遺傳性對稱性色素異常癥一家系ADAR基因突變檢測

郭小璇

摘要：目的 檢測遺傳性對稱性色素異常癥家系ADAR突變基因。方法 收集患者臨床資料，抽提外周血DNA，PCR擴增ADAR基因編碼區的所有外顯子及側翼序列，擴增產物純化后直接雙向測序，并與基因組序列進行比對分析，查找有無突變。結果 候選基因編碼區所有外顯子及側翼序列均未發現突變。結論 ADAR基因編碼區序列與本研究中遺傳性對稱性色素異常癥家系發病無關，致病基因待進一步研究。

關鍵詞：遺傳性對稱性色素異常癥；ADAR基因；基因編碼區

Abstract：Objective To detect the ADAR mutant gene in the family of hereditary symmetry pigment abnormalities.Methods clinical data of patients with peripheral blood DNA extraction，all PCR amplification of ADAR gene encoding region of exon and flanking sequences，PCR products were purified and directly sequenced，and compared with the genomic sequence，find no mutation.Results No mutations were found in all the exons and flanking sequences of the candidate gene coding region.Conclusion The ADAR gene coding region is not related to the pathogenesis of hereditary symmetry pigment abnormalities in this study.

Key words：Hereditary symmetry pigment abnormalities；ADAR gene；Gene coding region

遺傳性對稱性色素異常癥（Dyschromatosis symmetrica hereditaria，DSH）是一種少見的常染色體顯性遺傳性皮膚病。主要表現為散在分布于手足背的對稱性色素沉著及色素減退斑，少數伴有面部雀斑樣損害，可延及四肢及全身[1]。2003年張學軍等[2]將該病的致病基因定位于1q11～1q21區域。Miyamura等[3]將該病的致病基因確定為ADAR基因。我們收集到1個DSH家系，利用PCR和直接測序方法進行突變檢測，以期發現在該家系中是否存在ADAR基因突變。

1資料與方法

1.1一般資料 先證者：女，6歲。雙手足背出現色素異常4年，皮疹漸加重，無不適。系統查體：未見明顯異常。皮膚科檢查：雙手足背可見米粒至黃豆大小褐色色素沉著斑，夾雜色素減退斑，見圖2、圖4。面部散在粟粒至黃豆大小色素沉著斑，見圖1。父母非近親結婚。家系調查：先證者父親，31歲，自3歲起雙手足背、面部出現與先證者相似皮損，見圖3、圖5、見圖6。亦呈夏重冬輕現象。無其他自覺癥狀。系統查體：未見明顯異常。皮膚科檢查：雙手足背可見米粒至黃豆大小褐色色素沉著斑，夾雜色素減退斑。面部散在粟粒至黃豆大小色素沉著斑。家系圖，見圖7。組織病理檢查：（先證者父親右足背色素斑） 表皮輕度角化過度，表皮基底細胞灶性黑素減少與增加交替分布，真皮淺層血管周圍少許淋巴細胞浸潤，見圖8、圖9。診斷：遺傳性對稱性色素異常癥。

1.2材料與方法

1.2.1 外周血基因組DNA提取。

1.2.2 PCR擴增及DNA測序ADAR基因，見表1。

ABI PRISM 3730XL自動測序儀直接測序。測序結果利用Sequeneher 4.10.1Demo軟件與基因組標準序列進行比對分析。

2結果

2.1 基因突變檢測

2.1. 擴增DSRAD基因的15個外顯子編碼區及側翼序列，經過http：//www.ncbi.nlm.nih.gov/BLAST/進行反復仔細比對，未發現任何致病突變。

3討論

遺傳性對稱性色素異常癥（DSH ）， 系常染色體顯性遺傳病，最先由Toyam a于1910年描述， 并于1929年正式命名。嬰兒期或兒童期發病。張學軍等首次將本病定位在1q11-1q21區間內， 該區間內的雙鏈RNA 特異性腺苷脫氨酶基因（ADAR） 被證實是本病的致病基因。迄今已超過140種不同的ADAR基因的突變報道，其中約60%的突變點位于編碼ADEAMc區的堿基序列上，因此有筆者認為ADEAMc區是該病基因的突變熱點區域。本家系2位患者ADAR基因的15個外顯子編碼區及側翼序列進行測序未發現任何致病突變。劉紅等曾對8個DSH家系進行ADAR的直接測序，其中的2個家系也未發現任何突變，分析原因可能位于內含子區域、5'端啟動子區域。考慮到遺傳異質性，原因還可能是致病基因ADAR之外的其它基因。至今中國人遺傳性對稱性色素異常癥的分子遺傳學研究報道中尚未發現除ADAR基因編碼區以外的突變位點。因此定位漢族人群中該病的易感基因或篩查已知易感基因的突變類型仍是該病的一個研究方向。本家系致病基因的定位研究，仍在進行中。

參考文獻：

[1]趙辨.中國臨床皮膚病學[M].第1版.南京：江蘇科學技術出版社，2010.1479.

[2]高敏，張學軍，李明，等.全基因組掃描定位遺傳性對稱性色素異常癥易感區域[J].中華皮膚科雜志，2003， 36（3）： 675-678.

[3]Miyamura Y，Suzuki T，Kono M，et al.Mutations of the RNA-specific adenosine deaminase gene（DSRAD）are involved in dyschromatosis symmetrica hereditaria[J].American Journal of Human Genetics，2003，73（3）：693-699.

編輯/李樺