呋塞米片質量標準提高研究

么世英

（內蒙古自治區呼和浩特市食品藥品檢驗所，內蒙古 呼和浩特 010020）

·檢驗檢測·

呋塞米片質量標準提高研究

么世英

（內蒙古自治區呼和浩特市食品藥品檢驗所，內蒙古 呼和浩特 010020）

目的建立測定呋塞米片含量的超高效液相色譜（UHPLC）法。方法采用Shim－pack XR－ODSⅢ C18柱，以水－四氫呋喃－冰醋酸（63∶37∶1）為流動相，檢測波長為272 nm，流速為0．2 mL／min。結果回歸方程為 Y＝6．92×106X－2．88×104，r＝0．999 9(n＝6)，進樣量線性范圍為0．019～0．761 g，平均回收率為100．90%，RSD為1．56%(n＝6)。結論UHPLC法在不影響分離效果的情況下可大大提高分析速度，改善分析效果，可以作為呋塞米片的質量控制標準。

呋塞米；超高效液相色譜法；質量標準

2015年版《中國藥典》[1－2]于2015年12月1日正 式執行，超高效液相色譜（UHPLC）法[3－7]也首次收入《中國藥典》。UHPLC是分離科學的全新類別，與傳統的高效液相色譜(HPLC)法相比，它縮短了分析時間，同時減少了溶劑的使用量，降低了分析成本。隨著新版藥典的實施，該方法必然會越來越多地用于藥品檢驗。呋塞米片是常用的利尿藥，該品種收載于新版藥典，原標準中呋塞米的含量測定采用分光光度法，本試驗通過UHPLC法測定其含量，與常規液相色譜法比較，該方法不僅準確、高效，而且低耗、環保。

1 儀器與試藥

LC－30A型高效液相色譜儀（日本島津公司）。呋塞米對照品（批號為100544－200501，中國藥品生物制品檢定所）；四氫呋喃、乙腈為色譜純，其余試劑均為分析純。

2 方法與結果

2．1 色譜條件與系統適用性試驗

色譜柱：Shim－pack XR－ODSⅢC18柱（75 mm×2．5 mm， 1．6 μm）；流動相：水－四氫呋喃－冰醋酸（63∶37∶1）；柱溫：30℃；檢測波長：272 nm；進樣量：2 μL。理論板數按呋塞米峰計應不低于4 000。

2．2 溶液制備

取本品20片，精密稱定，研細，精密稱取細粉適量（約相當于呋塞米10 mg）置100 mL容量瓶中，加混合溶劑[冰醋酸22 mL，加乙腈－水（1∶1）至1 000 mL]適量，充分振搖使呋塞米溶解，并稀釋至刻度，搖勻，用0．22 μm的濾膜濾過，取續濾液作為供試品溶液。精密稱取呋塞米對照品適量，同法制備，作為對照品溶液。

2．3 方法學考察

陰性干擾試驗：按處方比例制備不含呋塞米的空白片，按擬訂色譜條件進樣測定，結果供試品溶液在對照品溶液相應位置有相同的色譜峰，而陰性對照品溶液則無此色譜峰，陰性無干擾，詳見圖1。

圖1 高效液相色譜圖

線性關系考察：精密稱取呋塞米對照品19．02 mg，置100 mL容量瓶中，用混合溶劑溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液，按擬訂色譜條件分別進樣0．1，0．5，1．0，2．0，3．0，4．0 μL測定，測得峰面積為80 757，644 754，1 286 419，2 624 037，3 927 264，5 227 490。以峰面積（Y）對進樣量（X）進行回歸分析，得回歸方程Y＝6．92×106X－2．88×104，r＝0．999 9（n＝6）。結果表明，呋塞米進樣量在0．019～0．761 μg范圍內與峰面積線性關系良好。

精密度試驗：取同一呋塞米對照品溶液，重復進樣5次，測得呋塞米峰面積分別為1 519 755，1 533 105，1 530 703，1 542 692，1 538 960，平均峰面積為1 533 043，RSD為0．57%（n＝5），表明儀器精密度良好。

穩定性試驗：取同一供試品溶液，分別于0，4，6，12，24 h時進樣5次。測得峰面積依次為1 512 046，1 536 815，1 548 863，1 548 418，1 551 183，平均峰面積為1 539 465，RSD為1．05%（n＝5），表明供試品溶液在24 h內基本穩定。

表1 呋塞米重復性試驗結果（n＝5）

表2 呋塞米加樣回收試驗結果（n＝6）

重復性試驗：取同批一樣品，精密稱取5份，照樣品測定項下方法進樣測定，測得呋塞米的平均含量為95．33%，RSD為 1．21%（n＝5），表明方法重復性良好。詳見表1。

加樣回收試驗：精密稱取已知含量的樣品6份，精密加入呋塞米對照品適量，依法進樣測定，計算回收率。結果見表2。

2．4 樣品含量測定

取3個批號（江蘇亞邦愛普森藥業有限公司，天津力生制藥股份有限公司，安徽云鵬制藥有限公司，產品批號依次為1401003，1408092，140701）的樣品，按擬訂方法進樣測定，結果測得樣品含量分別為 97．4%，95．3%和92．7%。

3 討論

取呋塞米對照品溶液，在200～300 nm波長進行光譜掃描，結果在272 nm波長處有最大吸收[3－5]，故選擇272 nm為測定波長。

[8－15]，分別采用不同比例的水－四氫呋喃－冰醋酸和甲醇－水－磷酸鹽2個系統作為流動相進行分離，結果采用水－四氫呋喃－冰醋酸（63∶37∶1）作為流動相時，保留時間適宜，理論板數較高，分離效果好。

本研究建立的UHPLC法，流速為0．2 mL／min，每個分析周期僅為5 min，不僅縮短了分析時間，而且試劑的消耗僅為常規流動相的1／5，既節約了試劑的消耗，降低了分析成本，又減少了對環境的污染。

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Improvement of Quality Standard for Furosemide Tablets

Yao Shiying
（Hohhot Institute for Food and Drug Control，Hohhot，Neimenggu，China 010020）

Objective To establish a UHPLC method for quantity determination of Furosemide Tablets．Methods Shim－pack XRODSⅢ C18column was adopted．The mobile phase consisted of water－tetrahydrofuran－glacial acetic acid（63∶37∶1），the detection wavelength was 272 nm and the flow rate was 0．2 mL／min．Results The regression equation wasY＝6．92×106X－2．88×104，and the furosemide concentration was linear in the range of 0．019－0．761 μg（r＝0．999 9），the average recovery was 100．90%，RSD was 1．56%(n＝6)．Conclusion The UHPLC method can increase the analysis speed and improve analysis effect on the condition that separation effect had not been influenced．which can be used as one of the quality control measures for Furosemide Tablets．

furosemide；UHPLC；quality control

R983＋，1；R927．2

A

1006－4931(2017)04－0019－03

2016－09－10)

10．3969／j．issn．1006－4931．2017．04．005

么世英，女，主管藥師，主要從事藥品檢驗工作，（電子信箱）hhhtzyq＠sina．com。