解毒祛瘀法對高危骨髓增生異常綜合征患者細(xì)胞免疫表型的影響*

錢麗麗 李曉芳

浙江省中醫(yī)院 浙江 杭州 310006

解毒祛瘀法對高危骨髓增生異常綜合征患者細(xì)胞免疫表型的影響*

錢麗麗 李曉芳

浙江省中醫(yī)院 浙江 杭州 310006

目的：觀察解毒祛瘀法治療對高危型骨髓增生異常綜合征患者細(xì)胞免疫表型的影響。方法：采用隨機(jī)對照法將高危型骨髓增生異常綜合征的患者分為治療組和對照組各18例，治療組以解毒祛瘀中藥聯(lián)合西藥治療，對照組僅用西藥治療。觀察總體有效率及細(xì)胞免疫表型（CD13、CD14、CD15、CD33、CD34）變化。結(jié)果：治療組總體有效率明顯高于對照組(P＜0.05)；治療組CD13、CD14、CD33、CD34較治療前明顯降低，治療組CD15對照治療前明顯升高(均P＜0.05)；治療組治療前后差值與對照組治療前后差值比較具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。結(jié)論：解毒祛瘀法對高危型骨髓增生異常綜合征有較好療效，并能對患者免疫表型細(xì)胞有調(diào)節(jié)作用，是一種可行的治療選擇。

解毒祛瘀法 骨髓增生異常綜合征 細(xì)胞免疫表型 臨床研究

骨髓增生異常綜合征(MDS)是發(fā)生在造血干細(xì)胞階段的異質(zhì)性克隆性疾病，主要特征是無效造血及較高的白血病轉(zhuǎn)化率。血象可呈全血細(xì)胞減少，或任何一系及二系血細(xì)胞減少，表現(xiàn)為貧血、感染或出血[1]。其發(fā)病機(jī)制至今未明，臨床上尚無確切有效的治療方法，目前西醫(yī)常規(guī)治療對MDS的總體療效在50%以下[2]。本研究納入18例高危型MDS患者并予解毒祛瘀法聯(lián)合西藥治療，以總體有效率和細(xì)胞免疫表型的變化為主要觀察指標(biāo)，探討其可能的治療機(jī)制。

1 臨床資料

1.1 病例選擇標(biāo)準(zhǔn)：參照《血液病診斷及療效標(biāo)準(zhǔn)》[3]，根據(jù)國際預(yù)后積分系統(tǒng)（IPSS）進(jìn)行危險度分型[4]。排除標(biāo)準(zhǔn)：①排除其它引起全血細(xì)胞減少的疾病，如白血病、PNH、再障等；②合并嚴(yán)重心血管、肝、腎、造血系統(tǒng)及免疫系統(tǒng)疾病、精神病患者；③有嚴(yán)重不可控制的感染、出血等癥狀的患者；④中醫(yī)辨證證型復(fù)雜或進(jìn)行造血干細(xì)胞移植者；⑤妊娠或哺乳期婦女，對本試驗(yàn)處方組成過敏者。

1.2 一般資料：2013年10月～2015年10月在本院經(jīng)血常規(guī)、骨穿、活檢、染色體等檢查確診為MDS患者，IPSS評分為高危型，共36例。隨機(jī)分為治療組及對照組各18例。治療組男8例，女10例，中位年齡39歲。對照組男7例，女11例，中位年齡42歲。

2 治療方法

2.1 對照組：使用反應(yīng)停、雷利度胺或地西他賓治療；必要時輸注紅細(xì)胞及血小板等支持治療。

2.2 治療組：在對照組的基礎(chǔ)上，加用中藥治療。根據(jù)我院既往治療MDS經(jīng)驗(yàn)，高危型患者往往表現(xiàn)出面色黯淡，或鼻衄、齒衄、肌衄，低熱不退，肌膚甲錯，舌紅絳、苔黃少津，脈細(xì)弦澀等表現(xiàn)。屬陰陽雙虧，瘀毒互結(jié)證。應(yīng)以解毒祛瘀，陰陽雙補(bǔ)為治法。方選膈下逐瘀湯、青蒿鱉甲湯合十全大補(bǔ)湯，藥用：五靈脂、丹皮、烏藥、香附、知母各6g，當(dāng)歸、鱉甲、白術(shù)各15g，川芎、紅花、枳殼各9g，桃仁、赤芍、青蒿、熟地、白芍、茯苓、生姜、大棗各12g，延胡索、甘草各3g，生地、黨參各20g。每日1劑，水煎，早晚分服。

兩組均以28天為1療程，3個療程為1個治療周期。

3 療效觀察

3.1 療效評價：總體治療療效評價參照《血液病診斷及療效標(biāo)準(zhǔn)》[3]擬定。完全緩解：骨髓穿刺原始細(xì)胞＜5%，各系細(xì)胞無異常發(fā)育；外周血無原始細(xì)胞，各系細(xì)胞無異常發(fā)育，絕對值恢復(fù)正常且在不使用造血刺激因子的情況下維持至少2個月。部分緩解：骨髓穿刺原始細(xì)胞較前減少50%或以上，或診斷分型較前相比轉(zhuǎn)化為較輕的亞型，其余標(biāo)準(zhǔn)同完全緩解。血液學(xué)改善：紅系：顯效：治療前血紅蛋白低于正常值，治療后升高20g/L以上或脫離輸注紅細(xì)胞；有效：治療前血紅蛋白低于正常值，治療后升高10～20g/L或輸血需求較前減少50%。巨核系：顯效：治療前血小板低于正常值，治療后較前升高30× 109/L以上或脫離輸注血小板；有效：治療前血小板低于正常值，治療后升高10-30×109/L之間。粒系：顯效：治療前中性粒細(xì)胞數(shù)低于正常值，治療后增加100%以上或凈增值≥0.5×109/L；有效：治療前中性粒細(xì)胞數(shù)低于正常值，治療后增加100%以上但凈增值＜0.5×109/L。無效：不能歸入上述任何一種情況。總有效率＝（完全緩解＋部分緩解＋血液學(xué)改善）/總例數(shù)×100%。

3.2 細(xì)胞免疫分型檢測方法：采集患者治療前后骨髓標(biāo)本進(jìn)行細(xì)胞免疫表型分析。采用BD公司提供的鼠抗人單克隆抗體標(biāo)記的FITC-CD13、FITC-CD14、FITCCD15、PE-CD33、PE-CD34、及Percp-CD45，BDFACS Calibur流式細(xì)胞儀上機(jī)進(jìn)行檢測。CD45/SSC設(shè)門分析各群細(xì)胞占有核細(xì)胞比例。

3.3 統(tǒng)計學(xué)方法：應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計學(xué)軟件，計量資料用均數(shù)和標(biāo)準(zhǔn)差（±s）描述，對正態(tài)資料采用成組t檢驗(yàn)；計數(shù)資料采用卡方檢驗(yàn)。P＜0.05有統(tǒng)計學(xué)意義。

3.4 治療結(jié)果：分述如下。

3.4.1 總體療效評價：見表1。

表1 總體療效評價

3.4.2 治療組治療前后細(xì)胞免疫表型結(jié)果：見表2。

表2 治療組細(xì)胞免疫表型測定結(jié)果（±s，n=18）

表2 治療組細(xì)胞免疫表型測定結(jié)果（±s，n=18）

注：與治療前比較，*P＜0.05

免疫表型CD13 CD14 CD15 CD33 CD34治療前35.16±2.72 10.90±1.83 42.47±8.34 26.58±4.22 7.77±1.15治療后30.34±3.71*8.53±2.00*45.09±8.35*25.44±4.82*7.14±1.36*

3.4.3 治療組與對照組治療前后細(xì)胞免疫表型差值進(jìn)行比較：見表3。

表32 組治療前后細(xì)胞免疫表型差值結(jié)果比較（±s）

表32 組治療前后細(xì)胞免疫表型差值結(jié)果比較（±s）

注：與對照組比較，*P＜0.05

免疫表型CD13 CD14 CD15 CD33 CD34對照組（n=18）治療前后差值0.52±0.89 0.23±0.54 -0.57±1.51 0.42±0.74 0.15±0.42治療組（n=18）治療前后差值4.82±3.09*2.43±1.07*-2.62±2.44*1.14±1.29*0.63±0.73*

4 討論

中醫(yī)學(xué)認(rèn)為，此病的發(fā)生是由多種因素導(dǎo)致的正氣虧虛，邪毒外侵，瘀血內(nèi)阻，虛實(shí)錯雜的癥候[5]。我院研究團(tuán)隊認(rèn)為MDS的發(fā)病是以脾腎虧虛為本,瘀毒內(nèi)蘊(yùn)為標(biāo)的動態(tài)發(fā)病過程。尤其是高危型患者，主要表現(xiàn)為陰陽雙虧，毒瘀互結(jié)的癥候，故治以解毒祛瘀法為主。MDS由于早期造血細(xì)胞的分化成熟障礙，失去了向正常克隆增殖分化的能力,同時細(xì)胞膜上與細(xì)胞分化有關(guān)的蛋白也有相應(yīng)的變化[6]，如單核系特異性抗原CD14、早期粒系抗原CD13、CD33以及干細(xì)胞抗原CD34表達(dá)增多，晚期粒細(xì)胞抗原CD15表達(dá)減少[7-9]。臨床觀察表明，治療組治療后CD13、CD14、CD33、CD34的表達(dá)較治療前顯著降低，CD15較前顯著增高，且治療組治療前后差值也明顯大于對照組（均P＜0.05）。提示中醫(yī)藥解毒祛瘀法可通過減少髓系異常表達(dá)并促進(jìn)細(xì)胞分化，改善高危型MDS的狀態(tài)。

綜上所述，解毒祛瘀法治療高危型骨髓增生異常綜合征，總體有效率較單用西藥對照組高，并能通過抑制惡性克隆、改善粒系分化成熟障礙起到治療作用，是有效的治療選擇。

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2016-07-07

浙江省中醫(yī)藥優(yōu)秀青年人才基金計劃中醫(yī)藥分型論治對MDS患者細(xì)胞免疫表型的影響，編號：2012ZQ010