的活性。已往文獻報道血清GPDA活性升高多作為肝臟發生病變的判斷指標，但對肥胖癥患者GPDA活性的變化意義過去研究甚少[2]。本研究結果表明，肥胖癥患兒血清GPDA水平與健康兒童相比有較大幅度上升，說明患兒肝纖維化所致肝臟已出現一定程度的損傷。

3.2肥胖癥患兒肝纖維化指標和甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶檢測兩者間關聯分析

本研究發現，43例肥胖癥患兒治療后GPDA活性、HA及PCⅢ水平均出現降低(均P<0.05)，提示通過治療，肥胖癥患兒纖維化趨勢得到了有效減緩，肝損傷程度有所逆轉。

出現肥胖癥患兒血清GPDA活性上升的機制，一方面可能與這個年齡段的男孩發育旺盛，骨骼系統生長迅速，膠原含量增高劇烈有關；另一方面與肥胖癥患兒出現早期肝纖維化傾向有關，肝纖維化的重要特征為結締組織增生，而結締組織中富含GPDA，因此在細胞分化過程中，產生較多的膠原酶，分解膠原，啟動肝組織及肝細胞的正常修復[8]。GPDA作為膠原分解過程中的二肽氨基肽酶，參與了膠原的降解代謝，故患者血中GPDA濃度上升。

本研究也證實了肥胖癥患兒GPDA與肝纖維化指標變化密切相關，從GPDA與肝纖維化指標的相關性分析看出，兩者呈不同程度的正相關，特別與PCⅢ顯示出較強相關性(r=0.602)，因此結合血清GPDA與PCⅢ的聯合監測可作為了解肝損傷程度、肝纖維化程度及治療后療效評價的一個重要參考指標。另外，從對GPDA與肝纖維化指標的動態觀察結果亦表明，肥胖癥患兒各項指標術后有不同幅度下降，這從一定程度上說明GPDA與肝纖維化指標可用于臨床療效及病情監測。

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[3]中國肥胖問題工作組.中國學齡兒童青少年超重、肥胖篩查體重指數值分類標準[J].中華流行病學雜志,2004,25(2):97-102.

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[5]徐銘益,陸倫根.肝纖維化血清學標志物及診斷模型的診斷價值[J].中華肝臟病雜志,2014,22(9):647-649.

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[專業責任編輯：帖利軍]

Research of hepatic fibrosis indicators and serum glycylproline dipeptidyl aminopeptidase activity changes in obese children

TAN Xiao-xia, HUANG Zhen-zhen, XU Xiao-hong

(DepartmentofClinicalLaboratory,LishuiMaternalandChildHealthCareHospital,ZhejiangLishui323000,China)

Objective To discuss the changes of hepatic fibrosis indicators such as hyaluronic acid (HA), laminin (LN), serum procollagen peptide Ⅲ (PCⅢ), collagen Ⅳ (CIV) and serum glycylproline dipeptidyl aminopeptidase (GPDA) activity in obese children and their clinical application value. Methods Hepatic fibrosis indicators and serum GPDA activity were compared between 159 patients of 6 to 15 years old diagnosed as obesity in pediatric outpatient department of Lishui Maternal and Child Health Care Hospital from June 2015 to February 2016 (obese group) and 42 healthy children of 9 to 14 years old (control group). Results were compared between two groups. Results Compared to the control group, HA and PCIII levels in the obese group increased significantly (tvalue was 7.403 and 5.405, respectively, bothP<0.05), especially the increase of PCⅢ. The difference in GPDA activity between two groups had significant difference (t=8.965,P<0.01). Comparison to GPDA activity, HA and PCⅢ levels in obese children before treatment, they decreased after treatment and the differences were statistically significant (tvalue was 6.452, 5.684 and 4.369, respectively, allP<0.05). PCⅢ showed a positive correlation with GPDA (r=0.602,P<0.05). Conclusion Changes of GPDA activity and PCⅢ level in obese children are sensitive indicators of liver lesions at early stage. Dynamic monitoring of both indicators has clinical significance for diagnosis and clinical efficacy observation.

obesity; hyaluronic acid (HA); laminin (LN); procollagen peptide III (PCIII); collagen; glycylproline dipeptidyl aminopeptidase (GPDA)

2016-04-10

譚曉霞(1977-)，女，副主任技師，主要從事臨床生化及免疫工作。

10.3969/j.issn.1673-5293.2017.01.008

R153.2

A

1673-5293(2017)01-0021-02