老年肝硬化患者血清一氧化氮、腫瘤壞死因子-α、白細胞介素-1的水平變化及意義

欒 梅 欒 博 趙麗娟 寧華漢

(錦州醫科大學附屬第三醫院，遼寧 錦州 121000)

老年肝硬化患者血清一氧化氮、腫瘤壞死因子-α、白細胞介素-1的水平變化及意義

欒 梅 欒 博 趙麗娟 寧華漢1

(錦州醫科大學附屬第三醫院，遼寧 錦州 121000)

目的 觀察老年肝硬化患者血清一氧化氮(NO)、腫瘤壞死因子(TNF)-α、白細胞介素(IL)-1的水平及意義。方法 采用硝酸還原酶、放射免疫法、酶聯免疫吸附(ELISA)法分別測定58例老年肝硬化患者和30例同期在院進行健康體檢的人群(正常組)血清NO、TNF-α、IL-1水平檢測。結果 肝硬化組血清NO、TNF-α、IL-1水平均明顯高于正常組(P<0.05)，肝硬化組隨著病變加重血清NO、TNF-α、IL-1水平呈顯著增高。結論 血清NO、TNF-α、IL-1水平可作為判斷老年肝硬化肝功能損害的血清學指標之一，NO水平的增高可能與肝硬化腹水形成密切相關。

肝硬化；一氧化氮；腫瘤壞死因子-α；白細胞介素-1

肝硬化是臨床常見的慢性進行性肝病，由一種或多種病因長期或反復作用形成的彌漫性、纖維性病變，是我國老年人的常見疾病和主要死亡病因之一〔1〕。本研究中通過測定及分析老年肝硬化患者血清一氧化氮(NO)、腫瘤壞死因子(TNF)-α、白細胞介素(IL)-1濃度水平變化，了解NO、TNF-α、IL-1水平的增高與肝硬化腹水形成的相關性。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2012年1月至2013年11月遼寧醫學院附屬三醫院住院患者及同期在我院進行健康體檢的人群。肝硬化患者均符合2000年9月西安中華醫學會傳染病與寄生蟲病學分會肝病分會聯合修訂的標準〔2〕。其中58例肝硬化患者中男33例，女25例，平均年齡(65.25±3.13)歲。上述所有入選對象均無心臟、腎臟、內分泌、血液、風濕病、呼吸系統、神經系統與營養不良等疾病。采用Child-Pugh分級：A級25例，B級20例，C級13例，另以隨機選擇30例健康體檢的人群設為正常組，男15例，女15例，平均年齡(46.17±3.43)歲。均無肝病史，肝功能檢測正常，乙肝及丙肝病毒標志物檢測均為陰性且無上述排除標準所列疾病。各組人員年齡、性別比較均無顯著差異(P>0.05)。

1.2 方法

1.2.1 樣本采集 受試者均于早晨7時空腹抽取肘靜脈血4 ml，置于試管中離心(3 000 r/min，15 min)，分離血清，用凍存管置于-20℃冰箱中保存。

1.2.2 試劑 NO含量測定采用硝酸還原酶法。試劑盒由南京建成生物工程研究所提供，TNF-α水平測定采用放射免疫法，IL-1水平測定采用酶聯免疫吸附(ELISA)法，試劑盒由上海森雄公司提供。

1.3 統計學方法 采用SPSS16.0統計軟件進行t檢驗。

2 結 果

2.1 不同Child-Pugh分級患者血清NO、TNF-α、IL-1水平比較C級患者血清NO、TNF-α、IL-1水平高于A級及B級患者，B級患者高于A級患者(均P<0.05)。見表1。

表1 不同Child-Pugh分級患者血清NO、TNF-α、 IL-1水平比較

與正常組比較：1)P<0.05；與A級組比較：2)P<0.05；與B級組比較：3)P<0.05

2.2 肝硬化伴腹水組與無腹水組患者血清NO、TNF-α、IL-1水平比較 肝硬化伴腹水組患者血清NO、TNF-α、IL-1水平明顯高于無腹水組(均P<0.05)。見表2。

表2 肝硬化伴腹水組與肝硬化無腹水組患者血清中NO、 TNF-α、IL-1濃度比較

與無腹水組比較：1)P<0.05；與少量腹水組比較：2)P<0.05

3 討 論

內生性NO由NO合酶(NOS)催化左旋-精氨酸(L-Arg)與氧分子經多步氧化還原反應產生的〔3〕。NO是一種活性很強的無機自由基氣體，帶有不成對電子，其化學性質極不穩定，體內T1/2僅3～5 s，難以直接測定〔2〕，NO呈脂溶性，容易通過生物膜，具有氧化還原性，NO一方面具有血管舒張作用改善肝臟微循環，抵抗血小板聚集，殺滅細菌、病毒等病原微生物等作用保護肝細胞；另一方面，NO的大量產生，可通過其細胞毒作用損傷正常的肝組織，通過免疫抑制作用，導致肝硬化，甚至發生肝細胞惡變。肝細胞的狀態，NO濃度及其所處環境是決定NO產生有利或有害作用關鍵。

TNF-α主要由活化的T淋巴細胞及自然殺傷(NK)細胞產生，是細胞因子網絡中一種具有多種生物效應的重要生理炎性介質，在肝臟的壞死性炎癥、纖維形成、發展為肝硬化門脈高壓的過程中都有著重要的作用〔4〕。IL-1是一種重要的免疫調節因子，它參與神經、內分泌系統、機體炎癥反應以及抗腫瘤生理過程，主要在細胞免疫激活中發揮調節作用。

本研究結果顯示肝硬化患者Child分級增加血清NO水平明顯高于正常組，其機制可能是：NO主要維持一些正常的生理功能如血管的舒長和神經信息的傳遞等，機體受炎癥或腫瘤刺激時，內毒素、病毒及多種細胞因子，如TNF-α、IL-1、干擾素(INF)等可誘導合成分泌大量的NO〔5，6〕，可見肝硬化NO含量的測定對肝硬化的診斷、治療及預后的評價具有一定的參考價值。本文顯示TNF-α水平明顯高于正常組，可能與肝硬化患者腸黏膜滲透性增高、肝臟清除劑滅活內毒素功能降低、門脈分流等原因導致血漿內毒素升高，內毒素血癥能促進炎性因子的合成，是誘導TNF-α產生的最有效物質〔6〕。此外，可能與肝纖維化的損傷和修復過程中，單核細胞、巨噬細胞參與炎性反應，產生大量TNF-α有關。肝硬化患者體內NO增多與TNF-α誘導平滑肌細胞NO合成有關，TNF-α可使NF-κB活化以傳遞各種信息進入細胞核內，誘導NOS合成，NO合成增加，從而降低全身血管阻力，引起周圍血管擴張，引起肝硬化鈉水潴留，腹水形成。TNF-α在肝臟內可增加肝內皮細胞NOS的抑制物而增加肝內血管阻力，產生門脈高壓〔4〕。TNF-α升高與受損的肝臟對細胞因子的清除減少有關。IL-1隨著肝硬化病情的加重血中含量增加，提示IL-1隨著肝損害程度加重，炎癥過程不斷積累，炎癥因子逐漸升高。其機制可能與NO合成增多，加重缺氧、缺血、細胞變性壞死，并誘發炎癥過程的啟動、進展有關。本研究表明肝硬化患者血清NO的增多與TNF-α 、IL-1的含量呈正上升趨勢〔7～9〕。

本研究結果提示肝硬化時，患者體內NO等血管活性物質增加，誘發內臟血管擴張，動脈充盈不足，不僅直接擴張內臟血管，且引起周圍動脈擴張，并抵抗內源性和外源性縮血管物質作用，進一步降低血管平滑肌的緊張性，由于內臟血流增加和外周血管擴張，使體循環有效容量不足，排出減少，導致高動力循環狀態，門脈高壓，鈉水潴留，進一步加重腹水和并發癥的發生。有研究表明，NO促進肝硬化患者門脈血流動力學紊亂〔5〕，致使胃腸淤血，腸源性內毒素吸收增加，從而導致炎性細胞因子TNF-α、IL-1等產生增多，刺激誘導型NOS(iNOS)生成增多，合成大量的NO〔10〕。這樣形成惡性循環，導致一系列病理效應。如抑制蛋白質合成，促進側支循環建立和腹水形成，逐漸加重肝臟的損害。

1 李云華，楊魯華，劉同剛，等.老年肝硬化患者白細胞介素-6、-8及腫瘤壞死因子水平的變化及意義〔J〕.中國老年學雜志，2013；33(88)：4443-4.

2 中華醫學會傳染病與寄生蟲分會、肝病學會.病毒性肝炎防治方案〔J〕.中華傳染病雜志，2001；19(1)：52-6.

3 譚璐東，劉亞輝，王英超.己酮可可堿對肝硬化大鼠體內一氧化氮含量的影響〔J〕.中國老年學雜志，2012；32(6)：1222-3.

4 項 立，胡衛東，龍子義，等.谷氨酰胺對肝硬化患者血清TNF-α和IL-6水平的影響〔J〕.中華全科醫學，2012；10(2)：223-300.

5 Li R，Zhang N，Zhao J，etal.Peripheraland portal plasma iNOS activity and hepatic expression of iNOS in patients with chronic hepatitis or liver eirrhosis〔J〕.World Chin J Digestol，2010；18(7)：664-8.

6 張 莉，浦儉斌，王曉春，等.肝炎肝硬化合并自發性細菌性腹膜炎患者TNF-α和IL-6檢測的臨床意義〔J〕.山東醫藥，2011；51(8)：93-5.

7 張國民，王桂平，趙新輝，等.血清TNF-α及IL-10含量測定在老年肝硬化患者診斷中的價值〔J〕.中國老年學雜志，2011；31(23):4694-5.

8 王 鑫，趙新輝，高香翠，等.老年肝硬化患者IL-2、IL-6、IL-8及外周血T淋巴細胞亞群變化的規律〔J〕.中國老年學雜志，2011；31(22)：4349-50.

9 李 晨，邢少軍，段學章，等.乙型肝炎肝硬化患者外周血調節性T細胞頻率及血清lL-1B、IL-6和IL-10水平的變化〔J〕.實用肝臟病雜志，2012；15(3)：244-6.

10 Afzelius P，Bazeghi N，Bie P，etal.Circulating nitric oxide products do not solely reflect nitric oxide release in cirrhosis and portal hypertension〔J〕.Liver Int，2011；31(9)：1381-7.

〔2015-09-02修回〕

(編輯 苑云杰/曹夢園)

遼寧省科技廳自然科學基金項目(No.201602336)

趙麗娟(1965-)，女，碩士，主任醫師，碩士生導師，主要從事脂肪性肝病診治研究。

欒 梅(1979-)，女，碩士，主治醫師，主要從事肝臟疾病臨床與基礎研究。

R575.2

A

1005-9202(2017)03-0656-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.03.059

1 大連醫科大學