雞場球蟲病調查

楊立 陳海婷 姚小青 陳國平/江蘇省常州市金壇區金城獸醫站

雞場球蟲病調查

楊立 陳海婷 姚小青 陳國平/江蘇省常州市金壇區金城獸醫站

雞球蟲病是一種主要由艾美耳屬球蟲引起的呈世界性分布、嚴重危害養雞生產的主要雞病之一。目前已被美國農業部列為對禽類危害最嚴重的五大疾病之一。在各種雞病中，球蟲病的發生率最高，占1/6～1/5，常呈暴發性流行。它對養雞生產的危害十分嚴重，15～50日齡的雛雞發病率最高，死亡率可高達80%。球蟲病流行的雞群生長嚴重滯后，而且會誘發其他疾病，如大腸桿菌病、支原體病等。成年雞多為帶蟲者，增重和產蛋受到一定影響。耐過的病雞，長期不得康復，生長發育受到嚴重的影響。一些感染雞群不產生明顯的臨床型球蟲病，造成的隱性感染所帶來的損失可能更大。據統計，我國每年用于防治雞球蟲病的藥費達數億元人民幣，占雞病全部防治費用的近三分之一，而全球養禽業每年因為球蟲病造成的損失高達數十億美元。

一、材料與方法

（一）糞樣采集

筆者以群體采樣法，在常州某畜禽有限公司5個養雞場不同的點采集糞便(四周和中央共五點)，每個糞樣重100～200 g，共采集5個雞群5個糞樣，按時間分兩次采樣，總計10個樣品。第1次采樣雞群日齡20～30 d，雞群大小1～2萬只，共7.7萬只雞；第2次采樣雞群日齡40～50 d，雞群大小1～2萬只，共7.7萬只雞。

（二）卵囊計數

每個樣品取2 g糞便，加入10 ml水攪拌均勻，再加入50 ml飽和鹽水，過濾至小試管中，滴一滴至麥克馬斯特氏計數板，顯微鏡下觀察每克糞便中球蟲數量。

（三）卵囊分離與培養

將糞樣分別置于干凈的小燒杯中，再加入適量的清水攪拌均勻，分別經60目銅絲篩和260目尼龍篩過濾，倒去糞渣，將濾液按照水洗沉淀法反復洗滌，傾去上清得到沉淀。沉淀中加入等量的3%～5%重鉻酸鉀，放入29℃的恒溫箱中培養，經常晃動，使有充分的氧氣孢子化，培養3～5 d使之孢子化。

（四）初次種類鑒定

取其培養后的卵囊（內含重鉻酸鉀）加入離心管中，在2 000 rpm下離心10 min，使卵囊沉淀，傾棄全部重鉻酸鉀溶液，再加清水重新離心一次（時間和轉速與上同），傾棄全部上清液得沉渣，加飽和食鹽水入離心管中近滿，攪動管底的沉渣，靜置3～5 min后，再在2000 rpm下離心5 min，沉渣中卵囊即漂浮至液面，再向離心管中加飽和食鹽水至管內液面稍凸起，蓋上蓋玻片，立即取下以濕面蓋在載玻片上，在10×10或10×40的鏡下詳細觀察每種球蟲卵囊的形態結構特征，測量卵囊大小，并用JVC顯微攝影機及顯微細胞圖象處理系統軟件拍攝卵囊圖片。

（五）回歸動物試驗

1.實驗動物。1日齡健康出殼的蘇禽黃羽肉雞，在無球蟲環境中飼養，其飼料和飲水中也無球蟲污染且無抗球蟲藥。飼養到20日齡時，進行卵囊接種試驗。

2.卵囊接種。收集的卵囊經培養孢子化后，以每個雞場2次采樣的卵囊為一組，混合接種20日齡的黃羽雛雞6只。

3.糞檢卵囊。接種90 h時收集糞便，檢查是否有卵囊，此時檢測出來的卵囊為早熟艾美耳球蟲。接種96 h收集糞便，檢查是否有卵囊，此時檢測出來的卵囊為和緩艾美耳球蟲。接種109 h收集糞便，檢查是否有卵囊，此時檢測出來的卵囊為堆型艾美耳球蟲或和緩艾美耳球蟲。

4.腸道黏膜分段檢查。在120 h與144 h分別剖殺，觀察病變、蟲體寄生部位與特征并拍照。剖殺時每只雞取其腸道，按不同的腸段分離后，各置于小燒杯中，加入適量水剖開腸道，腸內容物及腸道黏膜稍研磨后經銅篩漏斗過濾，濾液靜置1 h～2 h后傾去上清夜，沉渣中加入等量的3%～5%重鉻酸鉀，放入29℃的恒溫箱中培養，經常晃動，使有充分的氧氣孢子化，并視情況滴加2.5%重鉻酸鉀防止干涸，培養3～5 d后待檢。

二、結果

（一）雞場感染球蟲的克糞卵囊數

雞場感染球蟲的克糞卵囊數（o.p.g）見表1，可見5個雞場在前后兩次的克糞卵囊數變化不盡一致，其中楊某、張某和顧某的雞場的克糞卵囊數降低，袁某的雞場的克糞卵囊數增加，王某的雞場卵囊數變化不大。

表1 雞場感染球蟲的克糞卵囊數（o.p.g）

（二）結果

1.球蟲種類。經觀察鑒定和回歸動物試驗后驗證，該公司部分雞場流行的雞球蟲種類有：柔嫩艾美耳球蟲、毒害艾美耳球蟲、堆型艾美耳球蟲、巨型艾美耳球蟲、和緩艾美耳球蟲、早熟艾美耳球蟲和布氏艾美耳球蟲。

2.感染率。經統計分析，柔嫩艾美耳球蟲、堆型艾美耳球蟲、巨型艾美耳球蟲與和緩艾美耳球蟲的感染率分別為100%，毒害艾美耳球蟲的感染率20%，布氏艾美耳球蟲的感染率20%，早熟艾美耳球蟲的感染率20%。柔嫩艾美耳球蟲、堆型艾美耳球蟲、巨型艾美耳球蟲與和緩艾美耳球蟲為優勢種。

三、分析與討論

本次調查采用觀察卵囊形態特征與回歸動物試驗后腸道病變相結合的方法，對該公司部分雞場進行了種類調查，根據結果分析其原因：在不了解雞場流行球蟲種類的情況下該公司雞場在雛雞4日齡時免疫雞球蟲疫苗（五聯苗），引進了本來沒有的球蟲株；球蟲藥物的濫用，導致球蟲耐藥性的產生，使得球蟲對藥物的敏感性降低，最終導致球蟲的暴發。