銀屑病動物模型的研究進展

楊素清，李東東，閆景東*

（1.黑龍江中醫藥大學附屬第一醫院皮膚科， 哈爾濱 150040；2.黑龍江中醫藥大學研究生學院， 哈爾濱 150040）

綜 述

銀屑病動物模型的研究進展

楊素清1，李東東2，閆景東1*

（1.黑龍江中醫藥大學附屬第一醫院皮膚科， 哈爾濱 150040；2.黑龍江中醫藥大學研究生學院， 哈爾濱 150040）

總結當前銀屑病動物模型，以及分析其各自 原理、特點、優勢和局限性 發現：自發性突變鼠模型在研究中極少使用 ；生物醫學型動物模型廣泛應用于藥物療效評價 ；藥物誘發性動物模型適宜在普通實驗室推廣應用 ；基因工程動物模型適合有條件的工作者選用；復合動物模型 有利于研究銀屑病發病機制的復合機制；異體移植動物模型因客觀條件限制了推廣應用；中醫特定證型銀屑病動物模型為中醫工作者的研究提供了理想的模型。 銀屑病動物模型種類較多，但各自特點突出，因此研究者需要根據研究目的恰當選取實驗模型。

銀屑病；動物模型；中醫證型

銀屑病（Psoriasis）是由多基因遺傳調控、T淋巴細胞介導的慢性復發性炎癥性皮膚病，以皮膚紅色丘疹或斑塊且上覆鱗屑為主要臨床變現。以皮膚角質形成細胞角化不全、角化過度、異常增生、血管形成和炎性細胞浸潤為主要的組織病理學特點。目前病因及發病機制尚未完全明確，治療多集中于改善臨床癥狀，控制復發[1]。動物模型是目前研究疾病病因、發病機制和治療方法的重要工具之一。在銀屑病的研究方向上，選取和建立理想的動物模型十分重要[2]。本文通過對目前主要的銀屑病動物模型進行分類分析及綜述，以期給臨床及科研工作者研究銀屑病的發病機制及選取適合的動物模型提供參考。

1 自發性突變鼠模型

自發性突變鼠模型是最先發現的天然銀屑病樣動物模型，動物在自然狀態及遺傳背景下發生等位基因突變產生與人類銀屑病類似的某些特征。如缺皮脂突變鼠（Scd1ab/Scd1ab鼠）[3]、鱗片狀皮膚突變鼠（Ttc7fsn/Ttc7fsn鼠）[4]能夠自發出現銀屑病樣癥狀，部分模擬人類銀屑病皮膚組織學特點。但此類模型炎性細胞浸潤和缺乏T淋巴細胞的表達，在治療上免疫抑制劑等抗銀屑病治療藥物無法減輕癥狀，因此臨床研究極少使用。

2 生物醫學型動物模型

2.1 小鼠尾部鱗片模型 正常生理狀態，小鼠尾部鱗片表皮細胞生長快，細胞未能完全角化而保留細胞核，且表皮角質層的顆粒層細胞脫失，其角化不全形式與人類銀屑病表皮相似。因其天然角化不全的特點，所以不需特殊處理即可以模擬人類銀屑病表皮動力學紊亂的特點。此類模型可用于藥物干預方式間接評價藥物療效，且經濟有效[5-6]。

2.2 雌鼠陰道上皮模型 處于雌激素期的小鼠，陰道上皮細胞基底層有絲分裂活躍，上皮細胞轉換活躍，可模擬人類銀屑病表皮增值加速的特點。因其陰道上皮細胞增殖轉換活躍，相當于皮膚角化過度，因此不需特殊處理即可模擬人類銀屑病角化過度的特點。此類模型經濟易得，故可作為評價治療銀屑病藥物療效的常用模型[5-6]。

3 藥物誘發性動物模型

3.1 普萘洛爾誘導耳部模型 普萘洛爾通過阻滯角朊細胞β腎上腺素能受體方式降低細胞環磷酸腺苷（cAMP）水平，誘發動物表皮出現角化過度、角化不全、棘層肥厚和角質層內多形核細胞浸潤等表現，接近人類銀屑病的組織病理學改變。該模型模擬了銀屑病患者皮損中表皮改變部分組織的病理特點，且模型操作簡便，具有重現性，經濟易得，局限在于與人類自發的銀屑病存在差異[5-6]。

3.2 咪喹莫特誘導的小鼠銀屑病模型 咪喹莫特是Toll樣受體7/8激動藥。在其誘導的小鼠銀屑病樣模型中，咪喹莫特與表皮漿細胞樣樹突狀細胞及巨噬細胞內的TLR7結合，分泌大量的干擾素α（IFN-α），以及白細胞介素 23（IL-23）、IL-17、IL-22等，致動物表皮角化過度、角化不全、棘層肥厚、血管生成和炎細胞浸潤等人類銀屑病的組織病理學改變[7]。動物選擇8～12周齡的BALB/C雌性鼠，飼養于無特異性病原體的清潔環境中。剔除小鼠背部毛發，將5%（質量分數）咪喹莫特軟膏（62.5 mg）連續涂抹于小鼠背部皮膚7 d誘導銀屑病。咪喹莫特誘導的小鼠銀屑病樣動物模型有時間窗的限制，可能與機體免疫耐受出現自限性治愈有關。同時實驗組小鼠除涂抹處背部皮膚出現改變外，還伴有食欲減退、精神萎靡及脾臟顯著增大等改變，提示局部外用咪喹莫特可引起小鼠全身反應。小鼠局部皮膚在咪喹莫特作用后，損傷組織病理學動態改變與皮膚損傷形態變化一致，均在6～8 d表現典型的銀屑病樣病理學改變，隨后逐漸改善。這種病理變化與人類銀屑病有較多相似之處，是研究銀屑病的理想動物模型。且具有操作簡單、經濟、重復性高等優點，適宜在普通實驗室推廣應用。

4 基因工程動物模型

4.1 K5-STAT3轉基因模型 角蛋白5-STAT3（K5-STAT3）轉基因模型[8-9]：STAT3是在研究IFN信號轉導機制過程中發現的一種轉錄因子，在IL-6信號傳導中急性期反應因子被純化的蛋白，所參與的信號傳導通路與細胞增殖、分化和凋亡密切相關。幾乎所有銀屑病皮損中STAT3都呈激活狀態且正常皮膚中幾乎無表達。在K5-STAT3轉基因模型中，角蛋白5啟動子控制STAT3的表達，其角質形成細胞過度表達成活性的STAT3。2周左右皮膚變紅、脫屑，尾部皮膚出現角化過度，組織表現類似銀屑病皮損，廣泛用于研究銀屑病潛在靶向藥物的研究。

4.2 KC-Tie2 轉基因模型 角質形成細胞-血管緊張素受體（KC-Tie2）轉基因模型是一種基于KC特異性表達血管緊張素受體Tie2的轉基因模型[10]，此模型的KC原始細胞中Tie2類似銀屑病患者KC細胞內Tie2表達異常，出現與人類銀屑病類似的皮損。具有生物化學、藥理學、組織學及免疫學水平特異性，TNFα、IFNγ、IL-1、IL-12、IL-23、IL-17等促炎性細胞表達增加[11]。KC-Tie2轉基因模型小鼠出生3周后，耳部出現明顯紅斑，8周后，背部、腹部、生殖器周圍出現紅斑、鱗屑、皮損過度角化等癥狀[12]。此模型對于研究TNF-α、IL-23、IL-17、IFNγ在銀屑病中的發病機制具有重要意義。

5 復合動物模型

STAT1是信號轉導與轉錄激活子家族中的一員。STAT1主要受IFN的激活，IFN-α和IFN-γ均需要通過STAT1來實現其生物學作用，調節許多參與細胞生長、分化、凋亡及免疫的基因的表達。STAT1基因敲除小鼠IL-22表達水平高于野生小鼠。最新研究[13]表明Th17細胞分泌的IL-22在銀屑病的發病過程中起著更為關鍵的作用，很可能成為新的治療靶標。

在檢測小鼠模型細胞因子中發現，IL-22表達水平高于野生型。提示皮炎模型中IL-22的升高可能不僅僅由Th17細胞分泌產生，有可能通過其他與STAT1有關的信號通路影響其表達水平。

6 異體移植動物模型

1975年KRUEGER[14]成功將銀屑病患者皮膚移植于裸鼠后，學者開始研究異種皮膚移植方法構建銀屑病動物模型。但是異體移植只是復制了銀屑病的皮膚局部反應， 未能模擬出銀屑病的整體發病狀況，以及移植皮膚只能在有限時間內保持其原有的表皮過度增殖和真皮炎性浸潤等特征，僅適用于短期研究。由于移植皮膚與受體間的排斥反應及感染問題，嚴格無菌操作，價格昂貴，時間局限等原因限制了異體移植動物模型的推廣應用。

7 中醫特定證型銀屑病動物模型

7.1 脾虛型銀屑病動物模型 郭菲等[15]利用現有脾虛模型制備方法（灌服苦寒瀉下藥大黃）聯合5%普洛萘爾局部刺激制備脾虛證銀屑病豚鼠模型。豚鼠在出現銀屑病皮損表現的基礎上，伴隨少食、活動減少、便溏等脾虛證的表現， 較好的模擬了臨床上脾虛證銀屑病患者的皮損及整體狀態。

7.2 濕熱型銀屑病動物模型 王玉芝[16]利用濕熱證模型制備方法（濕熱環境、高脂高糖飲食、灌服白酒）聯合外用乳劑基質（5%心得安乳劑）制備濕熱證銀屑病豚鼠模型。豚鼠模型在出現銀屑病皮損的基礎上，伴隨有納呆少飲、嗜睡懶動、大便時干時溏、肛溫升高等濕熱證的表現，較好的模擬了濕熱證銀屑病患者的皮損及整體狀態。

7.3 血瘀型銀屑病動物模型 樊丹采等[17]利用現有血瘀、寒凝、氣虛模型制備方法（冰水浴、減少進食量、束縛法加夾尾法）聯合外用5%心得安乳液局部刺激方法，制備寒凝氣虛血瘀證模型和氣虛血瘀證模型。小鼠模型在銀屑病皮膚損害的基礎上，伴有體質量減輕、皮毛無光澤、蜷縮少動、爪甲皮膚色黯甚至紫黯的氣虛血虛寒凝的表現，較好的模擬了臨床上血瘀證相關銀屑病患者的皮損及整體狀態。

8 總結

目前由于銀屑病本身病因以及發病機制的不確切，尚且沒有和人類銀屑病完全吻合的動物模型，因此在眾多類型的銀屑病模型中，結合自己的研究目的，恰當的選取模型類型十分重要。

自發性突變鼠模型在治療上，免疫抑制劑等抗銀屑病治療藥物無法減輕癥狀，與人類銀屑病存在差距，因此臨床研究極少使用。生物醫學動物模型和藥物誘發性動物模型病理變化與人類銀屑病有較多相似之處，具有操作簡單、經濟、重復性高等優點，是評價藥物療效的理想動物模型。當前精準醫學的概念已經成為廣泛共識，轉基因模型有著較強的研究針對性，對于治療藥物的機制與靶向作用研究有著重要意義，為了在基因領域深入研究其發病機制，有條件的醫務工作者已較多應用基因工程動物模型。但限于銀屑病病因機制的復雜性，尚沒有綜合的多基因參與的轉基因模型，且價格及技術要求過高，限制其使用率。隨著中醫藥現代化研究的深入，單純類型銀屑病動物模型很難滿足中醫工作者的需要，而復合型中醫證型動物模型在模擬銀屑病患者皮損的基礎上，能更好地模擬臨床上患者的整體狀態，評價中醫藥藥物的治療作用及研究其作用機制提供了良好的條件，有利于中醫藥參與銀屑病的研究，中醫特定證型銀屑病動物模型將會得到更為廣泛的研究和使用。醫務工作者及研究人員在研究過程中應當結合研究目的、研究條件、經費情況等條件，結合不同類型動物模型自身的特點，作出適當選擇。

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Advances in psoriasis-like animal models

YANG Suqing1, LI Dongdong2, YAN Jingdong1*
（1. Dermatology Department, The First Aff i liated Hospital of Heilongjiang University of Chinese Medicine,Harbin 150040, China;2. Graduate School, Heilongjiang University of Chinese Medicine, Harbin 150040, China）

Psoriasis is a chronic recurrent inf l ammatory dermatosis involved in genetic, immune, infection and other factorse, which etiology and pathogenesis is not yet fully clear. In clinical studies, animal models are widely used.Through reviewing the related papers and summarizing the current psoriasis animal models with analyzing their respective principles, characteristics, advantages and limitations, we get the conclusion that spontaneous mutant rat models are rarely used in research; biomedical animal models are widely used in the evaluation of drug efficacy;drug-induced animal models are suitable for general laboratories; genetic engineering animal models are suitable for conditional workers. Allogeneic animal model is limited by the objective conditions to promote the application;TCM syndrome type psoriasis-like animal model is suitable for the study of Chinese medicine workers. Therefore researchers need to properly select the experimental model according to the purpose of their study and characteristics of animal models.

psoriasis; animal models; TCM patterns

R275.9

A

2095-6258(2017)06-1029-04

10.13463/j.cnki.cczyy.2017.06.057

國家自然科學基金委員會資助項目（81373639）。

楊素清（1964 -），博士，教授,博士研究生導師，主要從事中醫藥治療疑難性皮膚病的研究。

*通信作者：閆景東，男，博士，副主任醫師，碩士研究生導師，電話-18944609210，電子信箱- shilanxiaodong@163.com

2017-01-16）