不同培養(yǎng)基對皮膚來源的成纖維細胞增殖、衰老及膠原蛋白分泌的影響

喇文軍，林孝發(fā)，蔣 偉，王 妍，尹衛(wèi)民，林嘉歡，林 峰

不同培養(yǎng)基對皮膚來源的成纖維細胞增殖、衰老及膠原蛋白分泌的影響

喇文軍1，林孝發(fā)1，蔣 偉1，王 妍1，尹衛(wèi)民2，林嘉歡1，林 峰1

（1.深圳職業(yè)技術學院應用化學與生物技術學院 廣東 深圳 518055；2．深圳市君焯醫(yī)療美容整形研究所廣東 深圳 518040）

目的：探討不同培養(yǎng)基組成對皮膚成纖維細胞的增殖、衰老及膠原蛋白分泌的影響。方法：采用兩步酶消化法從健康人耳后皮膚中獲得成纖維細胞，依據(jù)培養(yǎng)基種類不同分為A組（FM無血清培養(yǎng)基）、B組（DMEM+10%FBS）、C組（RPMI-1640+10%FBS）、D組（DMEM+F12(1∶1)+10%FBS），采用MTT法、細胞劃痕實驗、酶聯(lián)免疫吸附實驗、β-半乳糖苷酶試驗、軟瓊脂克隆形成試驗比較不同培養(yǎng)基對細胞增殖、遷移、膠原分泌、老化、變異的影響。結果：采用酶消化法在2d～4d內即可從組織塊中獲得大量成纖維細胞；其中B、D組較A、C組細胞增殖較快，且趨勢與MTT細胞增殖相同；劃痕實驗顯示B、D組較A、C組向缺損部位遷移更為明顯；此外，D組膠原蛋白分泌量高于其余三組（P＜0.05），且連續(xù)傳代30次后，細胞無明顯衰老及瘤變跡象。結論：兩步酶消化法可快速高效的從人組織塊中獲得成纖維細胞，且采用DMEM+F12(1∶1)完全培養(yǎng)基有利于促進細胞增殖、分泌膠原蛋白及延緩細胞衰老。

成纖維細胞；培養(yǎng)基；膠原蛋白；細胞增殖；原代培養(yǎng)

醫(yī)療技術的發(fā)展及人們生活水平的提高，使人類平均壽命得到有效延長的同時，也使延緩衰老漸漸進入人類視野。而皮膚作為人體最大的器官，其結構完整、美觀不僅影響著心情，也體現(xiàn)其生活質量的高低。……