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花生組分對(duì)常壓等離子體降解黃曲霉毒素B1的影響

2017-03-30 01:55:49任翠榮肖軍霞王世清姜文利
糧油食品科技 2017年2期
關(guān)鍵詞:體系

任翠榮,肖軍霞,王世清,姜文利,張 巖,劉 真

(青島農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院,山東青島 266109)

花生組分對(duì)常壓等離子體降解黃曲霉毒素B1的影響

任翠榮,肖軍霞,王世清,姜文利,張 巖,劉 真

(青島農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院,山東青島 266109)

采用常壓等離子體技術(shù)處理黃曲霉毒素B1(AFB1),探究花生中的水分、蛋白質(zhì)、脂肪酸、白藜蘆醇、VE等組分對(duì)常壓等離子體降解AFB1的影響。結(jié)果表明:純乙腈體系中的AFB1在170 V等離子處理100 s時(shí)的降解率為62.5%,分別加入6%的水分、25%的花生蛋白、4 mg/100 g的白藜蘆醇、40 mg/100 g的VE、脂肪酸(含油酸、亞油酸和棕櫚酸)以及多組分混合物后,AFB1的降解率分別為72.25%、51.6%、60.12%、52.63%、58.3%和51.08%。與純乙腈體系相比,添加水分后,AFB1的降解率升高9.75%,而添加其它組分后,AFB1的降解率都有所降低。因此,利用常壓等離子技術(shù)降解AFB1時(shí),花生組分對(duì)降解率有不同程度的影響,這對(duì)實(shí)際應(yīng)用有一定的參考價(jià)值。

常壓等離子體;花生組分;黃曲霉毒素B1;降解率

花生是我國(guó)油料中的優(yōu)勢(shì)出口產(chǎn)品,年出口總量居世界第一位,占世界市場(chǎng)份額的35%[1]?;ㄉ鸂I(yíng)養(yǎng)豐富,每100 g花生中含水分6 g,蛋白質(zhì)25 g,油酸35 g,亞油酸45 g,棕櫚酸12 g,白藜蘆醇4 mg,VE40 mg[2]。但是,花生出口還存在比較嚴(yán)重的問(wèn)題,主要是由于花生及其制品的黃曲霉毒素(Aflatoxins,AFT)含量有時(shí)超標(biāo),AFT含量是關(guān)鍵質(zhì)量安全檢驗(yàn)指標(biāo),且限量要求越來(lái)越嚴(yán)格,我國(guó)規(guī)定花生及制品中黃曲霉毒素B1(Aflatoxin Bl,AFBl)含量不得超過(guò)20 μg/kg[3-4]。歐盟規(guī)定花生及制品中AFB1含量不得超過(guò)2 μg/kg,AFT總量不得超過(guò)4 μg/kg[5]。AFT是由黃曲霉和寄生曲霉所產(chǎn)生的一種次生代謝物,依據(jù)其化學(xué)結(jié)構(gòu)的不同,產(chǎn)生的衍生物有20余種,其中最常見(jiàn)的有AFB1、黃曲霉毒素B2(AflatoxinB2,AFB2)、黃曲霉毒素G1(Aflatoxin Gl,AFG1)、黃曲霉毒素G2(Aflatoxin G2,AFG2)、黃曲霉毒素Ml(Aflatoxin M1,AFM1)五種[6],其中AFB1毒性最強(qiáng),被世界衛(wèi)生組織(WHO)列為一級(jí)致癌物[7-9]。因此,AFB1的降解研究越來(lái)越受到關(guān)注。

國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)AFT的脫除方法進(jìn)行了大量研究,目前降解AFB1的常用方法有物理法、化學(xué)法和生物法[10-11],但大部分方法存在反應(yīng)機(jī)制可逆、有機(jī)溶劑殘留、工藝復(fù)雜難以推廣等問(wèn)題,這些都限制了其在實(shí)際生產(chǎn)中的應(yīng)用[12-13]。本課題組自2007年以來(lái),采用低壓等離子體技術(shù)處理AFB1,取得了初步的成效。張巖等研究發(fā)現(xiàn),120 W的減壓等離子體處理乙腈中AFB1時(shí),其降解率達(dá)99.8%[14],且降解率均隨等離子體處理功率的增大而增加。李玉鵬等利用低壓等離子體技術(shù)有效降解農(nóng)產(chǎn)品中的AFB1,但比純水或純乙腈中的AFB1的降解率低[15]。這說(shuō)明減壓等離子體對(duì)溶劑體系和農(nóng)產(chǎn)品中的AFB1均具有降解作用。近些年出現(xiàn)的常壓等離子體技術(shù)發(fā)展勢(shì)頭逐漸勝過(guò)了傳統(tǒng)的低壓等離子體技術(shù),因?yàn)榍罢邿o(wú)需使用真空設(shè)備,且能夠處理大面積物件,所以更適合實(shí)際生產(chǎn)線。

本研究采用的常壓等離子體是通過(guò)電暈放電、輝光放電、介質(zhì)阻擋放電等產(chǎn)生,其氣體溫度接近或略高于室溫,在不影響熱敏物質(zhì)的基礎(chǔ)上可以高效殺菌[16]。由于其設(shè)備投資少,能夠連續(xù)化生產(chǎn),又可以節(jié)省資源,環(huán)保無(wú)公害,所以大氣壓低溫等離子體在材料表面改性、生物醫(yī)學(xué)、臭氧生成和殺菌消毒等領(lǐng)域有著廣泛應(yīng)用[17-19]。但是,等離子體在降解花生AFB1的過(guò)程中,花生的各種組分可能會(huì)影響降解過(guò)程。本研究利用常壓等離子體降解AFB1,探究花生組分中水分、蛋白質(zhì)、油酸、亞油酸、棕櫚酸等對(duì)AFB1降解率的影響,以期為等離子體處理技術(shù)在實(shí)際中的應(yīng)用提供理論支撐。清洗器:德國(guó)艾爾瑪公司。

1.3 實(shí)驗(yàn)裝置

實(shí)驗(yàn)裝置,由中國(guó)科學(xué)院等離子體物理研究所制作,該裝置由氬氣瓶、超凈工作臺(tái)、等離子體發(fā)生器等部分組成,見(jiàn)圖1。

圖1 常壓等離子體裝置圖

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

AFB1:美國(guó)Sigma公司;乙腈(色譜純):德國(guó)默克公司;花生蛋白質(zhì)粉:遼寧虹螺健康食品有限公司;油酸:天津巴斯夫化工有限公司;亞油酸:天津市光復(fù)精細(xì)化工研究所;棕櫚酸:天津博迪化工股份有限公司;白藜蘆醇:上海麥克林生化科技有限公司;VE:上海鶴善實(shí)業(yè)有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

常壓等離子體:中國(guó)科學(xué)院等離子體物理研究所;0.22 μm針筒式濾膜過(guò)濾器:天津市津騰實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司;一次性無(wú)菌注射器:侯馬市康福萊醫(yī)療器械有限公司;Agilent 1100型HPLC液相色譜儀:美國(guó)Agilent公司;Elmasonic S900H通用型超聲波

1.4 實(shí)驗(yàn)方法

1.4.1 常壓等離子體處理電壓對(duì)不同花生組分中AFB1降解率的影響

用乙腈配制成濃度為10 mg/L的AFB1溶液,分別與一定量的水、花生蛋白、油酸、亞油酸、棕櫚酸、白藜蘆醇、VE以及多組分混合物(水、花生蛋白、油酸、亞油酸、棕櫚酸、白藜蘆醇和VE的混合物)混合均勻,控制水分含量為6%、花生蛋白含量為25%、油酸含量為35%、亞油酸含量為45%、棕櫚酸含量為12%、白藜蘆醇含量為4 mg/100 g、VE含量為40 mg/100 g,置于常壓等離子體上進(jìn)行處理,電壓分別設(shè)定為150、155、160、165和170 V,放電時(shí)間為100 s,同時(shí)設(shè)純乙腈體系作為對(duì)照組。

1.4.2 花生組分含量對(duì)AFB1降解率的影響

1.4.2.1 水分含量對(duì)常壓等離子體降解AFB1的影響

用乙腈配制成濃度為10 mg/L的AFB1溶液,取5 mL AFB1溶液與不同含量的水分混合均勻,控制水分含量分別為3%、6%、9%、12%,置于170 V常壓等離子體上處理100 s后,測(cè)定AFB1降解率。

1.4.2.2 花生蛋白含量對(duì)常壓等離子體降解AFB1的影響

用乙腈配制成濃度為10 mg/L的AFB1溶液,取5 mL AFB1溶液與不同含量的花生蛋白混合均勻,控制花生蛋白含量分別為10%、20%、30%、40%,置于170 V常壓等離子體上處理100 s后,測(cè)定AFB1降解率。

1.4.2.3 油酸含量對(duì)常壓等離子體降解AFB1的影響

用乙腈配制成濃度為10 mg/L的AFB1溶液,取5 mL AFB1溶液與不同含量的油酸混合均勻,控制油酸含量分別為10%、20%、30%、40%,置于170 V常壓等離子體上處理100 s后,測(cè)定AFB1降解率。

1.4.2.4 亞油酸含量對(duì)常壓等離子體降解AFB1的影響

用乙腈配制成濃度為10 mg/L的AFB1溶液,取5 mL AFB1溶液與不同含量的亞油酸混合均勻,控制亞油酸含量分別為15%、30%、45%、60%,置于170 V常壓等離子體上處理100 s后,測(cè)定AFB1降解率。

1.4.2.5 棕櫚酸含量對(duì)常壓等離子體降解AFB1的影響

用乙腈配制成濃度為10 mg/L的AFB1溶液,取5 mL AFB1溶液與不同含量的棕櫚酸混合均勻,控制棕櫚酸含量分別為6%、12%、18%、24%,置于170 V常壓等離子體上處理100 s后,測(cè)定AFB1降解率。

1.4.2.6 白藜蘆醇含量對(duì)常壓等離子體降解AFB1的影響

用乙腈配制成濃度為10 mg/L的AFB1溶液,取5 mL AFB1溶液與不同含量的白藜蘆醇混合均勻,控制白藜蘆醇含量分別為2、4、6、8 mg/100 g,置于170 V常壓等離子體上處理100 s后,測(cè)定AFB1降解率。

1.4.2.7 VE含量對(duì)常壓等離子體降解AFB1的影響

用乙腈配制成濃度為10 mg/L的AFB1溶液,取5 mL AFB1溶液與不同含量的VE混合均勻,控制VE含量分別為20、40、60、80 mg/100 g,置于170 V常壓等離子體上處理100 s后,測(cè)定AFB1降解率。

1.5 樣品檢測(cè)器前處理

取2 g未經(jīng)常壓等離子體和經(jīng)過(guò)常壓等離子體處理的樣品于離心管中,用適量石油醚分?jǐn)?shù)次溶解,再用10 mL乙腈—水溶液(60∶40,V/V)萃取,4 000 r/min離心5 min,吸取乙腈—水層于第二個(gè)離心管中,將原離心管中樣品再用乙腈—水萃取一次,合并乙腈—水溶液于第二個(gè)離心管中,用20 mL三氯甲烷萃取兩次,合并三氯甲烷,氮吹濃縮至干,分別加入2 mL乙腈溶液溶解,過(guò)有機(jī)相濾膜后,用高效液相色譜儀進(jìn)行測(cè)定。

1.6 AFB1含量的測(cè)試方法

1.6.1 HPLC法的色譜條件

用Agilent液相系統(tǒng)進(jìn)行測(cè)定。色譜柱為Waters Symmetry-C18(4.6 mm×250 mm,粒度5 μm);柱溫為30℃;流動(dòng)相為V(乙腈)∶V(水)=30∶70;流速為1 mL/min;進(jìn)樣量為20 μL;檢測(cè)器為紫外檢測(cè)器;激發(fā)波長(zhǎng)為365 nm;發(fā)射波長(zhǎng)為440 nm。

1.6.2 AFB1降解率的計(jì)算

AFB1降解率計(jì)算公式為:

1.7 數(shù)據(jù)分析

2 結(jié)果與分析

2.1 常壓等離子體處理電壓對(duì)不同花生組分中AFB1降解率的影響

2.1.1 常壓等離子體處理電壓對(duì)水分、花生蛋白、白藜蘆醇、VE中AFB1降解率的影響

常壓等離子體處理電壓對(duì)水分、花生蛋白、白藜蘆醇、VE中AFB1降解率的影響見(jiàn)圖2。由圖2可知,含有水分的體系中AFB1的降解效果要比純乙腈體系中的好。在170 V、100 s的處理?xiàng)l件下,水體系中AFB1的降解率為72.25%,與純乙腈體系相比,AFB1的降解率增加9.75%,這說(shuō)明添加水分有利于AFB1的降解。原因可能有兩方面:一是水分與常壓等離子體發(fā)生了相互作用,產(chǎn)生了更多能夠促使AFB1降解的游離基,如氫離子等[20];二是水分與AFB1結(jié)合,破壞了氫鍵,從而減少分子間的引力,增大分子間的距離,促進(jìn)了等離子體與AFB1發(fā)生作用。

圖2 含有水分、花生蛋白、白藜蘆醇和VE的體系中AFB1的降解曲線

添加花生蛋白后,170 V下進(jìn)行100 s的處理時(shí),AFB1的降解率為51.6%。含有花生蛋白的體系中AFB1的降解率要比純乙腈體系中的低。這是因?yàn)樵诘入x子體產(chǎn)生的過(guò)程中,由于輝光放電,可放出大量紫外線,紫外線可以破壞蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)[21],即在本實(shí)驗(yàn)條件下,花生蛋白發(fā)生了變性,與常壓等離子體釋放的活性粒子結(jié)合,干擾了活性粒子與AFB1之間的相互作用,使得AFB1的降解率低于純乙腈體系中AFB1的降解率。

添加白藜蘆醇后,在170 V、100 s的處理?xiàng)l件下,AFB1的降解率為60.12%。與純乙腈體系相比,含有白藜蘆醇的體系中AFB1的降解效果較差,但隨著電壓的增加,兩者的降解效果逐漸接近。原因是白藜蘆醇是一種抗氧化劑,可清除常壓等離子體釋放的部分活性粒子,阻礙更多的活性粒子與AFB1結(jié)合,從而抑制了AFB1的降解,但是由于花生中白藜蘆醇的含量很少,隨著處理電壓的增加,噴出的等離子體能量、密度升高,白藜蘆醇與活性粒子的作用變小,即含有白藜蘆醇的乙腈體系與純乙腈體系的降解效果逐漸一致。

添加VE后,170 V下進(jìn)行100 s的處理時(shí),AFB1的降解率為52.63%。含有VE的乙腈體系中AFB1的降解效果要比純乙腈體系中的差。推測(cè)原因可能為VE具有清除自由基的作用,常壓等離子體釋放的部分帶電粒子被清除,阻礙了AFB1與帶電粒子的結(jié)合。

2.1.2 常壓等離子體處理電壓對(duì)脂肪酸、多組分混合物中AFB1降解率的影響

常壓等離子體處理電壓對(duì)脂肪酸、多組分混合物中AFB1降解率的影響見(jiàn)圖3。由圖3可知,添加亞油酸或添加油酸在同一處理電壓下對(duì)AFB1降解率的影響基本一致,差異不顯著(P>0.05)。與純乙腈體系相比,含有油酸或亞油酸的乙腈體系中AFB1的降解率都有所下降。原因可能是油酸和亞油酸都屬于不飽和脂肪酸,經(jīng)常壓等離子體處理后,在部分活性粒子的沖擊下,發(fā)生了氧化反應(yīng),導(dǎo)致活性粒子與AFB1的接觸密度變小。添加棕櫚酸后,AFB1的降解率隨著處理電壓的增大而增加,與純乙腈體系相比,AFB1的降解率減少10%左右,差異顯著(P<0.05)。原因可能是棕櫚酸為飽和脂肪酸,性質(zhì)較穩(wěn)定,含AFB1的乙腈體系中添加棕櫚酸后,會(huì)導(dǎo)致AFB1與活性粒子的接觸面積減少,從而引起降解率的降低。同時(shí)添加油酸、亞油酸、棕櫚酸三種脂肪酸后,在170 V、100 s的處理?xiàng)l件下,AFB1的降解率為58.3%;隨著處理電壓的增加,AFB1的降解率不斷增大,且其降解曲線與純乙腈體系交叉,交點(diǎn)之前,含有三種混合脂肪酸的體系中AFB1的降解率較高,交點(diǎn)之后,純乙腈體系中AFB1的降解率略高,差異不顯著(P>0.05)。

圖3 含有脂肪酸、多組分混合物的體系中AFB1的降解曲線

添加多組分混合物后,在170 V下進(jìn)行100 s的處理時(shí),AFB1的降解率為51.08%。含有多組分混合物的體系中AFB1的降解率要比純乙腈體系中的降解率低,但兩者在150 V時(shí)的降解率幾乎相等。原因可能是處理電壓較低時(shí),常壓等離子體釋放的帶電粒子較少,很難與復(fù)雜體系中各組分發(fā)生相互作用,只用于AFB1的降解。隨著處理電壓的增大,帶電粒子運(yùn)動(dòng)速度加快,噴出的等離子體密度升高,活性粒子會(huì)與復(fù)雜的組分發(fā)生各種反應(yīng),干擾了AFB1與活性粒子的結(jié)合,使得AFB1的降解率減少[22]。劉真等人利用低壓等離子體降解含有蛋白質(zhì)、脂肪酸、VE的復(fù)雜體系中的AFB1時(shí),在100~300 W的功率下處理4 min,發(fā)現(xiàn)其降解效果比純乙腈體系降解率高,兩者在處理功率為300 W的條件下降解率幾乎相等[23]。與上述報(bào)道相比,本研究中復(fù)雜體系與純乙腈體系中AFB1的降解率不僅沒(méi)有隨著處理電壓的增大而接近,差距反而逐漸增大,這可能是由于本實(shí)驗(yàn)的復(fù)雜體系中還添加了水分、白藜蘆醇等物質(zhì),這些物質(zhì)在常壓等離子體降解多組分混合物體系中的AFB1時(shí)發(fā)揮了主導(dǎo)作用。

2.2 花生組分含量對(duì)AFB1降解率的影響

2.2.1 水分含量對(duì)常壓等離子體降解AFB1的影響水分添加量對(duì)常壓等離子體降解AFB1的影響見(jiàn)圖4。圖4顯示,水分含量越高,AFB1的降解率越大,降解效果越顯著(P<0.05)。這表明,水分參與了常壓等離子體降解AFB1的過(guò)程,水分含量的增加有利于AFB1降解率的提升,這與Hooshmand H等人用γ射線對(duì)小麥、大豆中AFB1進(jìn)行降解研究時(shí)得到的結(jié)果一致[24]。

圖4 不同水分含量下AFB1的降解率

2.2.2 花生蛋白含量對(duì)常壓等離子體降解AFB1的影響

花生蛋白添加量對(duì)常壓等離子體降解AFB1的影響見(jiàn)圖5。圖5顯示,在170 V、100 s的處理?xiàng)l件下,隨著花生蛋白含量的升高,AFB1的降解率逐漸降低。該現(xiàn)象說(shuō)明花生蛋白對(duì)AFB1的降解具有抑制作用,且花生蛋白的含量越高,抑制作用越明顯。原因可能是花生蛋白的含量越高,使得AFB1接觸到的等離子體能量密度越小,AFB1的降解率就會(huì)降低。結(jié)果表明,花生蛋白含量對(duì)AFB1的降解率有顯著影響。

圖5 不同花生蛋白含量下AFB1的降解率

2.2.3 脂肪酸含量對(duì)常壓等離子體降解AFB1的影響

脂肪酸添加量對(duì)常壓等離子體降解AFB1的影響見(jiàn)圖6~圖8。圖6顯示,隨著油酸含量的增加,AFB1的降解率不斷減少,油酸含量對(duì)AFB1的降解率有顯著性影響(P<0.05)。原因可能是在常壓等離子體處理的電壓一定時(shí),噴出的等離子體能量一定,隨著油酸含量的增大,更多的等離子能量用于油酸的氧化,只有少部分用于AFB1的降解,導(dǎo)致AFB1的降解率降低。圖7顯示,隨著亞油酸含量的增加,AFB1的降解率不斷減少,亞油酸含量對(duì)AFB1的降解率有顯著性影響(P<0.05)。由于亞油酸與油酸的性質(zhì)相近,所以推測(cè)原因可能是因?yàn)檩^多的等離子體能量用于亞油酸的氧化,導(dǎo)致AFB1降解率減少。圖8顯示,棕櫚酸含量越高,AFB1的降解率越低。棕櫚酸含量對(duì)AFB1的降解率有顯著影響(P<0.05),隨著棕櫚酸含量的提高,AFB1與常壓等離子體釋放的帶電粒子之間的相互作用減弱,AFB1的降解受到抑制。

圖6 不同油酸含量下AFB1的降解率

圖7 不同亞油酸含量下AFB1的降解率

圖8 不同棕櫚酸含量下AFB1的降解率

2.2.4 白藜蘆醇含量對(duì)常壓等離子體降解AFB1的影響

白藜蘆醇添加量對(duì)常壓等離子體降解AFB1的影響見(jiàn)圖9。圖9顯示,隨著白藜蘆醇添加量的增大,AFB1的降解率逐漸減小,白藜蘆醇的含量顯著影響AFB1的降解率(P<0.05)。原因可能是白藜蘆醇具有良好的清除自由基的作用,清除能力隨其濃度的增加而升高,即白藜蘆醇含量越高,清除常壓等離子體釋放的帶電粒子的能力越強(qiáng),AFB1的降解率越低[25]。

圖9 不同白藜蘆醇含量下AFB1的降解率

2.2.5 VE含量對(duì)常壓等離子體降解AFB1的影響

常壓等離子體對(duì)含有VE的體系中的AFB1進(jìn)行降解處理,實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)圖10。圖10顯示,隨著VE含量的增加,AFB1的降解率逐漸降低(P<0.05),這說(shuō)明VE的含量越高,對(duì)AFB1降解的抑制作用越大。

圖10 不同VE含量下AFB1的降解率

3 結(jié)論

本研究考察了花生組分中水分、花生蛋白、花生油脂、白藜蘆醇等對(duì)AFB1降解效果的影響,運(yùn)用高效液相色譜儀分析AFB1的降解率。結(jié)果顯示:純乙腈體系中的AFB1在170 V等離子處理100 s時(shí)的降解率為62.5%,分別加入6%的水分、25%的花生蛋白、4 mg/100 g的白藜蘆醇、40 mg/100 g的VE、脂肪酸后,AFB1的降解率分別為72.25%、51.6%、60.12%、52.63%和58.3%。與純乙腈體系相比,添加水分后,AFB1的降解率升高9.75%,而添加其它組分后,AFB1的降解率都有所降低。加入多組分混合物后,在155~170 V下處理100 s時(shí),含有多組分混合物的體系中AFB1的降解率要比純乙腈體系中的降解率低,兩者在150 V時(shí)的降解率幾乎相等。因此,花生組分會(huì)對(duì)常壓等離子體降解黃曲霉毒素B1產(chǎn)生影響,這為實(shí)際應(yīng)用提供了參考依據(jù)。

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Effect of peanut components on the degradation of aflatoxin B1treated by atmospheric pressure plasma

REN Cui-rong,XIAO Jun-xia,WANG Shi-qing,JIANG Wen-li,ZHANG Yan,LIU Zhen
(College of Food Science and Engineering,Qingdao Agricultural University,Qingdao Shandong 266109)

The effect of peanut moisture,protein,fatty acid,resveratrol and vitamin E on the degradation of AFB1treated by atmospheric pressure plasma was explored.The results showed that the degradation rate of AFB1reached to 62.5%in pure acetonitrile system by plasma of 170 V for 100 s.Then after adding 6%water,25%peanut protein,4 mg/100 g resveratrol,40 mg/100 g vitamin E,fatty acid(oleic acid,linoleic acid and palmitic acid)and multicomponent mixtures,the degradation rate of AFB1were 72.25%,51.6%,60.12%,52.63%,58.3%and 51.08%,respectively.Compared with the pure acetonitrile system,the degradation rate of AFB1increased by 9.75%after adding water,while the degradation rates of AFB1decreased after adding other components.Therefore peanut components have effect on the degradation rate of AFB1,and have a guiding role in practical application.

atmospheric pressure plasma;peanut components;aflatoxin B1;degradation rate

S 565.2

A

1007-7561(2017)02-0028-06

2016-08-25

國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(31271963)

任翠榮,1992年出生,女,碩士研究生.

王世清,1961年出生,男,教授.

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