Ⅰ型禽腺病毒在我國雞群中的流行情況和防控措施

李敏 馬玉峰/金宇保靈生物藥品有限公司

楊振/揚州優邦生物藥品有限公司

Ⅰ型禽腺病毒在我國雞群中的流行情況和防控措施

李敏 馬玉峰/金宇保靈生物藥品有限公司

楊振/揚州優邦生物藥品有限公司

腺病毒是全世界家禽和野禽常見的傳染病原。許多腺病毒可在健康禽體內復制，癥狀非常輕微或不表現感染癥狀，但有一些因素，特別是并發感染時，腺病毒可成為條件性病原。根據血清學關系，禽腺病毒可以分為12個血清型 (FAdV 1-12)。而國際病毒分類委員會（ICTV）將禽腺病毒的12個血清型分為5個亞群(FAdV A-E)。I群禽腺病毒在中國雞群中發病率非常之高，且呈逐年上升趨勢，且在水禽中也有發病的報道。主要造成雞群的包涵體肝炎和心包積液兩種臨床類型，給養雞企業造成較大的經濟損失。筆者通過對流行地區腺病毒的跟蹤監測和對病毒的分離鑒定，以了解I型禽腺病毒在我國的流行特點和現狀，同時對該病的防控提供一定的措施。

一、I群禽腺病毒的流行特點

根據筆者統計，目前在全國多個地區均有該病毒的發生（表1），該病可感染1～6周齡任何品種雞。發病日病程短的4～8 d逐漸恢復，一般7～10 d，也可以持續2～3周甚至更長的時間。發病雞群死亡高峰多持續期4～8 d，病程8～15 d，死亡率10%～60%不等。禽腺病毒可引起包括包涵體肝炎 (IBH) 、安卡拉病/肝炎和心包積液綜合征 (HHS) 、以及肌胃糜爛或潰瘍(GEU)。目前我們檢測發現兩種常見癥狀：包涵體肝炎(IBH)和安卡拉病/肝炎和心包積液綜合征 (HHS)。

雞心包積液肝炎綜合征病可以感染2～7周齡雞（白羽、黃羽、蛋雞、817肉雞）。蛋雞從30日齡起至產蛋高峰期均可發病。該病2014開始在我國多地區呈普發態勢，已經成為一種嚴重危害養禽業發展的傳染病。致病病原已經確定為Ⅰ群4血清型腺病毒（基因型C）。病雞出現精神沉郁，食欲減退或廢絕，翅膀下垂，羽毛蓬亂，曲腿蹲立、伏臥不起，雞冠和肉髯發白癥狀，臨死前鳴叫、撲騰、掙扎，并出現角弓反張等神經癥狀。解剖可見肝臟出血、心包積液，腎臟腫大壞死，肺充血水腫，胸腺充血腫大等癥狀（圖1）。據報道，病毒在健康雞群和發病雞群普遍存在，條件致病。多與其它病毒混合感染，如CAV，IBDV等。

包涵體肝炎發病率不高，目前在白羽肉雞零星發生。7 d～20W雞均可發生， 3～7W多發，主要發生于雛雞，病雛生長受阻、羽毛蓬亂、蹲伏。多于48 h內死亡或逐漸康復。雞群發病后會突現3～5 d的死亡高峰。死亡率低，可能至10%，個別可達30%。有時病程也可持續2～3w。解剖可見肝腫大，邊緣鈍厚，表面有大小不等出血點、條、斑，黃白色點狀、斑狀壞死灶，色澤變淡。腎臟腫大，胸腺充血，也可見少量心包積液（圖2）。

表1 不同地區發生禽腺病毒類型統計

圖1 心包積水肝炎綜合征病雞解剖癥狀

禽腺病毒可以垂直傳播和水平傳播。腺病毒通過孵化的蛋垂直傳播，雛雞1日齡就可能分離到病毒，但正常情況下3周齡后開始排毒，4～6周齡排毒高峰。蛋雞轉群時排毒量最大在5～9周齡，但在14周后仍可排泄70%，在一只雞上經常可分離到2～3個血清型的病毒。當腺病毒常在時，約在產蛋高峰前后有兩次排毒期，大概由于高峰產蛋作為一種應激或高水平激素引起病毒活化，這可通過種蛋最大限度的傳給下一代。

病毒還可在糞便、氣管、鼻粘膜以及腎臟中存在，因此病毒可通過各種排泄物水平傳播傳播，其中糞便中病毒的滴度最高。主要是通過接觸帶毒的糞便傳播本病，水平傳播速度比較緩慢。

圖2 包涵體肝炎病雞解剖癥狀

二、實驗室診斷

（一）病毒分離培養

分別取心包積液肝炎綜合征和包涵體肝炎癥狀的病死雞的肝臟研磨，反復冷凍3次，高速離心，取上清液，通過絨毛尿囊膜途徑接種7日齡SPF雞胚，37℃培養觀察5～8 d，雞胚死亡，剖檢可見雞胚體發生明顯病變（圖3）。

圖3 病毒分離接種雞胚病變圖

（二）分子生物學檢測

1.目的基因的擴增。

從收集的樣品中，采用試劑盒提取DNA，使用設計的針對禽腺病毒Hexon基因的特異性引物，進行PCR檢測，1%瓊脂糖凝膠電泳，結果顯示樣品中均可以擴增出830bp左右的I型禽腺病毒Hexon基因目的性基因片段(圖4)。

圖4 禽腺病毒核酸電泳結果

2.目的基因測序分析。

對待檢樣品的PCR產物送金斯瑞生物技術有限公司進行基因測序分析，進化樹顯示，樣本中分離的禽腺病毒屬于兩個基因型(圖5)。

圖5 各分離株Hexon基因序列與參考基因序列進化樹分析

三、防治

加強雞場生物安全的控制是防治該病關鍵。經調查發現，發病雞群多數發生在養殖密度大的地區和飼養時間長的養殖場，這些雞場無有效的生物安全措施，環境污染嚴重。雞群應做好免疫抑制性疾病的防控，如法氏囊病、傳染性貧血、網狀內皮增生癥、霉菌毒素等誘因均可與腺病毒發生協同感染。建議從腺病毒檢測陰性的種雞場進雛雞。在活疫苗的選擇方面要慎重，避免使用污染其它病原的活疫苗，選用活疫苗一定要確保外源病毒包括禽腺病毒陰性。發病雞群無特效藥物，可增加營養以增強體質，添加適量抗生素防繼發感染。死亡率高的雞群可以注射特異性卵黃抗體或血清。

因本病目前無明確的致病機理，建議使用疫苗進行防控，使用發病地區分離的樣本做成滅活疫苗給健康雞群進行防控能達到90%以上保護。在肉雞上，7～9日齡和35日齡左右進行滅活疫苗的接種，蛋雞或者肉種雞在開產前進行疫苗接種，可很好控制本病的發生。

四、分析和討論

禽腺病毒發病原因較為復雜。如1987年在巴基斯坦的肉雞發生心包積液綜合征的原因是活疫苗污染。很多學者證實腺病毒在健康雞群中的感染和分離較為普遍，但與其它疾病混合感染時才會導致雞群發病，如感染了法氏囊病、傳染性貧血或飼喂了霉變飼料。雞群感染禽腺病毒目前還沒有有力證據證明該病的發病規律和原因，還需要在流行病學和病原檢測方面進一步努力。應對發病雞場和該病流行地區使用的活疫苗進行調查和檢測外源病毒，來確定是否與免疫活疫苗有關。

我國于1976年首先在臺灣省發生該病，隨后在遼寧省、山東省、內蒙古省、河南省、江蘇省、安徽省等地相繼發現禽腺病毒的流行，2014—2015年該病在國內呈普發態勢，已經成為一種嚴重危害養禽業發展的傳染病，逐漸被人們重視。尹燕博教授實驗室對2007—2015年我國部分地區疑似Ⅰ群腺病毒引起的雞包涵體肝炎的病料進行較為系統的病原診斷、PCR檢測、病理組織學檢查，診斷分離到60株雞包涵體肝炎病毒，多為Ⅰ群4亞型腺病毒，即引起禽心包積液綜合征的病毒。

我們在實驗室對收集的樣本進行檢測發現，在目前流行的禽腺病毒中存在兩種基因型的病毒，在分離株中從山東樣本中分離到兩種基因型的禽腺病毒，引起的病理變化也不一致，其中基因C型的病毒主要引起禽的心包積液綜合征；而基因型為E的病原主要引起禽的包涵體肝炎。這說明在我國禽場中存在的禽腺病毒成多樣性，給我們的防治帶來一定的挑戰，足夠引起我們的重視。在防控方面因本病目前無明確的致病機理，使用滅活疫苗進行防控，能給健康雞群進行防控能達到90%以上保護。同時再給雞群使用活苗時要注意活疫苗外源毒的檢測，避免活疫苗攜帶病原引起不必要的損失。

（略）