三種不同包衣材料對五種益生菌保存期的研究

劉慧+鄒玲+溫建新

摘 要：益生菌有益于機體健康，但在生產、保存過程中其活性常會降低；而包衣材料可以提高益生菌的穩定性，從而更好地使其發揮益生作用。試驗通過平板計數法來評價3種包衣材料對5種不同益生菌（糞腸球菌、雙歧桿菌、酵母菌、芽孢桿菌、乳酸菌）的保護作用。結果表明，3種包衣材料對糞腸球菌、乳酸桿菌、雙歧桿菌、酵母菌和芽孢桿菌均有一定保護作用，其中，20 d內，包衣材料2對5種益生菌的保護作用較強；60 d內，則是包衣材料1對5種益生菌的保護作用較強。

關鍵詞：包衣材料；益生菌；保護作用

中圖分類號：TS201.1 文獻標識碼：A DOI 編碼：10.3969/j.issn.1006-6500.2017.02.019

Abstract： Probiotics can promote the health of the body， but they will reduce the activity in the process of production and preservation. The coating material can improve the stability of the probiotics， and thus better play its prebiotic effect. In this study， the protective effect of three coating materials on five probiotics （Enterococcus faecalis， Bifidobacterium， yeasts， Bacillus， Lactobacillus） was evaluated by plate counting method. The results showed that three kinds of coating materials had some protective effects on Enterococcus faecalis， Lactobacillus， Bifidobacterium， Saccharomyces and Bacillus. In 20 days， the protective effect of coating 2 on five probiotics was stronger； within 60 days， the protective effect of coating 1 on five probiotics was stronger.

Key words： coating materials； probiotics； protection

益生菌具有促進機體健康的作用，同時還有抗癌作用，對腸炎類疾病也有抑制作用[1]。益生菌制劑沒有殘留，沒有副作用、不會產生抗藥性，其開發前景以及發展前景非常廣闊[2]。在加工、運輸、貯存過程中，益生菌的活菌制劑容易失活，或者生物活性降低，產品質量不穩定[3]。在此方面包衣材料有著明顯的優勢。

包衣技術是當今世界發展最為迅速的新型細胞技術之一，且用途廣泛。包衣材料應用于益生菌的生產中很好地解決了益生菌不易大量生產和儲存期短等問題。益生菌在防治疾病和抗生素替代等方面展現出非凡的潛力，國際營養學界公認，益生菌是一種可定植于人體腸道、生殖系統內[4]，并可起到改善宿主健康和體內微生態平衡的作用[4]。

1 材料和方法

1.1 材料及試劑

3種包衣材料（包衣液1，2，3）；5種益生菌（糞腸球菌、雙歧桿菌、酵母菌、芽孢桿菌、乳酸菌），由山東省預防獸醫學重點實驗室保藏；5種培養基（甘露醇卵黃多黏菌素瓊脂基礎；糞腸球菌瓊脂；TPY瓊脂培養基；KF鏈球菌肉湯；MRS肉湯），購于青島海博生物科技有限公司。

1.2 方 法

F，R，S，J，Y這5種益生菌，各取0.5 mL，加入生理鹽水4.5 mL，進行倍比稀釋，稀釋至107。對照組，5種菌均取5，6，7這3個梯度，每梯度各取900 μL，加入生理鹽水100 μL，混勻，備用；試驗組，5種菌均取5，6，7這3個梯度，每梯度各取900 μL，分別加入包衣液100 μL，混勻，溫箱中作用6 h，備用。分別從第105，106 ，107 梯度中取出50 μL涂板，觀察各種菌的生長情況。以F菌為例。分別從對照組、試驗組取出50 μL涂板，觀察各種菌的生長情況。將剩余菌液置于4 ℃冰箱中待用。放置0，20，60 d分別涂板，觀察對比各種菌的生長情況。

2 結果與分析

2.1 包衣材料對益生菌存活率第1次（0 d）試驗結果

根據預試驗結果，選取106，107稀釋度各50 μL進行涂板計數，其結果如表2所示。

如表2可知，這5種菌在3種包衣液中作用0 d，其數量級均可達到109。

2.2 包衣材料對益生菌存活率第2次（20 d）試驗結果

放置4 ℃冰箱中20 d，取106梯度50 μL進行涂板計數，其結果如表3所示。

由表3可知，這5種菌在3種包衣液中作用20 d，數量略有下降，但數量級仍可達到109；3種包衣液對各菌均有保護作用，包衣液3相對保護能力較弱。

2.3 包衣材料對益生菌存活率第3次（60 d）試驗結果

放置4 ℃冰箱中60 d，取106梯度50 μL進行涂板計數，鑒定結果如圖3～7所示。

由圖3～7所示，5種菌在3種包衣液中作用60 d，數量均有下降，約下降了2個數量級；但包衣液3保護能力較弱，其中包衣液3對乳酸菌的保護能力尤弱。

2.4 3種包衣材料對5種益生菌存活量結果

從圖8～14可以看出，3種包衣液對各菌均具有保護作用，其中，包衣1和包衣2保護作用相當；包衣液3保護能力呈現較弱，包衣液3對R菌的保護能力尤弱。

3 結論與討論

本研究結果表明，3種包衣材料對糞腸球菌、乳酸桿菌、雙歧桿菌、酵母菌和芽孢桿菌均有保護作用，其中，包衣材料3的保護作用最弱，且對糞腸球菌和酵母的保護作用最低。20 d內，包衣2對5種益生菌的保護作用較強；60 d內，包衣1 對5種益生菌的保護作用較強。糞腸球菌在20～60 d內包衣1 的保護作用較強；乳酸桿菌在20～60 d內3種包衣保護作用相當；雙歧桿菌在20～60 d內包衣3的保護作用較強；酵母菌在20 d內包衣3的保護作用較強，在60 d內則包衣1的保護作用較強；芽孢桿菌在20～60 d內包衣1 的保護作用較強。

隨著益生菌的廣泛使用，有效保護益生菌的生理活性成為當前益生菌研究的重點[6]。益生菌在加工過程中，其活性還有可能受到溫度、濕度和壓力等外界環鏡的影響，其活性便會大幅度損失[7]。對于一個益生菌產品而言，在使用及保存期間保持強效的活力，是評價產品好壞最有效的準則[8]。就目前來說，多數益生菌產品在規定期限內活菌的活力降低，致使大多數情況下益生菌往往達不到我國保健食品中對益生菌活菌數的要求[9]。如何提高益生菌的活力，提高益生作用，一直是人們關注和研究的熱點[10]。本試驗結果表明，3種包衣材料對5種益生菌具有不同的保護作用，為今后對這5種益生菌的保護和應用奠定了基礎。益生菌的發展和應用將會越來越多地得到人們的關注，隨之包衣液的發展也會越來越成熟。

參考文獻：

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