胃癌患者血清VEGF-C、VEGF-D濃度水平與淋巴結轉移狀態相關性的臨床研究

徐冬冬,王大廣,所 劍

(吉林大學白求恩第一醫院 胃結直腸肛門外科,吉林 長春130021)

*通訊作者

胃癌患者血清VEGF-C、VEGF-D濃度水平與淋巴結轉移狀態相關性的臨床研究

徐冬冬,王大廣,所 劍*

(吉林大學白求恩第一醫院 胃結直腸肛門外科,吉林 長春130021)

胃癌是臨床常見惡性腫瘤之一,位居所有惡性腫瘤第2位[1]。淋巴結轉移是其惡性生物學行為之一,與胃癌患者的分期、預后密切相關,同時也是臨床上決定是否給予進一步治療的依據。目前對淋巴結轉移狀態準確判斷是術后病理分期。但如何能在術前對淋巴結轉移狀態進行判斷是臨床研究的熱點。血管內皮生長因子(VEGF)是一種內皮調控因子,其中VEGF-C、VEGF-D在新生淋巴管的形成上發揮重要的作用。此文旨在探究胃癌與健康志愿者、相同T分期不同淋巴結轉移狀態下VEGF-C、VEGF-D的差異性,以期尋找可預測淋巴結轉移狀態的指標。

1 資料和方法

1.1 一般資料 本研究中實驗組血清樣本來自2008年8月至2012年8月吉林大學第一醫院胃腸外科的手術患者。術前明確診斷為胃癌,且初發腫瘤、癌灶單發、無遠處轉移、術前未接受治療、無明顯急性炎癥反應、術前檢查未見明顯異常。其中45例患者術后病理確認為T2N0期10例、T2Nx期35例。對照組來自20例健康自愿者。所有受試者血液采集均在術前一日,空腹采肘靜脈血,血樣采集后離心取上清,于-80℃下冰凍保存,室溫下解凍使用。

1.2 方法 使用人VEGF-C、VEGF-D檢測試劑盒(上海源葉生物科技有限公司)檢測血清VEGF-C、VEGF-D的濃度水平,設置12個標準孔,樣本和標準品均進行雙孔檢測取平均值。嚴格按照試劑說明書進行,稀釋倍數5倍,測定各孔在450 nm下的光密度值。根據標準曲線得出VEGF-C、VEGF-D的濃度水平。

1.3 統計學處理 采用 SPSS 17.0 軟件對所得數據進行統計分析。胃癌患者和健康人的血清VEGF-C、VEGF-D濃度水平分布情況未知。相關文獻也未見相關介紹。因此首先應用統計分析軟件Shapiro-Wilk法對樣本進行正態性檢驗,本研究計量資料符合正態分布,計量資料用 (x—±s) 表示,采用t檢驗。檢驗水準定為0.05,P<0.05認為有統計學差異。

2 結果

2.1 胃癌患者血清VEGF-C、D的濃度分別為233.3±127.9 pg/ml、268.3±133.0 pg/ml。健康成人VEGF-C、D的濃度分別92.83±37.00 pg/ml、128.3±64.7 pg/ml。VEGF-C、D在胃癌患者和健康人間,差異均有統計學意義(P<0.05),見表1。

表1 胃癌患者和健康人VEGF-C、VEGF-D濃度水平(pg/ml)

2.2 胃癌患者血清VEGF-C、D濃度與臨床病理學特征相關性分析 T2期胃癌患者血清VEGF-C、D濃度水平與性別、年齡、腫瘤大小、腫瘤位置、病理類型無關,但在淋巴結轉移陽性和陰性之間差異有統計學意義(P<0.05),見表2。

3 討論

VEGF-C和D是VEGF家族的新成員,VEGF-C是 1996 年由Joukov V[1]首次克隆并分離出的 VEGF 家族的一個新成員,由于其是第一個具有誘導淋巴管生成作用的生長因子,故也被稱為淋巴管生長因子[1]。VEGF-D 是 1998 年由Achen[2]在核酸數據庫中通過同源性搜索發現的第二個淋巴管生長因子。VEGF-C、D是高度糖基化的堿性蛋白,對血管內皮細胞有高度特異性,通過內皮細胞的特異性受體刺激血管內皮細胞增殖和毛細血管袢形成,不僅參與了腫瘤血管的發生、增殖,還直接參與了腫瘤的浸潤、轉移。研究表明VEGF-C和D與淋巴管內皮細胞上的VEGFR-3受體結合,促進淋巴管再生,進而促進腫瘤淋巴結轉移[3,4]。目前,人們對胃癌組織中VEGF-C和D與腫瘤侵潤、淋巴轉移有較一致意見,胃癌組織中 VEGF-C和D的表達水平明顯高于正常組織,表明 VEGF 與 胃癌進展及預后密切相關[5]。Watanabe等[6]證實 VEGF-Cm RNA 水平與胃癌患者淋巴結轉移顯著性相關,VEGF-C 蛋白表達水平與術后淋巴結組織內淋巴管密度呈正比,提示 VEGF-C 可能參與胃癌淋巴管生成并加速淋巴結轉移。但有關胃癌血清中VEGF-C和VEGF-D水平與胃癌淋巴轉移的關系研究較少。

表2 T2期胃癌患者血清VEGF-C、VEGF-D濃度水平與臨床病理學特征相關性分析

為控制淋巴結轉移為單一變量,本研究選取實驗組血清樣本均為T2期,參照國際抗癌聯盟(UICC)的2010第7版分期,包括T2N0、T2N1、T2N2、T2N3。結果表明,T2期胃癌患者血清VEGF-C、D與健康成人對照組有顯著差異。進一步分析實驗數據,相同浸潤深度,但不同淋巴結轉移狀態的T2N0和T2Nx之間血清VEGF-C、D亦有顯著差異。而VEGF-C、D在不同年齡、性別、腫瘤大小、腫瘤位置、分化類型組別上無統計差異。這一結果提示我們,術前聯合測定VEGF-C和VEGF-D可能成為預測淋巴結轉移的輔助指標之一。對手術和治療方案的選擇有一定的臨床意義。

與其他腫瘤一樣,胃癌的發生發展與許多基因、蛋白有關系。臨床一線的外科醫生希望尋找的一種特異的標志物來對淋巴結轉移狀態進行預測,以決定手術方式、評估胃癌的發展和預后。但目前尚未發現一個高敏感性、高特異性的標志物。近年新興的有關胃癌蛋白質組學、代謝組學的相關研究可能為尋找特異性的標志物開辟新的途徑。

[1]Van Cutsem E.Treatment of advanced gastric cancer：new findings on the activiti of the taxanes[J].The Oncologist,2004,9(12):9.

[2]Joukov V,K Pajusola,A Kaipainen,et al.A novel vascular endothelial growth factor,VEGF-C,is a ligand for the Flt-4 (VEGFR-3) and KDR(VEGFR-2) receptor tyrosine kinases[J].The EMBO journal,1996,15(2):290.

[3]Achen MG,Jeltsch M,Kukk E,et al.Vascular endothelial growth factor D(VEGF-D) is a ligand for the tyrosine kinases VEGF receptor 2(Flk-1) and VEGF receptor 3 (Flt-4)[J].Proc Natl Acad Sci USA,1998,95(2):548.

[4]Kukk E,Lymboussaki A,Taira S,et al.VEGF-C receptor binding and pattern of expression with VEGFR-3 suggests a role in lymphatic vascular development[J].Development,1996,122(2):3829.

[5]He Y,Rajantie I,Pajusola K,et al.Vascular endothelial cell growth factor receptor 3-mediated activation of lymphatic endothelium is crucial for tumor cell entry and spread via lymphatic vessels[J].Cancer Research,2005,65(11):4739.

[6]Zhao DQ,Chen J,Wu YF,et al.Correlation between vascular endothelial growth factor and somatostatin receptor with progression and prognosis in gastric cancer[J].Hepatogastroenterology,2014,61(132):1154.

[7]Watanabe M,Tanaka H,Ohira M,et al.Intranodal lymphangiogenesis precedes development of lymph node metastasis and accelerates progression of gastric cancer[J].Journal of Gastrointestinal Surgery，2014,18(3):481.

1007-4287(2017)03-0492-02

徐冬冬(1990-),男,遼寧遼陽人,吉林大學第一醫院胃結直腸肛門外科,在讀碩士研究生。

2016-04-16)