丹紅注射液輔助治療對糖尿病腎病患者血小板CD62p、血小板激活復合物-1表達的影響

李明霞 于 佩 王俊芳 趙軼峰 任衛東 張 斌

(河北北方學院附屬第一醫院，河北 張家口 075000)

丹紅注射液輔助治療對糖尿病腎病患者血小板CD62p、血小板激活復合物-1表達的影響

李明霞 于 佩1王俊芳2趙軼峰 任衛東 張 斌

(河北北方學院附屬第一醫院，河北 張家口 075000)

目的 觀察丹紅注射液輔助治療對糖尿病腎病(DN)患者血小板活化依賴性顆粒表面膜蛋白(CD62p)、血小板激活復合物(PAC)-1表達的影響。方法 95例DN患者隨機分為對照組與治療組，治療組在常規療法的基礎上靜注丹紅注射液(20 ml/次)，采用流式細胞術檢測治療前后CD62p、PAC-1的表達。結果 治療前兩組DN患者的血小板CD62p、PAC-1無顯著差異；對照組常規治療后血小板CD62p、PAC-1無明顯變化；治療組聯合丹紅注射液治療顯著降低了血小板CD62p、PAC-1陽性表達率；且治療組治療后的血小板CD62p、PAC-1顯著低于對照組治療后。結論 丹紅注射液輔助治療可明顯抑制DN患者血小板活化，這對于降低血栓形成是有利的。

丹紅注射液；糖尿病腎病；血小板活化依賴性顆粒表面膜蛋白；血小板激活復合物-1

微血管病變引起的腎小球硬化、腎小管上皮細胞壞死是導致糖尿病腎病(DN)最終發展為慢性腎衰竭乃至死亡的關鍵環節〔1，2〕。在DN的發展過程中，血小板活化或血管內皮細胞損傷引起的微血栓形成起了關鍵作用。為此從防止血小板活化角度延緩DN的進展，已成為目前糖尿病治療的關鍵〔3〕。血小板活化依賴性顆粒表面膜蛋白(CD62p)與血小板激活復合物(PAC)-1是引起血小板活化、形成微血栓的關鍵介質〔4，5〕，因此，從抑制CD62p與PAC-1表達的角度，抑制血小板活化，已成為DN治療的新靶點〔6，7〕。目前，中藥治療糖尿病及其并發癥已取得了很好的效果〔8〕。其中，丹紅注射液具有抑制微血栓形成、改善微循環的作用，目前已用于DN的輔助治療，并已取得了一定的療效〔9〕。但其是否通過抑制DN患者血小板的CD62p與PAC-1表達、從而減少血小板活化與微血栓形成還不清楚。為此，本研究觀察丹紅注射液輔助治療對DN患者血小板CD62p與PAC-1表達的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2006年10月至2010年3月在我院內分泌科、腎內科住院的DN患者95例。納入標準：病程≥10年；2型糖尿病；尿白蛋白排泄率(UAER)值>200 μg/min〔10～12〕。排除標準：排除入院前發生過心肌梗死、心絞痛、腦梗死、間歇性跛行等糖尿病大血管病變及下肢動靜脈血栓、慢性肝病、肺部疾病、慢性心功能不全、尿路感染、酮癥酸中毒及使用腎毒性藥物等；排除入院前無急慢性炎癥；排除近1個月未應用阿司匹林、華法林、潘生丁等作用于血小板的藥物。其中男45例，女50例；平均年齡(55.18±6.32)歲；平均糖尿病病程(14.35±2.34)年。隨機分為對照組(n=45)、治療組(n=50)，兩組患者性別、年齡、體重指數(BMI)等基線資料無顯著差異(P>0.05)。

1.2 治療方法 兩組患者常規治療：應用化學降糖藥和胰島素強化降糖，嚴格將血糖控制在7 mmol/L水平以下；應用同種類型同一廠家生產的血管腎張素轉換酶抑制劑類降壓藥物，嚴格控制血壓在130/80 mmHg以下(除外血壓低者)；血脂異常者應用常規方法調脂藥療；限制蛋白質飲食1.0～1.2 g·kg-1·d-1。治療組在此基礎上加用丹紅注射液(濟南步長制藥有限公司)20 ml靜脈滴注，1次/d，2 w為1個療程。

1.3 指標檢測 所有入選病例，在入院后完成常規檢查后的第3天，早8：00應用3.8%枸櫞酸鈉抗凝的真空采血管采集空腹靜脈血2 ml，應用FACS Calibur流式細胞(美國Becton Dickion公司)儀檢測血小板CD62p、PAC-1以及CD62p+PAC-1的陽性表達率。藻紅蛋白標記的抗CD62p單克隆抗體(CD62p PE)、異硫氰酸熒光素標記的抗PAC-1單克隆抗體(PAC-1 FITC)購自美國Becton dickion公司。治療2個療程結束后，留取空腹靜脈血，檢測血小板CD62p、PAC-1的表達情況。

1.4 統計學方法 應用SPSS13.0軟件進行t檢驗。

2 結 果

血小板被十字線分為四群：左下是PAC-1、CD62p同時陰性的血小板；左上是CD62p陽性PAC-1陰性的血小板；右上是PAC-1、CD62p同時陽性的血小板；右下為PAC-1陽性CD62P陰性的血小板。分別以單純CD62p陽性(CD62p+PAC-1-)血小板、單純PAC-1陽性血小板(CD62p-PAC-1+)以及CD62p、PAC-1同時陽性(CD62p+PAC-1+)血小板占血小板總數的百分比表示結果。治療前，兩組患者血小板的CD62p+PAC-1-、CD62p-PAC-1+、CD62p+PAC-1+的百分比均無統計學意義(P>0.05)；對照組常規治療前后血小板CD62p+PAC-1-、CD62p-PAC-1+、CD62p+PAC-1+的百分比無統計學意義(P>0.05)；治療組聯合丹紅注射液治療顯著降低了血小板CD62p+PAC-1-、CD62p-PAC-1+、CD62p+PAC-1+的百分比(P<0.05)；且治療組治療后的血小板CD62p+PAC-1-、CD62p-PAC-1+、CD62p+PAC-1+的百分比顯著低于對照組治療后(P<0.05)。見表1。

表1 丹紅注射液治療對DN患者血小板CD62p、 PAC-1表達的影響

與本組治療前比較:1)P<0.05；與對照組治療后比較:2)P<0.05

3 討 論

丹紅注射液是中藥丹參、紅花提取物的中藥注射劑，丹參與紅花均具有抑制血小板聚集、激活纖溶從而發揮抗血栓形成的作用，從而較好地改善微循環。本研究結果表明，丹紅注射液輔助治療DN，可明顯降低DN患者血小板CD62p、PAC-1的比例，從而發揮抑制血小板活化的作用，這對于降低血栓形成是有利的。CD62p屬黏附分子之一，為分子量為140 kD的膜糖蛋白，位于血小板α顆粒和血管內皮細胞內，在DN發生發展中的作用越來越受到人們的重視〔13〕。研究顯示，在發生DN患者的血漿CD62p濃度顯著高于無DN患者；高濃度的CD62p是介導單核細胞和T淋巴細胞聚集在腎小球和腎間質、從而惡化炎癥反應的主要因素〔14〕。PAC-1是激活的糖蛋白Ⅱb/Ⅲa特異性單克隆抗體，血小板PAC-1表達可作為糖蛋白Ⅱb/Ⅲa激活的特異性標志，是反映血小板活化的早期標志物〔15〕。鑒于CD62p與PAC-1在DN發生、發展以及血栓形成中的作用，本研究結果顯示丹紅注射液降低CD62p與PAC-1表達的陽性作用。因此，可以說，丹紅注射液輔助治療DN的作用機制與降低血小板CD62p、PAC-1表達有關。以此為研究靶點，可進一步擴展丹紅注射液在血栓性疾病中的治療范圍。同時，可能還有許多未知的藥理學作用涉及丹紅注射液對DN患者的治療機制，這需要在今后動物實驗與臨床研究中進一步探討。

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〔2015-09-23修回〕

(編輯 苑云杰/曹夢園)

于 佩(1972-)，女，主任醫師，博士，博士生導師，主要從事內分泌學研究。

李明霞(1980-)，女，碩士，主治醫師，主要從事糖尿病治療的臨床研究。

R587.1；R285.6

A

1005-9202(2017)04-0882-02；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.04.043

1 天津醫科大學代謝病醫院 2 秦皇島衛生學院