血清巨噬細(xì)胞集落刺激因子、缺氧誘導(dǎo)因子-1α與冠狀動(dòng)脈易損斑塊的關(guān)系

武 琦 唐淑華

(濰坊醫(yī)學(xué)院附屬齊魯石化中心醫(yī)院心內(nèi)科，山東 淄博 255400)

血清巨噬細(xì)胞集落刺激因子、缺氧誘導(dǎo)因子-1α與冠狀動(dòng)脈易損斑塊的關(guān)系

武 琦 唐淑華

(濰坊醫(yī)學(xué)院附屬齊魯石化中心醫(yī)院心內(nèi)科，山東 淄博 255400)

目的 檢測冠心病患者血清巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)、缺氧誘導(dǎo)因子(HIF)-1α，并與冠狀動(dòng)脈斑塊形態(tài)特征對(duì)比分析，探討血清M-CSF、HIF-1α與冠狀動(dòng)脈不穩(wěn)定斑塊的關(guān)系。方法 選擇85例診斷明確的冠心病患者，分為不穩(wěn)定型心絞痛組(UAP 組)30例、非ST段抬高心肌梗死組(NSTEMI組)25例以及穩(wěn)定型心絞痛(SAP組)30例。 所有患者通過冠狀動(dòng)脈造影檢查，并按Ambrose分型分為Ⅰ～Ⅲ型，用酶聯(lián)免疫法測定血清M-CSF、HIF-1α水平。結(jié)果 ①NSTEMI組和UAP組血清M-CSF、HIF-1α水平均顯著高于SAP組。②NSTEMI組中斑塊形態(tài)以Ambrose斑塊分型Ⅱ、Ⅲ型為主，UAP 組以Ⅰ、Ⅱ型為主，SAP組以Ambrose斑塊形態(tài)分型Ⅰ型為主；③血清M-CSF、HIF-1α水平隨斑塊的不穩(wěn)定性增加逐漸升高，即Ⅲ型>Ⅱ型>Ⅰ型。④直線相關(guān)分析顯示：在各組中M-CSF和HIF-1α正相關(guān)(P<0.01)。結(jié)論 血清M-CSF和HIF-1α與冠狀動(dòng)脈斑塊的不穩(wěn)定性有關(guān)，聯(lián)合檢測血清M-CSF和HIF-1α水平對(duì)評(píng)估病情、指導(dǎo)治療、評(píng)價(jià)療效有一定參考價(jià)值。

冠心?。痪奘杉?xì)胞集落刺激因子；缺氧誘導(dǎo)因子-1α；易損斑塊

隨著對(duì)急性冠狀動(dòng)脈綜合征(ACS)發(fā)病機(jī)制的廣泛研究，人們發(fā)現(xiàn)易損斑塊在其發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮著重要的作用〔1〕。巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)作為炎癥反應(yīng)中的敏感標(biāo)志物，能夠促進(jìn)造血祖細(xì)胞分化為單核巨噬細(xì)胞，并維持其繁殖、分化、生長〔2〕。缺氧誘導(dǎo)因子(HIF)-1α可抑制血小板凝聚、促進(jìn)致密血管的增生，二者可能在易損斑塊的形成和發(fā)展中發(fā)揮著重要的作用〔3〕。本研究旨在探討冠心病患者血清M-CSF和HIF-1α與冠狀動(dòng)脈不穩(wěn)定斑塊的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 我院2014年3～8月住院的冠心病患者85 例，男45例，女40例；年齡45～80歲。其中不穩(wěn)定型心絞痛(UAP)組30例、非ST段抬高心肌梗死(NSTEMI)組25例以及穩(wěn)定型心絞痛(SAP)組30例。冠心病診斷參考2005年美國心臟病學(xué)會(huì)/美國心臟學(xué)會(huì)(ACC/AHA)冠心病診斷與治療指南。排除ST段抬高型心肌梗死、免疫系統(tǒng)疾病及腫瘤者。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本收集與檢測 所有受檢者空腹>12 h，于第2日早晨采8 ml肘靜脈血，并置于不抗凝生化試管中，于室溫下靜置30 min，后以3 000 r/min 離心5 min后取血清，置于-20℃冰箱中保存。采用酶聯(lián)免疫吸附法測定血清M-CSF和HIF-1α水平，嚴(yán)格按照說明書步驟操作。

1.2.2 冠狀動(dòng)脈造影 所有患者均接受冠狀動(dòng)脈造影，應(yīng)用多角度攝像來記錄造影圖像。冠心病診斷標(biāo)準(zhǔn)為:冠狀動(dòng)脈管腔狹窄程度>50%。同時(shí)結(jié)合患者心電圖中心肌缺血的部位來確定血管，并仔細(xì)觀察斑塊的形態(tài)特征。冠狀動(dòng)脈罪犯血管斑塊形態(tài)按Ambrose分型標(biāo)準(zhǔn)分為Ⅰ～ Ⅲ型。Ⅰ型:病變表面光滑，可呈現(xiàn)向心性或略偏心，但是基地部增寬；Ⅱ型:病變的基地部較為狹窄，或呈現(xiàn)出表面不平的龕影、尖角狀或火山口樣；Ⅲ型:閉塞的病變或彌散性的不規(guī)則的狹窄。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS17.0軟件進(jìn)行單因素方差分析，χ2檢驗(yàn)，多元逐步回歸模型進(jìn)行多因素分析，相關(guān)性分析采用Pearson直線分析。

2 結(jié) 果

2.1 各組相關(guān)臨床資料的比較 見表1。NSTEMI組、UAP組、SAP組體重指數(shù)(BMI)、年齡、甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)無明顯差異(P>0.05)。與NSTEMI組比較，UAP組、SAP組MCSF、HIF-1α水平明顯降低(P<0.05，P<0.01)；與UAP組比較，SAP組M-CSF、HIF-1α明顯下降(P<0.01)。

表1 各組間相關(guān)臨床資料比較±s)

與NSTEMI組比較:1)P<0.05；2)P<0.01；與UAP組比較:3)P<0.01

2.2 不同組別冠狀動(dòng)脈斑塊形態(tài)分型比例 SAP組以Ambrose 斑塊形態(tài)分型Ⅰ、Ⅱ型為主；UAP組中斑塊形態(tài)分型以Ⅱ型為主，NSTEMI組中形態(tài)以Ⅱ、Ⅲ型為主。血清M-CSF、HIF-1α水平隨斑塊的不穩(wěn)定性增加逐漸升高，即Ⅲ型>Ⅱ型>Ⅰ型。見表2。

2.3 所有患者M(jìn)-CSF和HIF-1α相關(guān)性 M-CSF和HIF-1α呈正相關(guān)關(guān)系，SAP組(r=0.284，P<0.05)、UAP組(r=0.342，P<0.05)、NSTEMI組(r=0.213，P<0.05)。

表2 不同組別冠狀動(dòng)脈斑塊形態(tài)分型比例及M-CSF、HIF-1α水平比較

與Ⅰ型組比較:1)P<0.05，2)P<0.01；與Ⅱ型組比較:3)P<0.05，4)P<0.01

3 討 論

影響ACS發(fā)生發(fā)展的最重要因素是斑塊的穩(wěn)定性，通常將不穩(wěn)定斑塊稱之為軟斑塊或高危斑塊，現(xiàn)統(tǒng)稱之為易損斑塊。從形態(tài)學(xué)上來說，易損斑塊包括了所有易于形成血栓并有可能迅速發(fā)展成罪犯斑塊的多種粥樣硬化斑塊組織。這種斑塊常存在于無癥狀的人群，因此對(duì)易損斑塊的早期診斷，是早期預(yù)防ACS的基礎(chǔ)。目前研究認(rèn)為，易損斑塊的產(chǎn)生是一個(gè)多種因素共同參與和調(diào)控的復(fù)雜過程，同時(shí)也是一個(gè)系統(tǒng)與局部、損傷與抗損傷的慢性炎癥改變〔4〕。本研究通過對(duì)85例冠心病患者的冠狀動(dòng)脈易損斑塊檢測發(fā)現(xiàn)，NSTEMI組中斑塊形態(tài)以Ambrose斑塊分型Ⅱ、Ⅲ型為主，UAP 組以Ⅰ、Ⅱ型為主，SAP組以Ambrose斑塊形態(tài)分型Ⅰ型為主。

M-CSF作為一種糖蛋白，主要由巨噬細(xì)胞、單核細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞和淋巴細(xì)胞產(chǎn)生。M-CSF由單基因編碼，長約20 kb，含有10個(gè)外顯子和9個(gè)內(nèi)含子，有3種表達(dá)形式，依次命名為膜結(jié)合型M-CSF、細(xì)胞外基質(zhì)結(jié)合M-CSF和可溶性M-CSF〔5〕。M-CSF的分泌可受包括炎癥、細(xì)胞因子等多種因素的影響，腫瘤壞死因子(TNF)-α、白細(xì)胞介素(IL)-1α、脂多糖等可增強(qiáng)M-CSF的表達(dá)，血小板源性生長因子等則能夠抑制M-CSF的合成。M-CSF的主要作用是促進(jìn)單核-的分化，并維持單核-巨噬細(xì)胞的增殖、分化和生長。當(dāng)發(fā)生炎癥反應(yīng)時(shí)，由于炎性細(xì)胞的浸潤，可激活產(chǎn)生大量的M-CSF，被M-CSF受體結(jié)合，從而發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)，同時(shí)M-CSF還可通過其受體引起單核-巨噬細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞釋放更多M-CSF。有研究認(rèn)為M-CSF可觸發(fā)平滑肌細(xì)胞凋亡，導(dǎo)致平滑肌細(xì)胞的數(shù)量減少，與冠狀動(dòng)脈易損斑塊的形成有密切相關(guān)〔6〕。另有研究〔7〕通過對(duì)測定AMI患者的血漿IL-6、M-CSF、TNF、粒細(xì)胞集落刺激因子、M-CSF后發(fā)現(xiàn)，AMI組患者血漿IL-6水平僅在發(fā)病后1～2 d增高，隨后逐漸將為正常，而與對(duì)照組相比，血漿M-CSF在整個(gè)觀察期內(nèi)都顯著升高。本研究顯示，血清M-CSF可能在一定程度上能夠反映出冠心病患者斑塊的穩(wěn)定性有一定的預(yù)測價(jià)值。

HIF最先是由在缺氧誘導(dǎo)的條件下，在細(xì)胞核中提取出的一種DNA結(jié)合蛋白，可分為HIF1、HIF2和HIF3三種亞基。目前對(duì)HIF1的研究最多。HIF1是由相對(duì)分子量為120 000的α亞基和相對(duì)分子量為91～94 000的β亞基組成，而在不同的條件下，α亞基的表達(dá)存在顯著差異，因此HIF1的生理活性主要是由HIF-1α決定的。在通常情況下，HIF-1α能夠在體內(nèi)被迅速的降解，但是當(dāng)組織和器官出現(xiàn)缺血缺氧時(shí)，可使HIF-1α的降解減少，導(dǎo)致其在體內(nèi)的含量明顯升高。趙愛華〔8〕研究發(fā)現(xiàn)，HIF-1α水平在冠心病組明顯高于正常對(duì)照組，提示HIF-1α可能在冠心病的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮著重要的作用。當(dāng)心肌缺血缺氧時(shí)，HIF-1α表達(dá)水平增加，可調(diào)控多種缺氧適應(yīng)性基因表達(dá)，使致密血管增生，改善心肌供血，減少梗死面積，對(duì)心肌缺血的損傷起到一定的保護(hù)作用。李東野等〔9〕通過復(fù)制兔的AMI模型，并分別向心肌內(nèi)注入腺病毒介導(dǎo)的HIF-1α基因、不含HIF-1α基因腺病毒顆粒、HIF-1α核酶基因，最后得出由腺病毒介導(dǎo)的HIF-1α基因可顯著減少心肌細(xì)胞的凋亡，而當(dāng)給予HIF-1α核酶基因后可明顯增加細(xì)胞的凋亡，提示HIF-1α可能有抗心肌細(xì)胞凋亡的作用，從而能夠改進(jìn)心肌的缺血。本研究提示血清HIF-1α可能參與了心肌缺血和斑塊形成的過程，血清HIF-1α的濃度變化在一定程度上能夠?yàn)樵u(píng)估斑塊的穩(wěn)定性提供一定的依據(jù)。

血清M-CSF和HIF-1α呈明顯的正相關(guān)，二者具有良好的相關(guān)性。聯(lián)合檢測血清M-CSF和HIF-1α，可為早期預(yù)防、病情評(píng)估及指導(dǎo)治療提供一定的依據(jù)。血清M-CSF和HIF-1α濃度變化在一定程度上也可以反映動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的穩(wěn)定性。

1 王亞利,胡申江,王 歡,等.不同劑量瑞舒伐他汀對(duì)急性冠脈綜合征患者血清高敏 C 反應(yīng)蛋白和基質(zhì)金屬蛋白酶-9 的影響〔J〕.中華危重癥醫(yī)學(xué)雜志(電子版),2014;7(3):37-9.

2 Fontana L,Pelosi E,Greco P,etal.MicroRNAs 17-5p-20a-106a control monocytopoiesis through AML1 targeting and M-CSF receptor upregulation〔J〕.Nature Cell Biol,2007;9(7):775-87.

3 Jewell UR,Kvietikova I,Scheid A,etal.Induction of HIF-1α in response to hypoxia is instantaneous〔J〕.FASEB J,2001;15(7):1312-4.

4 李 娟,劉宏斌,戴艷麗,等.易損斑塊的生理學(xué)特征及無創(chuàng)影像學(xué)檢查方法〔J〕.中華老年心腦血管病雜志,2014;16(7):776-8.

5 左新春.AMI 患者血清 Mb,TnI,IL-6 和 M-CSF 檢測的臨床意義〔J〕.放射免疫學(xué)雜志,2012;25(6):611-3.

6 Seshiah PN,Kereiakes DJ,Vasudevan SS,etal.Activated monocytes induce smooth muscle cell death:role of macrophage colony-stimulating factor and cell contact〔J〕.Circulation,2002;105:174-80.

7 Hideki T,Hiroaki S,Kunihiko Y,etal.Monocyte-related cytokines inacute myocardial infarction〔J〕.Am Heart J,1995;130:446-52.

8 趙愛華.冠心病患者血清 HIF-1α 及 HO-1 水平的變化及其意義〔J〕.當(dāng)代醫(yī)學(xué),2011;17(9):48.

9 李東野,閆 艷,朱 紅,等.HIF-1α基因?qū)π募」Ｋ篮笮募〖?xì)胞凋亡和心功能影響的實(shí)驗(yàn)研究〔J〕.中國病理生理雜志,2008;24(2):275-8.

〔2015-08-31修回〕

(編輯 苑云杰/曹夢園)

唐淑華(1962-)，女，副教授，主要從事心臟電生理學(xué)研究。

武 琦(1987-)，男，住院醫(yī)師，主要從事心血管介入研究。

R541.4

A

1005-9202(2017)04-0865-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.04.036