C-反應(yīng)蛋白、白介素-6和D-二聚體在下肢深靜脈血栓形成患者干預(yù)前后血清中的表達(dá)及意義

丁 萌，張青云，景 陽(yáng)，陳向華，耿學(xué)麗，張秀琴，楊 植,田 甜

(1.承德醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院 a.檢驗(yàn)科;b.血管外科，河北 承德067000;2.吉林省腫瘤醫(yī)院)

C-反應(yīng)蛋白、白介素-6和D-二聚體在下肢深靜脈血栓形成患者干預(yù)前后血清中的表達(dá)及意義

丁 萌1a，張青云1b*，景 陽(yáng)1b，陳向華1a，耿學(xué)麗1a，張秀琴1a，楊 植1b,田 甜2

(1.承德醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院 a.檢驗(yàn)科;b.血管外科，河北 承德067000;2.吉林省腫瘤醫(yī)院)

目的 探討C-反應(yīng)蛋白(CRP)、白介素-6(IL-6)和D-二聚體(DD)在下肢深靜脈血栓形成(DVT)患者治療前后血清中的表達(dá)及意義。方法 選取DVT患者30例為DVT組，我院體檢的健康人30例為正常對(duì)照組。檢測(cè)DVT組患者治療前后及正常對(duì)照組血清CRP、IL-6及DD的濃度，測(cè)量DVT組患者治療前后健、患肢周徑差。結(jié)果 治療前DVT組CRP，IL-6和DD的血清濃度均顯著高于正常對(duì)照組(P<0.05)。隨著治療時(shí)間的延長(zhǎng)，CRP，IL-6的濃度逐漸降低，患、健肢體周徑差顯著減少。治療3d后，CRP和IL-6的濃度與治療前相比顯著降低(P<0.05)。而DD的濃度與治療前相比顯著升高(P<0.05)。治療7d后與治療3 d相比，CRP和IL-6的濃度進(jìn)一步降低，DD的濃度也出現(xiàn)下降趨勢(shì)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論 急性炎性反應(yīng)因子可能在下肢DVT的形成中起重要作用，聯(lián)合動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)CRP，IL-6和DD的濃度對(duì)于DVT的診斷、病程進(jìn)展和預(yù)后判斷有重要的臨床實(shí)用價(jià)值。

C-反應(yīng)蛋白；白介素-6；D-二聚體；下肢深靜脈血栓

(ChinJLabDiagn,2017,21:0063)

下肢深靜脈血栓(DVT)在我國(guó)具有較高的發(fā)生率，早期血栓脫落形成的肺血栓栓塞癥(PTE)占人類(lèi)死亡原因的第3位[1]，危及患者生命。后期的深靜脈血栓形成后綜合癥(PTS)又嚴(yán)重的影響著患者的生活質(zhì)量。近年來(lái)認(rèn)為，炎癥反應(yīng)參與DVT的發(fā)生與發(fā)展[2]，炎癥因子是一類(lèi)生物活性多肽，它既是信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子又是效應(yīng)分子[3]。炎癥介質(zhì)不僅可直接損傷內(nèi)皮細(xì)胞，還能誘導(dǎo)凝血系統(tǒng)表達(dá)炎癥因子，擴(kuò)大炎癥反應(yīng)和促進(jìn)凝血過(guò)程，在凝血、抗凝、纖溶系統(tǒng)起重要作用。而當(dāng)機(jī)體處于纖溶功能亢進(jìn)或高凝狀態(tài)時(shí)，又可引起D-二聚體的特異性升高。因此，本研究通過(guò)檢測(cè)急性DVT患者治療前后血清中CRP、IL-6和DD表達(dá)水平的變化，探討其在急性下肢DVT中的作用及價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2013年1月-2014年1月在承德醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院血管外科就診的DVT患者30例為DVT組。其中，左下肢19例，右下肢11例。發(fā)病時(shí)間≤7 d，所有患者無(wú)溶栓、抗凝治療禁忌癥。治療前患肢均存在肌肉張力較高、腫脹等臨床表現(xiàn)。入院后均經(jīng)彩色多普勒超聲或靜脈造影檢查，證實(shí)為單側(cè)下肢深靜脈血栓形成。包括：中央型4例，周?chē)?0例，混合型16例。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)發(fā)病時(shí)間>7 d；(2)有肝腎功能障礙或其他臟器功能障礙者；(3)有心腦血管疾病者；(4)有系統(tǒng)性紅斑狼瘡、骨髓增生性疾病、惡性腫瘤者；(5)近期口服避孕藥者、炎癥、創(chuàng)傷者。選取在承德醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院體檢的健康人30例作為正常對(duì)照組，兩組一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見(jiàn)表1。

表1 兩組一般資料比較

1.2 標(biāo)本采集與檢測(cè)

分別采用速率比濁法(西門(mén)子BNⅡ特種蛋白分析儀)檢測(cè)血漿CRP濃度；酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)IL-6濃度；免疫比濁法(sysmex CA-8000全自動(dòng)型凝血分析儀)檢測(cè)血漿DD濃度。

1.3 健、患肢周徑測(cè)量

在檢測(cè)CRP、IL-6、DD濃度的同時(shí)，對(duì)DVT組患者健、患肢(膝上)15 cm和(膝下)10 cm處周徑進(jìn)行測(cè)量，記錄健、患側(cè)肢體周徑差。正常人雙側(cè)肢體周徑差<2 cm[4]。

1.4 治療方法

DVT組30例患者均采用經(jīng)患側(cè)肢體足背淺靜脈穿刺法溶栓治療，尿激酶(30-60)×104U/d。尿激酶總量為300×104U，監(jiān)測(cè)凝血時(shí)間，纖維蛋白原<1 g/L者停藥。同時(shí)應(yīng)用低分子量肝素4 100 U皮下注射q12h及口服華法林進(jìn)行重疊抗凝治療，控制(PT)較正常參照值延長(zhǎng)1.5-2.5倍，國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化比值(INR)在2-3之間。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 DVT組患者治療前后血清CRP、IL-6、DD濃度檢測(cè)結(jié)果

DVT組30例患者治療前血清CRP、IL-6和DD的濃度水平與正常對(duì)照組比較，差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，治療前各因子的表達(dá)水平均顯著高于正常對(duì)照組。經(jīng)過(guò)治療3 d后，DVT組CRP和IL-6的濃度水平比治療前明顯降低(P<0.05)，但仍顯著高于對(duì)照組濃度水平(P<0.05)。而DD的濃度與治療前相比顯著升高(P<0.05)。治療7 d后，CRP和IL-6的濃度進(jìn)一步降低，DD的濃度也出現(xiàn)下降趨勢(shì)。與治療3 d后相比，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表2。

表2 兩組血清CRP、IL-6、D-Dimer濃度變化情況比較

注：1)與對(duì)照組比較，*P<0.05；2)與同組治療前比較，ΔP<0.05；3)與同組治療3 d后比較，▲P<0.05；

2.2 DVT組患者治療前、治療后3 d及7 d健、患肢周徑差比較

治療后，DVT患者肢體腫脹程度均明顯減輕。治療3、7 d后患者健、患肢周徑差與治療前比較顯著減小，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，治療7 d后患者健、患肢周徑差與治療3 d后比較進(jìn)一步顯著減小，肢體腫脹減輕明顯，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見(jiàn)表3。

表3 DVT組患者治療前后雙下肢周徑差比較

注：1)與治療前比較，*P<0.05；2)與同組治療3 d后比較，ΔP<0.05

3 討論

下肢深靜脈血栓是臨床常見(jiàn)病，主要是由于各種原因?qū)е卵涸谘苤杏贉o脈壁損傷和血液的高凝狀態(tài)。嚴(yán)重影響患者正常工作和生活。近年來(lái)，下肢DVT與炎性因子之間的關(guān)系逐漸成為研究的熱點(diǎn)之一。研究結(jié)果表明[5]：血栓形成與炎癥之間應(yīng)存在著網(wǎng)絡(luò)關(guān)系，血栓形成中的產(chǎn)物可引起炎癥反應(yīng)，同時(shí)炎癥反應(yīng)又促進(jìn)高凝狀態(tài)的形成。炎性因子被認(rèn)為在深靜脈血栓的形成中起到關(guān)鍵性作用。而D-二聚體等則成為了深靜脈血栓性疾病的敏感指標(biāo)，能夠有效的提高臨床診斷率[6]。

CRP作為一種炎癥反應(yīng)蛋白，其血清水平檢測(cè)的升高可以反映機(jī)體的炎癥反應(yīng)機(jī)制激活。研究表明[7]，在下肢DVT患者中，其血清水平的升高可啟動(dòng)機(jī)體凝血瀑布反應(yīng)，并通過(guò)激活補(bǔ)體，啟動(dòng)外源性凝血途徑，加速血栓的形成[8]。本研究結(jié)果顯示，在下肢DVT患者中，CRP濃度明顯高于正常對(duì)照組，這提示，CRP對(duì)血栓的形成起到了促進(jìn)作用，并可能參與了DVT發(fā)生的整個(gè)過(guò)程。并且CRP的濃度隨著抗凝、溶栓等治療呈逐步降低趨勢(shì)，這可能表明是血栓由急性期轉(zhuǎn)為慢性期的一種變化。因此，血清CRP水平的升高和炎癥反應(yīng)可能只是機(jī)體血栓形成的一種表現(xiàn)和結(jié)果，而并非其發(fā)生的原因。但CRP在多種病理生理狀態(tài)下均可增高，因此尚不能用于與其他炎癥性疾病的鑒別，CRP升高不能單獨(dú)用于下肢DVT的診斷，但在監(jiān)測(cè)病程發(fā)展上存在意義，有報(bào)道，CRP持續(xù)升高提示血栓后遠(yuǎn)期發(fā)生PTS的幾率較高[9]。

血栓能刺激炎癥因子高表達(dá)，并激活多種炎癥途徑，其中包括IL-6。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)[10]證實(shí)：IL-6的機(jī)體峰值檢測(cè)濃度常出現(xiàn)在DVT形成的2d后階段，并且與血栓形成的范圍大小有著密切關(guān)系。IL-6是細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)中的一種重要促炎癥性細(xì)胞因子。主要通過(guò)激活內(nèi)皮細(xì)胞，誘導(dǎo)高凝狀態(tài)增加血栓性疾病發(fā)生的機(jī)會(huì)。IL-6還可以誘導(dǎo)肝臟產(chǎn)生CRP和FIB，促進(jìn)血栓形成。本研究顯示DVT組治療前IL-6的血清濃度均顯著高于對(duì)照組，在血栓得到相應(yīng)的控制后，其血清濃度水平明顯下降，這表明IL-6不僅可作為DVT發(fā)生的結(jié)果存在，同時(shí)，其在DVT病程的發(fā)展中可能亦起著重要作用。另有研究[11]顯示：對(duì)DVT急性期進(jìn)行持續(xù)的IL-6血漿水平監(jiān)測(cè)，可能成為患者是否發(fā)生PTS的預(yù)測(cè)標(biāo)志物。同時(shí)，本研究中，DVT組患者治療前后的健、患肢周徑差變化趨勢(shì)與CRP和IL-6的變化趨勢(shì)存在著一致性，同時(shí)，患者的臨床癥狀隨著CRP和IL-6濃度的降低，亦能得到相應(yīng)改善，三者之間可能存在相關(guān)性。

D-二聚體是纖維蛋白降解最終產(chǎn)物之一，作為篩查深靜脈血栓形成的重要的手段之一，具有較高的敏感性，準(zhǔn)確率達(dá)到95%以上。本研究結(jié)果顯示 急性下肢DVT患者血漿中，DD的含量明顯高于正常對(duì)照組，這說(shuō)明DVT患者血液纖維蛋白溶解亢進(jìn)，處于一種高凝的狀態(tài)。而治療3 d后，由于溶栓藥物可以使交聯(lián)纖維蛋白的降解速度增加，導(dǎo)致血漿中DD的含量明顯升高，并逐步達(dá)到峰值。在治療7 d后，其含量又逐漸下降至治療前的濃度水平，但其濃度水平與正常人比較仍存在顯著差異，這說(shuō)明機(jī)體的血液仍存在高凝狀態(tài)，血栓仍易形成。因此，通過(guò)對(duì)DD血清表達(dá)水平的監(jiān)測(cè)，對(duì)于臨床DVT診斷、篩選、療效觀察和預(yù)后判斷有重要意義[12]。

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The Variation and Significance of C-reactive Protein,Interleukin-6 and D-Dimer in the Pre-therapy and Post-treatment Period of the Deep Venous Thrombosis

DINGMeng,ZHANGQing-yun,JINGYang,etal.

(TheLaboratorydepartment,AffiliatedHospitalofChengdeMedicalCollege,Hebei,Chengde067000,China)

Objective To analyse the variation of C-reactive Protein，Interleukin-6 and D-Dimer in the Pre-therapy and Post-treatment Period of the DVT,to explore the significance of the three indexes．Methods 30 patients documented with acute phase of lower limb DVT(DVT group)and 30 healthy individuals( normal control group) were included in this study,The plasma level of CRP,IL-6 and D-Dimer in both groups and the difference of perimeters between the lower limbs before and 3,7 days after the treatment in DVT group were recorded.Results The plasma level of CRP,IL-6 and DD of DVT group before the treatment were statistically higher than those of normal control group(P<0.05).The plasma level of CRP,IL-6 and the difference of perimeters between the lower limbs statistically reduced after the treatment.The plasma level of CRP and IL-6 decreased vitally than before after the treatment 3,7 days(P<0.05),but the level of DD increased than before after the treatment 3 days(P<0.05),then it began to reduced also.After the treatment 7 days,the level of the three indexes were all statistically lower than the treatment 3 days(P<0.05).Conclusion Inflammatory factors possibly play an important role in acute phase of DVT.There was a crucial clinical value to combine detect the CRP,IL-6 and DD levels of serum in patients with acute DVT in its early diagnosis,occurrence,development and prognosis.

C-reactive Protein;Interleukin-6;D-Dimer;Deep venous thrombosis

1007-4287(2017)01-0063-03

R654.4

A

2015-12-16)

*通訊作者