右美托咪定對糖尿病大鼠體液免疫及補體的影響

童希忠 陳 勇 郎海麗 胡小蘭 余樹春 胡衍輝 徐國海

(南昌大學第二附屬醫院麻醉科，江西 南昌 330006)

右美托咪定對糖尿病大鼠體液免疫及補體的影響

童希忠1陳 勇 郎海麗 胡小蘭 余樹春 胡衍輝 徐國海

(南昌大學第二附屬醫院麻醉科，江西 南昌 330006)

目的 評價右美托咪定對糖尿病大鼠體液免疫及補體的影響。方法 健康成年雄性SD大鼠72只，體重300～350 g，采用隨機數字表法，將其隨機分為3組(n=24)：對照組(C組)、糖尿病組(DM組)和右美托咪定+糖尿病組(DEX組)。DM組和DEX組以鏈脲佐菌素(STZ)60 mg/kg一次性腹腔注射建立糖尿病大鼠模型，于模型穩定后4 w時3組大鼠均實施剖腹探查術，手術時間30 min。DEX組于手術開始前經10 min靜脈輸注右美托咪定負荷劑量1 μg/kg，隨后以5 μg·kg-1·h-1(容量1 ml/h)的速率維持4 h，C組和DM組給予等容量生理鹽水。分別于術前(T0)、術畢(T1)、術后24 h(T2)和72 h(T3)時每組隨機取6只大鼠采集血樣，測定血糖，并采用ELISA法檢測血清IgG、IgA及IgM和補體CH50、C3及C4濃度；分別于T0～T3時采血結束后處死大鼠，處死前稱重，解剖分離脾臟組織稱重，計算脾臟指數。結果 與C組比較，DM組和DEX組T0～T3時血清IgG、IgM濃度及脾臟指數降低，IgA、CH50、C3及C4濃度升高(P<0.05)；與DM組比較，DEX組T1～T3時血清IgG、IgM濃度及脾臟指數升高，IgA、CH50、C3及C4濃度降低(P<0.05)。結論 右美托咪定可改善糖尿病大鼠圍術期體液免疫及補體功能。

右美托咪定；糖尿病；免疫球蛋白；補體

糖尿病(DM)是一種以血糖升高為特征的常見慢性病〔1〕，研究表明，DM患者易出現多種免疫功能的異常，手術創傷、麻醉以及術后疼痛等均可抑制DM患者圍術期機體免疫功能，增加患者術后感染及其他并發癥發生的可能〔2，3〕，因此，有效地防治DM患者圍術期免疫功能抑制對于促進其預后具有重要意義。右美托咪定是一種高效高選擇性作用于外周和中樞α2腎上腺素能受體激動劑，具有鎮靜、鎮痛、抗焦慮和抗交感等多種效應，且無呼吸抑制作用，主要用于ICU患者的鎮靜以及麻醉時的輔助鎮靜〔4〕。研究發現，右美托咪定可改善腫瘤患者圍術期細胞免疫功能〔5〕，減輕DM患者圍術期糖代謝紊亂〔6〕，但其對DM患者圍術期體液免疫功能及補體功能的影響尚未見報道。因此，本研究擬評價右美托咪定對DM大鼠圍術期體液免疫及補體的影響。

1 材料與方法

1.1 動物及分組 健康成年雄性SD大鼠72只(南昌大學實驗動物科學部提供)，體重300～350 g，采用隨機數字表法，將其隨機分為3組(n=24)：對照組(C組)、糖尿病組(DM組)和右美托咪定+糖尿病組(DEX組)。

1.2 DM模型制備 DM組和DEX組參照文獻〔7〕介紹的方法建立大鼠DM模型，一次性腹腔注射1%鏈脲佐菌素-檸檬酸鹽緩沖液60 mg/kg，2 d后經尾靜脈抽血測空腹血糖(FPG)，≥16.7 mmol/L，并出現多飲、多食、多尿等癥狀即為大鼠模型制備成功。

1.3 實驗方法 DM模型穩定后4 w時三組大鼠均實施剖腹探查術，腹腔注射戊巴比妥鈉40 mg/kg麻醉下，于腹部正中切口開腹，行剖腹探查術，維持手術時間30 min。術畢傷口涂抹青霉素粉末預防感染，縫合切口。大鼠蘇醒后單獨飼養。DEX組于手術開始前經10 min靜脈輸注右美托咪定負荷劑量1 μg/kg，隨后以5 μg·kg-1·h-1(容量1 ml/h)的速率維持4 h，C組和DM組給予等容量生理鹽水。

1.4 觀察指標 分別于術前(T0)、術畢(T1)、術后24 h(T2)、72 h(T3)時每組隨機取6只大鼠采集血樣，測定血糖，并采用ELISA法檢測血清IgG、IgA及IgM和補體CH50、C3及C4濃度；分別于T0～T3時采血結束后處死大鼠，處死前稱重，解剖分離脾臟組織稱重，計算脾臟指數。

1.5 統計學方法 采用SPSS19.0軟件進行單因素方差分析及LSD-t檢驗。

2 結 果

2.1 各組大鼠FPG水平比較 與C組比較，DM組和DEX組T0～T3時FPG升高(P<0.05)；與D組比較，DEX組T1～T3時FPG下降(P<0.05)，T0時無統計學差異(P>0.05)，見表1。

表1 三組大鼠圍術期FPG水平比較

與C組比較：1)P<0.05；與DM組比較：2)P<0.05，下表同

2.2 各組大鼠體液免疫及補體變化 與C組比較，DM組和DEX組T0～T3時血清IgG、IgM濃度及脾臟指數降低，IgA、CH50、C3及C4濃度升高(P<0.05)；與DM組比較，DEX組T1～T3時血清IgG、IgM濃度及脾臟指數升高，IgA、CH50、C3及C4濃度降低(P<0.05)，見表2。

表2 三組大鼠圍術期體液免疫、補體及脾臟 指數比較

3 討 論

體液免疫中的抗體IgG、IgA和IgM是機體抗感染的重要組成部分，由漿細胞合成和分泌，存在于機體的血液、體液、外分泌液及部分細胞的細胞膜上，是反映機體體液免疫狀態的關鍵指標〔7〕。研究證實，DM患者免疫球蛋白含量的改變與DM的發生發展程度密切關聯，也與機體免疫功能及DM并發癥的發生密切相關〔8〕。本研究結果表明，DM大鼠自身體液免疫功能下降，手術創傷后體液免疫功能進一步下降，而右美托咪定可改善DM大鼠圍術期體液免疫功能。

補體系統作為炎性反應的重要組成部分日益受到重視，是由多種糖蛋白組成的蛋白酶解系統，在機體抗感染、免疫調節和免疫監視中發揮重要作用，特定情況下也可導致組織損傷。在臨床上同時測定總補體活性(CH50)及補體成分C3及C4可以反映補體功能〔9〕。補體成分廣泛沉積于DM患者的血管病變組織中，其水平的高低與組織病變的嚴重程度相關〔10〕，提示補體活化參與DM血管病變的發生。另有研究發現，2型糖尿病患者和糖耐量減低者補體C3水平升高〔11〕。本研究結果表明，DM可誘發大鼠補體功能異常，右美托咪定可有效抑制DM大鼠血清補體CH50、C3及C4水平的升高，從而改善DM大鼠圍術期補體功能。付作文等〔12〕研究發現，右美托咪定可有效抑制患者圍術期血清C3、C4的升高，與本研究結果一致。

脾臟指數是脾臟免疫功能的主要指標，其數值高低的變化在一定程度上可反映機體的免疫調節功能作用。本研究結果表明，右美托咪定可改善DM大鼠脾臟功能，提高大鼠體液免疫功能。免疫力下降是DM的顯著特征，然而，導致機體免疫功能改變的機制尚不清楚，有學者認為是由于高血糖所致〔13〕。高血糖可導致紅細胞膜代謝改變，影響紅細胞的免疫功能；體內蛋白質的糖基化可導致免疫球蛋白功能低下；高血糖還可延緩淋巴細胞分裂。本研究結果提示右美托咪定可降低DM大鼠圍術期血糖水平。高項羽等〔6〕的研究與本研究結果一致，其發現右美托咪定可抑制DM患者術中應激反應，改善圍術期糖代謝紊亂，促進DM患者術后恢復。

1 徐 鍵，李樹云，瞿 秋，等.慢性阻塞性肺疾病合并2型糖尿病患者肺功能的改變〔J〕.中國老年學雜志，2013；33(6)：1432-3.

2 Meretskyǐ VM.The humoral immunity changes in experimental cranio-cerebral trauma，concurrent with diabetes mellitus〔J〕.Klin Khir，2013；(5)：80-2.

3 Takeda Y，Shimomura T，Wakabayashi I.Immunological disorders of diabetes mellitus in experimental rat models〔J〕.Nihon Eiseigaku Zasshi，2014；69(3)：166-7.

4 Gerlach AT，Murphy CV，Dasta JF.An updated focused review of dexmedetomidine in adults〔J〕.Ann Pharmacother，2009；43(12)：2064-74.

5 梁 樺，劉洪珍，王漢兵，等.右美托咪定對結腸癌根治術病人圍術期細胞免疫功能和血循環微轉移的影響〔J〕.中華麻醉學雜志，2012；32(10)：1165-8.

6 高項羽，李 姍，呂志峰.右美托咪定對糖尿病患者圍術期糖代謝的影響〔J〕.河南外科學雜志，2013；19(4)：76-7.

7 陳慰峰.醫學免疫學〔M〕.北京：人民衛生出版社，2002：23.

8 Thumser AE，Moore JB，Plant NJ.Fatty acid binding proteins：tissue-specific functions in health and disease〔J〕.Curr Opin Clin Nutr Metab Care，2014；17(2)：124-9.

9 Uesugi N，Sakata N，Nangaku M，etal.Possible mechanism for medial smooth muscle cell injury in diabetic nephropathy：glycoxidation mediated local complement activation〔J〕.Am J Kidney Dis，2004；44(2)：224-38.

10 Nie F，Su D，Shi Y，etal.A preliminary study on the role of the complement regulatory protein，cluster of differentiation 55，in mice with diabetic neuropathic pain〔J〕.Mol Med Rep，2015；11(3)：2076-82.

11 Hess K，Alzahrani SH，Price JF，etal.Hypofibrinolysis in type 2 diabetes：the role of the inflammatory pathway and complement C3〔J〕.Diabetologia，2014；57(8)：1737-41.

12 付作文，程朝暉，譚海燕.右美托咪定對腦腫瘤切除術患者血清補體C3、C4水平的影響〔J〕.實用醫學雜志，2013；29(8)：1341-2.

13 張 宏，于德民，陳 櫻，等.2型糖尿病患者免疫功能變化與血糖和胰島素水平相關性的研究〔J〕.免疫檢驗和臨床醫學雜志，2002；9(2)：90.

〔2015-09-12修回〕

(編輯 苑云杰/曹夢園)

江西省衛計委科技計劃項目(20175208)

陳 勇(1986-)，男，碩士，主治醫師，主要從事臨床麻醉學研究。

童希忠(1971-)，男，碩士，主治醫師，主要從事臨床麻醉學研究。

R392

A

1005-9202(2017)03-0564-02；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.03.017

1 江西省玉山縣婦幼保健院