防風藥材HPLC特征圖譜的研究

楊 穎，于翠霞

（1.吉林省吉測檢測技術有限公司，吉林 長春 130117；2.國藥控股吉林有限公司，吉林 長春 130012）

防風藥材HPLC特征圖譜的研究

楊 穎1，于翠霞2

（1.吉林省吉測檢測技術有限公司，吉林 長春 130117；2.國藥控股吉林有限公司，吉林 長春 130012）

目的建立防風藥材HPLC特征圖譜的質量評價方法。方法色譜柱：Agilent HC C18（250×4.6mm，5μ）；甲醇-水（45：55）為流動相；檢測波長為254nm；柱溫35℃。結果所建立的特征圖譜信息豐富，4種色原酮類成分重復性和穩定性都較好。結論本研究建立的防風藥材的特征圖譜特征性和專屬性強，且方法快速、簡便、可靠，可用于全面控制市場流通防風藥材的質量。

防風藥材；HPLC；特征圖譜

中藥特征圖譜技術方便可靠，是一種科學、新型、理想的中藥鑒定方法。本實驗采用高效液相色譜法對防風藥材進行特征圖譜研究，為更好地對防風藥材進行質量評價提供了良好的實驗基礎。

1 儀器與試藥

LC-2010AHT高效液相色譜儀；試劑：水為超純水，甲醇（德國默克，色譜級）；對照品：5-O-甲基維斯阿米醇苷（111523-200405）、亥矛酚苷（111714-200501）、升麻素（111710-200602）、升麻素苷（111522-200406），均購自中國藥品生物制品檢定所。防風藥材樣品產地：遼寧。

2 方法與結果

2.1 色譜條件

固定相：Agilent HC C18色譜柱（5μ，250×4.6mm）；流動相：甲醇-水（45：55）；流速：1.0mL/min

2.2 溶液的制備

2.2.1 對照品溶液.

取5-O-甲基維斯阿米醇苷對照品、亥茅酚苷對照品、升麻素對照品、升麻素苷對照品適量，精密稱定，加甲醇溶解并稀釋制成每1mL約含5-O-甲基維斯阿米醇苷90μg、亥茅酚90μg升麻素70μg、升麻素苷50μg的溶液，作為對照品溶液。

2.2.2 供試品溶液

取防風藥材5g進行粉碎，取混勻的細粉約0.25g，精密稱定，置于具塞錐形瓶中，精密加入甲醇10mL，帶瓶稱定并記錄重量，水浴加熱回流提取2小時，放冷至室溫，瓶外壁擦拭干凈，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，用0.45μm濾頭濾過，取續濾液，作為供試品溶液。

2.3 專屬性試驗

分別吸取上述對照品溶液、供試品溶液及甲醇（陰性空白）各5μL，按上述色譜條件進行測定，記錄色譜圖。結果表明其它成分無干擾，本方法專屬性較好。

2.4 精密度試驗

取同一供試品溶液，連續進樣6次，計算供試品中與4個對照品保留時間一致的色譜峰的保留時間，各特征峰的相對保留時間的RSD（%）小于1.0%，結果表明，實驗儀器精密度良好。

2.5 穩定性試驗

取同一供試品溶液，設置儀器分別在0、4、8、16、24小時自動采樣，照正文方法測定，按保留時間計算，結果未發生明顯變化，穩定性良好。

2.6 重現性試驗

取同一供試品6份，依法獨立測定，計算供試品中與4個對照品保留時間一致的色譜峰的保留時間，各特征峰保留時間的RSD（%）均小于1%，結果表明，本法的重現性良好。

3 討 論

3.1 測定波長的選擇

取供試品溶液2μL，注入液相色譜儀，分別在254nm、270nm、280nm、300nm、320nm進行檢測，結果在254nm波長下，給出信息最多，各色譜峰信號最強，故選取254nm作為檢測波長。

3.2 流動相的選擇

參照中國藥典2010年版一部“防風”含量測定項下的方法，以甲醇：水（40：60）為流動相，流速0.8mL/min，亥矛酚苷色譜峰保留時間太長，故將流動相比例調整為甲醇：水（45：55），流速0.8mL/min，對照品色譜峰保留時間適當，供試品色譜峰分離度良好。等度洗脫，采集時間100min，40min以后未出現其它特征峰。故采用甲醇-水（45：55）為本法的流動相。

3.3 色譜柱的選擇

本文比較了Agilent HC C18色譜柱（4.6×250mm，5μm）、Luna C18色譜柱（4.6×250mm，5μm）和Shiseido色譜柱（4.6×250mm，5μm），三種色譜柱均滿足本方法系統適用性的要求。表明本實驗耐用性較好。

[1] 中國藥典2010年版一部.

[2] 不同產地防風中4種色原酮成分比較研究中草藥第38卷第5期2007年5月.

[3] 防風的研究進展中國藥業 2006第15卷第10期.

R931.5

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ISSN.2095-8242.2017.050.9877.01

本文編輯：趙小龍