三個(gè)廠(chǎng)家豬瘟活疫苗免疫效果比較

鄭朝朝 劉濤 鄒立宏 劉云濤 柳珊 郁宏偉 朱秀同/瑞普（保定）生物藥業(yè)有限公司 河北省獸醫(yī)生物技術(shù)工程技術(shù)研究中心

三個(gè)廠(chǎng)家豬瘟活疫苗免疫效果比較

鄭朝朝 劉濤 鄒立宏 劉云濤 柳珊 郁宏偉 朱秀同/瑞普（保定）生物藥業(yè)有限公司 河北省獸醫(yī)生物技術(shù)工程技術(shù)研究中心

豬瘟是由豬瘟病毒（Classical Swine Fever Virus，CSFV）引起的一種高度接觸性熱性傳染病，有很高的傳染性和致死性，豬瘟無(wú)特效治療藥物，一旦發(fā)生便會(huì)對(duì)養(yǎng)殖場(chǎng)造成毀滅性的損失，最有效的防治方法就是疫苗的免疫接種。由于長(zhǎng)期貫徹預(yù)防為主的指導(dǎo)思想，堅(jiān)持廣泛接種豬瘟兔化弱毒疫苗的防治措施，該病在我國(guó)已經(jīng)得到有效控制，大規(guī)模的暴發(fā)流行基本停止。

目前，市場(chǎng)上豬瘟疫苗（傳代細(xì)胞源）應(yīng)用廣泛，養(yǎng)殖戶(hù)對(duì)不同廠(chǎng)家生產(chǎn)的豬瘟活疫苗使用效果評(píng)價(jià)不一，本研究中選擇了3個(gè)較大廠(chǎng)家的豬瘟活疫苗（傳代細(xì)胞源）進(jìn)行了比對(duì)試驗(yàn)，將試驗(yàn)結(jié)果作一分析總結(jié)如下。

一、實(shí)驗(yàn)材料

1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。豬瘟抗體陰性豬，20～26日齡，購(gòu)自保定市唐縣某豬場(chǎng)。

2.試劑盒。豬瘟抗體檢測(cè)試劑盒，購(gòu)自北京愛(ài)得仕元亨試劑公司。

3.豬瘟活疫苗。A廠(chǎng)豬瘟活疫苗（20頭份），2015084批；B廠(chǎng)豬瘟活疫苗（20頭份），20151023批；C廠(chǎng)豬瘟活疫苗（50頭份），150707-1批。

4.實(shí)驗(yàn)器材。注射器，移液器等。

二、實(shí)驗(yàn)方法

選購(gòu)20～26日齡豬瘟抗體陰性健康仔豬，稱(chēng)重后均分為5組，每組5頭。

檢測(cè)各廠(chǎng)家豬瘟活疫苗病毒含量，并將各廠(chǎng)家疫苗用其專(zhuān)用稀釋液稀釋?zhuān)♂尯笠呙缑款^仔豬注射1頭份。同時(shí)設(shè)置A廠(chǎng)豬瘟活疫苗+B廠(chǎng)稀釋液組及免疫陰性組做為對(duì)照。分別于免后2周、3周、4周、5周采血檢測(cè)抗體阻斷率。

具體分組見(jiàn)表1：

表1 豬瘟活疫苗免疫效果實(shí)驗(yàn)分組

三、結(jié)果

1.病毒含量檢測(cè)。各廠(chǎng)家豬瘟活疫苗病毒含量檢測(cè)結(jié)果顯示，3個(gè)廠(chǎng)家疫苗1.5萬(wàn)RID/頭份均合格，僅B廠(chǎng)豬瘟活疫苗3萬(wàn)RID/頭份合格，如表2所示：

表2 各廠(chǎng)家疫苗病毒含量檢測(cè)結(jié)果

2.免疫效果。免疫后2～5周實(shí)驗(yàn)組各組抗體阻斷率呈增長(zhǎng)趨勢(shì)，免后4周達(dá)到40%左右，免疫后5周各組抗體阻斷率均高于40%，對(duì)照組抗體阻斷率呈負(fù)數(shù)。具體數(shù)值如表3：

表3 免疫前、免疫后2～5周抗體阻斷率

免疫后2～5周實(shí)驗(yàn)組各組平均抗體阻斷率均呈上升趨勢(shì)，3～5周呈直線(xiàn)增長(zhǎng)趨勢(shì)。免疫后4周A、B、D三組平均抗體阻斷率達(dá)到40%以上。免疫后五周A、B、C、D四組平均抗體阻斷率均達(dá)到40%以上。如表4，圖1。

對(duì)各實(shí)驗(yàn)組每周抗體合格率（抗體阻斷率≥40%視為合格）進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)：A、B、D三組在免疫后第4周抗體合格率為60%，C組合格率為20%，免疫后五周A、B、 C、D四組合格率達(dá)到100%。

表4 免疫后2～5周各組平均抗體阻斷率

圖1 免疫后2～5周各組平均抗體阻斷率趨勢(shì)圖

表5 2-5周抗體合格率統(tǒng)計(jì)

四、討論

用《規(guī)程》規(guī)定的方法對(duì)3個(gè)廠(chǎng)家生產(chǎn)的豬瘟活疫苗進(jìn)行病毒含量檢測(cè)，結(jié)果顯示3個(gè)廠(chǎng)家的豬瘟活疫苗1.5萬(wàn)RID/頭份合格，僅B廠(chǎng)豬瘟活疫苗3萬(wàn)RID/頭份合格，其余兩家不合格。此三個(gè)廠(chǎng)家為國(guó)內(nèi)生產(chǎn)豬瘟疫苗的較大廠(chǎng)家，產(chǎn)品質(zhì)量較為穩(wěn)定，代表著國(guó)內(nèi)豬瘟活疫苗病毒含量水平，即抗原含量1.5～3萬(wàn)RID/ml。

用IDEXX豬瘟抗體檢測(cè)試劑盒檢測(cè)免疫豬免前、免后2～5周血清抗體阻斷率，結(jié)果顯示抗體阻斷率在-29.03%～74.11%之間。按照該試劑盒的使用說(shuō)明抗體阻斷率≥40%判為抗體陽(yáng)性，抗體阻斷率＜40%判為抗體陰性。在進(jìn)行阻斷率檢測(cè)時(shí)，每次檢測(cè)血清為采血當(dāng)天檢測(cè)，多次檢測(cè)結(jié)果均出現(xiàn)負(fù)值，可能是試劑盒本身對(duì)照值偏高所致。

各廠(chǎng)家豬瘟疫苗免疫后抗體阻斷率呈明顯上升趨勢(shì)。免疫后4周，免疫組A、B、C、D各組平均抗體阻斷率35.40%～44.30%，A、B、D三組豬瘟抗體合格率達(dá)到60%，C組僅為20%。免疫后5周，A、B、C、D四組豬瘟抗體合格率均達(dá)到100%。表明三個(gè)廠(chǎng)家的豬瘟活疫苗均可達(dá)到預(yù)防豬瘟的免疫效果，只是抗體轉(zhuǎn)陽(yáng)時(shí)間稍有不同。

上述實(shí)驗(yàn)中，D組為A廠(chǎng)豬瘟活疫苗+B廠(chǎng)稀釋液，免疫效果與A組和B組相比沒(méi)有明顯的差別。表明B廠(chǎng)稀釋液并沒(méi)有達(dá)到其所宣傳的增強(qiáng)免疫效果的作用。

上述實(shí)驗(yàn)中，B廠(chǎng)豬瘟活疫苗為三種疫苗中病毒含量最高的，但在免疫效果上并沒(méi)有明顯的優(yōu)勢(shì)，因此對(duì)于豬瘟抗體陰性豬（無(wú)母源抗體），活疫苗病毒含量達(dá)到1.5萬(wàn)RID/頭份即可達(dá)到免疫效果。而對(duì)于有母源抗體的仔豬，加大免疫劑量是否有助于突破母源抗體、較快提升抗體水平有待進(jìn)一步驗(yàn)證。

（略）

河北省科技計(jì)劃項(xiàng)目（16226609D）