肺結核合并糖尿病患者T淋巴細胞亞群及紅細胞免疫功能的變化及意義

陸恩詞 朱穎蔚

(常州市第三人民醫院，江蘇 常州 213001)

肺結核合并糖尿病患者T淋巴細胞亞群及紅細胞免疫功能的變化及意義

陸恩詞 朱穎蔚1

(常州市第三人民醫院，江蘇 常州 213001)

目的 探討肺結核合并糖尿病患者T淋巴細胞亞群及紅細胞免疫功能的變化及意義。方法 選取41例肺結核合并糖尿病患者為肺結核合并糖尿病組，55例肺結核患者為肺結核組，50例健康人群為對照組。比較各組紅細胞免疫功能紅細胞花環(DTER)、紅細胞C3b羅體花環(RBC-C3bRR)、紅細胞免疫復合物花環(RBC-ICR)及T淋巴細胞亞群(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+)免疫功能。結果 與對照組比較，肺結核患者DTER、RBC-C3bRR顯著降低，RBC-ICR顯著升高(P<0.05)。與肺結核組相比較，肺結核合并糖尿病組DTER、RBC-C3bRR顯著降低，RBC-ICR顯著升高(P<0.05)。與對照組相比較肺結核患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均顯著降低，CD8+顯著升高(P<0.05)。與肺結核比較，肺結核合并糖尿病患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+顯著降低，CD8+顯著升高(P<0.05)。結論 肺結核合并糖尿病患者T淋巴細胞亞群及紅細胞免疫功能低下，其免疫功能受損程度大于單純肺結核患者。

肺結核；糖尿?。患t細胞；T淋巴細胞亞群

肺結核(TB)是糖尿病(DM)的機會性感染之一〔1,2〕，臨床研究結果顯示，DM患者結核病患病率為非DM患者的3～6倍，且血糖控制不良DM患者的結核病發病率為血糖控制良好DM患者的3倍〔3，4〕。既往研究證實，肺結核可降低機體細胞免疫功能，主要包括紅細胞及T淋巴細胞免疫功能下降，但肺結核合并糖尿病患者細胞免疫功能的相關研究尚未見報道〔5〕。本研究探討肺結核合并糖尿病患者T淋巴細胞亞群及紅細胞免疫功能的變化及其意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2012年4月至2014年4月我院收治的肺結核合并糖尿病患者共41例為肺結核合并糖尿病組，男27例，女14例；年齡31～86〔平均(47.2±10.4)〕歲。選取同期我院收治的肺結核患者55例為肺結核組，男34例，女21例；年齡30～87〔平均(47.5±11.6)〕歲。選取同期于我院行健康體檢人群共50例為對照組，男30例，女20例；年齡32～85〔平均(47.1±11.2)〕歲。各組患者性別、年齡等一般資料比較，差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。糖尿病診斷符合2009年美國糖尿病協會(ADA)制定的糖尿病診斷標準〔6〕。肺結核診斷符合《臨床診療指南結核病分冊》中制定的肺結核診斷標準〔7〕。納入標準：①符合肺結核和(或)糖尿病診斷標準；②知情同意并簽署知情同意書。排除標準：①精神病患者、孕婦、哺乳期婦女等特殊人群；②合并惡性腫瘤患者；③嚴重心、肝、腎等臟器功能障礙者。

1.2 方法

1.2.1 血液采集 所有患者空腹抽取肘靜脈血4 ml，EDTA 3K+抗凝，4℃保存備用。

1.2.2 T淋巴細胞亞群檢測 取CD4、CD8、CD3單抗各20 μl，分別加抗凝全血100 μl，混勻后避光置室溫孵育15 min，上流式細胞儀，分別檢測CD4+T淋巴細胞、CD8+T淋巴細胞、CD3+T淋巴細胞的百分比，并計算CD4+/CD8+比值，選用FITC/PE雙色標記的同型IgG作為陰性對照。

1.2.3 紅細胞免疫功能檢測 抗凝血10 μl加入5 ml PBS洗滌2次，800 r/min，離心5 min，用PBS調節紅細胞懸液濃度至1.25×107個/ml。取50 μl補體致敏或未致敏酵母菌懸液加至EP管，加入50 μl上述紅細胞懸液，混勻，37℃水浴30 min，震蕩混勻，水平抹平片，待室溫下自然干燥后行瑞氏-吉姆薩染色，油鏡下進行細胞計數。分別計算紅細胞花環(DTER)、紅細胞C3b受體花環(RBC-C3bRR)、紅細胞免疫復合物花環(RBC-ICR)。

1.3 觀察指標 比較各組患者紅細胞免疫功能(DTER、RBC-C3bRR、RBC-ICR)及T淋巴細胞亞群(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+)。

1.4 統計學方法 采用SPSS19.0統計軟件進行χ2及t檢驗。

2 結 果

2.1 各組紅細胞免疫功能比較 與對照組比較，肺結核患者DTER、RBC-C3bRR顯著降低，RBC-ICR顯著升高(P<0.05)。與肺結核患者比較，肺結核合并糖尿病患者DTER、RBC-C3bRR均顯著降低，RBC-ICR顯著升高(P<0.05)。見表1。

2.2 各組T淋巴細胞亞群比較 與對照組比較，肺結核患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+顯著降低，CD8+顯著升高(P<0.05)。與肺結核患者相比較，肺結核合并糖尿病患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+顯著降低，CD8+顯著升高，差異均有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 各組紅細胞及T淋巴細胞免疫功能比較±s)

與對照組比較：1)P<0.05；與肺結核組比較：2)P<0.05

3 討 論

DM與TB二者關系密切且相互影響。DM患者由于持續高血糖可導致機體蛋白質及脂肪代謝紊亂，引發營養不良和免疫力低下，且高糖又可作為結核分枝桿菌(MTB)的良好培養基，從而導致TB易感性增加；其次，高血糖可造成酸性環境，更利于MTB的生長與定植；DM微血管病變可累及肺部，導致肺部通氣血流比例失衡，肺氧分壓增高，有利于MTB繁殖〔8，9〕。TB又可反過來加重DM患者代謝紊亂，二者相互促進，形成惡性循環。我國TB合并DM發病率不斷增加，其臨床癥狀、發病特點、治療方法及預后均不同于普通結核病患者，給TB合并DM的防治帶來新的挑戰〔10〕。DM與TB患者由于存在痰細菌培養轉陽延遲，其預后較差，病死率和復發率均顯著高于單純TB患者。因此，探尋DM合并TB的發病特點，是控制病情及改善預后的重要措施〔11〕。

T淋巴細胞亞群和Th1/Th2細胞因子是機體內重要的免疫細胞和介質，可直接或間接參與調節體內各種病理、生理反應。按表型不同，T淋巴細胞可分為CD3+、CD4+和CD8+等亞群，CD3+代表總T淋巴細胞，其數量直接反映機體參與免疫應答的免疫活性細胞活性和數量；CD8+為T殺傷細胞，直接參與病毒清除過程；CD4+為T輔助細胞，可促進B淋巴細胞分泌抗體，對CD8+的增殖、活化具有重要調節作用，T淋巴細胞亞群比例的改變可導致機體正常免疫功能狀態的改變，并影響機體病毒清除過程〔12〕。CD4+/CD8+比值上調可提示機體免疫功能升高，相反，CD4+/CD8+比值下調則提示機體出現免疫抑制〔13〕。本研究提示單純肺結核患者存在T淋巴細胞亞群比例失衡現象，而合并DM可加重肺結核患者這一表現，DM所致的長期高血糖狀態及大量代謝產物累積是加重細胞免疫功能紊亂的重要機制之一。紅細胞免疫功能主要通過其細胞表面C3b受體黏附功能實現，而血清中促進因子(RFER)及抑制因子(RFIDR)則參與其免疫功能調控。紅細胞免疫功能異?？蓪е录t細胞吞噬能力的降低。本研究提示單純肺結核患者體內抗原抗體免疫復合物顯著增多，紅細胞免疫功能下降，而合并DM可加重肺結核患者這一表現，高糖化血紅蛋白常伴隨紅細胞免疫功能低下，可能是進一步加劇紅細胞免疫功能紊亂的重要機制。

1 Hunter RL.Pathology of post primary tuberculosis of the lung:an illustrated critical review〔J〕.Tuberculosis,2011；91(6):497-509.

2 Theron G,Peter J,van Zyl-Smit R,etal.Evaluation of the Xpert MTB/RIF assay for the diagnosis of pulmonary tuberculosis in a high HIV prevalence setting〔J〕.Am J Res Crit Care Med,2011;184(1):132-40.

3 Zheng Y,Ma A,Wang Q,etal.Relation of leptin,ghrelin and inflammatory cytokines with body mass index in pulmonary tuberculosis patients with and without type 2 diabetes mellitus〔J〕.PLoS One,2013;8(11):80122-5.

4 Chang JT,Dou HY,Yen CL,etal.Effect of type 2 diabetes mellitus on the clinical severity and treatment outcome in patients with pulmonary tuberculosis:a potential role in the emergence of multidrug-resistance〔J〕.J Formosan Med Assoc,2011;110(6):372-81.

5 Sun Q,Zhang Q,Xiao H,etal.Significance of the frequency of CD4+CD25+CD127-T-cells in patients with pulmonary tuberculosis and diabetes mellitus〔J〕.Respirology,2012;17(5):876-82.

6 American Diabetes Association.The American Diabetes Association (ADA) has been actively involved in the development and dissemination of diabetes care standards,guidelines,and related documents for many years.Introduction〔J〕.Diabet Care,2009;32(1):478-80.

7 端木宏謹,屠德華,張培元.臨床診療指南結核病分冊〔M〕.北京:人民衛生出版社,2005:18-21.

8 Baker MA,Harries AD,Jeon CY,etal.The impact of diabetes on tuberculosis treatment outcomes:a systematic review〔J〕.BMC Med,2011;9(1):81-3.

9 Dye C,Trunz BB,L?nnroth K,etal.Nutrition,diabetes and tuberculosis in the epidemiological transition〔J〕.PLoS One,2011;6(6):21161-5.

10 Goldhaber-Fiebert JD,Jeon CY,Cohen T,etal.Diabetes mellitus and tuberculosis in countries with high tuberculosis burdens:individual risks and social determinants〔J〕.Int J Epidemiol,2011;8(2):238-40.

11 Jimenez-Corona ME,Cruz-Hervert LP,García-García L,etal.Association of diabetes and tuberculosis:impact on treatment and post-treatment outcomes〔J〕.Thorax,2013;68(3):214-20.

12 Bold TD,Ernst JD.CD4+T cell-dependent IFN-γ production by CD8+effector T cells in mycobacterium tuberculosis infection〔J〕.J Immunol,2012;189(5):2530-6.

13 Qiu Y,Chen J,Liao H,etal.Tim-3-expressing CD4+and CD8+T cells in human tuberculosis (TB) exhibit polarized effector memory phenotypes and stronger anti-TB effector functions〔J〕.PLoS Pathogens,2012;8(11):34-5.

〔2015-06-11修回〕

(編輯 苑云杰/曹夢園)

陸恩詞(1976-)，男，副主任醫師，主要從事肺結核并糖尿病的治療研究。

R521.9

A

1005-9202(2017)03-0648-02；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.03.055

1 常州市第二人民醫院