河南信陽副豬嗜血桿菌病血清流行病學調查

(河南省信陽市動物疫病預防控制中心，河南信陽464000)

河南信陽副豬嗜血桿菌病血清流行病學調查

馬超鋒

(河南省信陽市動物疫病預防控制中心，河南信陽464000)

為了解信陽市副豬嗜血桿菌(Haemophilus parasuis，Hps)感染情況，應用IHA方法對113家豬場的3 589份血樣進行了調查。結果顯示，副豬嗜血桿菌病陽性豬場71個，占受檢測豬場總數的62.8%，血清樣品總體陽性率為21.0%，其中，母豬、公豬、哺乳仔豬、保育豬及育肥豬陽性率分別為21.8%、19.9%、18.3%、23.9%和19.9%。檢測結果顯示，各個生長階段豬群感染率差異不顯著，Hps感染率季節性差異不顯著。鑒于Hps在信陽市已普遍存在，今后要加強對該病的防控，有效控制其流行。

副豬嗜血桿菌;正向間接血凝試驗;感染率;調查

副豬嗜血桿菌病是由副豬嗜血桿菌(Hps)引起的豬的多發性漿膜炎和關節炎，該病于1902年由Glasser首次報道，呈世界性分布，是對豬群危害極大的一種動物疫病。副豬嗜血桿菌是豬上呼吸道常在菌，在機體遭受應激或感染病毒性疾病(如豬瘟、高致病性豬藍耳病、豬圓環及豬瘟等)導致機體免疫力下降時可引起發病，屬于典型的“機會性”病原［1］。Hps主要通過空氣傳播，一年四季均可感染，2周齡到4月齡的豬易感，以5～8周齡斷奶后和保育階段豬群多發。Hps發病率一般在10%～15%，嚴重時死亡率可達50%以上。發病豬主要臨床癥狀為咳嗽、發熱、呼吸困難、關節腫大、跛行及被毛粗亂至最后消瘦而死，病例剖檢可見胸膜炎、心肌炎、腹膜炎、多發性漿膜炎、關節炎和腦膜炎等變化。Hps血清型復雜，應用瓊脂擴散血清分型方法至少可將Hps分為15個血清型，另外還有20%以上的菌株無法定型，我國流行的血清型以1、4、5型和13型為主，河南的以4型和5型居多［2］。信陽作為河南省養豬大市，生豬存欄量和出欄量居全省前列，Hps對我市豬群健康危害極大，每年給豬場帶來較大的經濟損失。為了解我市豬群副豬嗜血桿菌感染情況和流行概況，信陽市動物疫病預防控制中心組織人員歷時21個月采用正向間接血凝試驗對我市豬場進行調查，為防控副豬嗜血桿菌病提供參考。

1 材料與方法

1.1 樣品來源2014年3月-2015年11月，3589份待檢血清來自信陽市轄區內平橋區、浉河區、光山縣、羅山縣、商城縣、新縣、息縣、潢川縣和淮濱縣未免疫副豬嗜血桿菌疫苗的113家不同規模豬場的不同生長階段豬群，所有樣品冷凍保存備檢。

1.2 主要檢測試劑及儀器副豬嗜血桿菌正向間接血凝診斷試劑盒，購自中國農業科學院蘭州獸醫研究所;TDZ5-WS臺式低速離心機(長沙湘儀離心機儀器有限公司);Eppendorf 10－1000 μL單道移液器及25－300 μL多道移液器(德國Eppendorf公司);微量振蕩器;303系列電熱恒溫培養箱(上海樹立儀器儀表有限公司)。

1．3 方法副豬嗜血桿菌病抗體檢測采用正向間接血凝試驗(IHA)，檢測方法按照試劑盒說明書內容進行。

副豬嗜血桿菌病抗體檢測結果判定:判定標準:“++++”紅細胞全部凝集，形成一層均勻膜，布滿整個孔底;“+++”紅細胞在孔底形成一層薄膜，面積比前者稍小;“++”紅細胞在孔底形成薄膜凝集，邊緣松散或呈鋸齒狀;“+”紅細胞在孔底呈稀薄、散在、少量凝集，孔底有小圓點;“+”紅細胞沉于孔底，但周圍不光滑或中心有空斑;“－”紅細胞完全沉于孔底，呈光滑的圓點;“++”以上凝集者判為陽性。

在陽性對照血清滴度不低于1∶128(第7孔)，陰性對照血清除第1孔允許存在前滯現象(+)外，其余各孔均為(－)，稀釋液對照為(－)的前提下，對被檢血清進行判定，否則應重試。

被檢血清判定標準血清效價≥1∶8(++)者判為陽性，效價≤1∶4者判為陰性。

數據分析采用SPSS19.0軟件分析檢測結果，利用χ2檢驗分析數據差異顯著性，P＜0.05時差異顯著，P＜0.01差異極顯著。

2 結果

2.1 不同縣區豬場副豬嗜血桿菌流行病學調查情況見表1。

表1 樣品來源及Hps檢測情況

本次副豬嗜血桿菌病調查共檢測豬場113個，陽性場71個，陽性場率為62．8%，統計分析表明，各縣區間豬場陽性率差異極顯著(P＜0.001)，其中平橋區陽性場率最高，為76.9%，其次為商城縣的73.3%，最低的息縣為53.8%;檢測樣品3 589份，樣品陽性率為21%，各縣區之間樣品陽性率差異極顯著(P＜0.001)，息縣檢出率最高為26%，最低的新縣為14.3%。

2．2 不同類別豬群副豬嗜血桿菌流行病學調查情況見表2。

表2 不同類別豬群Hps檢測情況

本次副豬嗜血桿菌感染情況調查覆蓋母豬、公豬、哺乳仔豬、保育豬和育肥豬5個生長階段豬群，能夠較好的反映出我市Hps感染狀況。由表2可知，保育階段豬群感染率最高，為23．9%;母豬、育肥豬、公豬次之，分別為21．8%、19．9%、19．9%;哺乳仔豬最低為18．3%。

統計分析結果表明，5個生長階段Hps陽性率不存在顯著差異(P=0.07)。

2．3 不同季節副豬嗜血桿菌流行病學調查情況見表3。

表3 不同月份豬群Hps檢測情況

由表3可以看出，全年各個月份均有Hps陽性檢出，其中，7月份Hps感染率最高，達到26．2%，8月份次之，為24.0%;3月份感染率最低，為16.0%，1月份次低，為16．9%。對不同月份Hps感染率進行χ2檢驗分析差異顯著性，各月份間Hps感染率不存在顯著差異(P=0.088)

3 討論與分析

3.1 副豬嗜血桿菌是我國造成哺乳和保育階段仔豬感染、死亡的重要原發或繼發病原，特別是在飼養管理條件不好的豬場能夠造成豬只的大量死亡，給豬場帶來較大的經濟損失。由于副豬嗜血桿菌十分嬌嫩，實驗室細菌分離與檢測比較困難［3］。本次調查了信陽市七縣兩區113個不同規模豬場，能夠代表我市Hps的感染情況。從檢測結果來看，副豬嗜血桿菌在我市豬場中場感染率為62.8%，說明該病在我市普遍存在，這與吳鳳筍等［2］2012年調查的河南省部分豬場感染率41.7%(25/60)高將近20個百分點，低于新疆石河子(91.67%)［4］、河北唐山(100%)［5］很多。本次調查3 589份樣品，平均個體感染率為21.0%，比吳鳳筍等［2］2012年調查的河南省部分豬場感染率31.25%低10個百分點，比王海玉［6］2014年調查的河南洛陽感染率47.2%低20多個百分點，比韓瑞明［7］調查的河南濮陽的14.8%高6個百分點;與國內其他省份相比，低于新疆石河子(60.30%)［4］、河北唐山(52.30%)［5］，高于福建(6.5%)［8］、四川(10%)［9］、重慶渝西地區(12.75%)［10］，與廣東(23.8%)［12］、青海(25.19%)［13］相近。分析造成信陽市副豬嗜血桿菌感染率較高的原因:一是盲目引種，而對所引豬群健康狀況缺少了解;二是飼養管理水平不高，我市大部分豬場規模不大，缺乏有效的生物安全管理措施，應激發病因素較大;三是重治療輕防疫。

3．2 本次調查的5個生長不同階段豬群均有Hps陽性檢出。母豬、公豬、哺乳仔豬、保育豬及育肥豬陽性率分別為21.8%、19.9%、18.3%、23.9%和19.9%，保育豬感染率最高，但不同階段豬群陽性率差異不顯著(P=0.07，P＞0.05)。臧瑩安［11］的研究發現，母豬、保育豬和育肥豬陽性率分別為31%、29%、33.6%，育肥豬陽性率高于其他階段豬群;逯忠新［12］調查結果顯示，后備母豬感染率最高，為35.56%，其次為育肥豬的32%和保育豬的31.58%;馮小明［9］的研究表明，保育豬感染率最高，為25%，與本次調查結果相近。Hps雖然感染率較高，但在大群臨床上不表現明顯癥狀，基本上都是隱性感染，主要在育肥和保育階段發病較多，出現四肢關節腫大及多發性漿膜炎，如果混合感染圓環病毒或藍耳病，則會出現皮膚藍紫色、咳嗽、氣喘等癥狀。分析造成該階段豬群Hps發病較多的原因如下:1，當前免疫抑制性疾病在豬場普遍存在，如PCV-2、PRRS及PR等，會使豬群的抵抗力和免疫力下降，從而造成副豬嗜血桿菌病的發生;2，更換飼料、斷奶、氣候變化及轉群等應激因素都可誘發Hps的發生。

3．3 從本次調查結果看，Hps一年四季均可感染豬群，7－9月份感染率最高，12－3月份感染率最低，不同月份間有差異，但差異不大。臧瑩安［11］的研究發現，冬季Hps陽性檢出率高于秋季;馮小明［9］的調查顯示，Hps發病率秋冬季節明顯要高于夏秋季節，均與本次調查結果不同。分析信陽市Hps感染率夏季高于秋冬季節原因:本市豬場規模不大，環境條件較差，技術設施落后，缺乏有效的保溫、降溫、降濕及通風設備;免疫程序混亂，購買的種豬往往攜帶有病原體;夏季高溫高濕，豬群易受外界不良環境影響，誘發嚴重的應激，造成發病。

3．4 鑒于副豬嗜血桿菌病對養豬業的危害，我們必須采取綜合性措施來防控該病的發生:對副豬嗜血桿菌病發病較嚴重的豬場實施免疫接種。目前，市場上國內外廠家生產的Hps疫苗眾多，Hps的血清型比較多，目前已知有15個血清型，且不同血清型的菌株之間缺乏交叉保護，因此選擇適合本場血清型的疫苗非常重要。改善飼養管理條件。豬群實行“全進全出”的生產模式，調整飼養密度、減少應激、加強場舍及豬場周圍環境的消毒，發現發病豬只立即淘汰、隔離飼養直至出欄。選擇敏感性藥物(如阿莫西林、替米考星等)定期給全群預防性投用，對于耐藥性豬場，可以通過藥敏試驗篩選適合本場的藥物。

［1］王建，邵衛星，呂占軍，等．2012年我國部分省市規模化豬場副豬嗜血桿菌分離鑒定及菌株血清分型［J］．動物醫學進展，2014，35(3):48-52．

［2］吳鳳筍，李文剛，張桂云，等．河南副豬嗜血桿菌病流行病學調查［J］．中國獸醫雜志，2012，48(10):9-12．

［3］Ikjae Kang，Duyeol Kim，Kiwon Han，et al．Optimized protocol for multiplex nested polymerase chain reaction to detect and differentiate Haemophilus parasuis，Streptococcus suis，and Mycoplasma hyorhinis in formalin-fixed，paraffin-embedded tissues from pigs with polyserositis［J］．Can J Vet Res，2012，76(3):195-200．

［4］李大明，聶疆，李石，等．石河子部分規模豬場副豬嗜血桿菌病的血清學調查［J］．黑龍江畜牧獸醫，2012，17:95-96．

［5］李天艷，穆懷明，張子佳，等．唐山地區規模豬場副豬嗜血桿菌病流行情況調查［J］．中國動物保健，2012，08:17-19．

［6］王海玉．洛陽地區副豬嗜血桿菌病的血清流行病學調查分析［J］．河南農業，2014，11:45-46．

［7］韓瑞明．河南省濮陽市副豬嗜血桿菌病的診斷與防治［D］．南京:南京農業大學，2007．

［8］賀英，趙萍，儲岳峰，等．福建省部分地區副豬嗜血桿菌病的流行病學調查［J］．貴州農業科學，2010，02:130-131．

［9］馮小明，薛慧文，儲岳峰，等．四川省部分地區副豬嗜血桿菌血清學調查［J］．貴州農業科學，2009，08:135-136+139．

［10］魏光河，黃偉．重慶市渝西地區副豬嗜血桿菌的血清學調查及藥敏比較試驗［J］．中國獸醫科學，2012，42(12):1302-1308．

［11］臧瑩安，龐木生，黃彩梅，等．廣東部分豬場副豬嗜血桿菌病的流行病學調查［J］．中國獸醫雜志，2012，48(4):18-20．

［12］逯忠新，高鵬程，賀英，等．青海省部分地區副豬嗜血桿菌流行病學研究［J］．華北農學報，2009，S1:236-239．

S852．61

B

0529-6005(2017)01-0039-04

2015-12-31

信陽市科技攻關項目

馬超鋒(1981-)，男，高級獸醫師，碩士，主要從事動物疫病防治工作，E-mail:machaofeng5@163．com