溶血、脂血和黃疸對EV71-IgM膠體金法檢測的影響

代春雨473000河南省南陽市第一人民醫院檢驗科

溶血、脂血和黃疸對EV71-IgM膠體金法檢測的影響

代春雨
473000河南省南陽市第一人民醫院檢驗科

目的：探討溶血、脂血和黃疸對EV71-IgM膠體金法檢測的影響。方法：用EV71-IgM膠體金法檢測不同程度溶血、脂血、黃疸EV71-IgM含量3.0 ng/mL的標本。結果：不同濃度膽紅素、不同濃度甘油三酯以及血紅蛋白0.2 g/L、EV71-IgM含量3 ng/mL的標本對EV71-IgM膠體金法檢測影響不明顯(P＞0.05)。血紅蛋白0.6 g/L和0.8 g/L、EV71-IgM含量3 ng/mL的標本對EV71-IgM膠體金法檢測影響顯著(P＜0.01)。結論：重度溶血對EV71-IgM膠體金法檢測的影響很大，輕度溶血、黃疸和脂血對EV71-IgM膠體金法檢測的影響不明顯。

溶血；脂血；黃疸；EV71-IgM膠體金法

EV71-IgM膠體金法檢測簡便、快速和穩定，靈敏度較高，廣泛用于發熱門診和兒科門診等[1，2]。臨床實際操作過程中會出現黃疸、脂血、溶血等特殊情況，其對EV71-IgM膠體金法檢測影響的研究較少。本研究旨在探討溶血、脂血、黃疸對EV71-IgM膠體金法檢測的影響，現將結果報告如下。

資料與方法

儀器與試劑：腸道病毒71-IgM (EV71-IgM)膠體金血清診斷試劑(北京萬泰生物藥業股份有限公司)；金標試紙條智能測定儀(型號：SC-2，福州大學科技開發總公司)；EV71-IgM全血診斷試劑(北京萬泰生物藥業股份有限公司)；EV71-IgM標準質控品(3.0 ng/mL)；酶標試劑(上海研盟生物技術有限公司)；高溶血EV71-IgM陰性患者血漿；高甘油三酯EV71-IgM陰性患者血清；高膽紅素EV71-IgM陰性患者血清；溶血、脂血、黃疸三項指標正常的EV71-IgM陽性患者血清。

方法：以EV71-IgM標準質控品為陽性對照，用酶標法檢測EV71-IgM陽性患者血清EV71-IgM含量。EV71-IgM陽性患者血清用正常人血漿稀釋，使EV71-IgM含量為3.0 ng/mL和1.5 ng/mL兩個樣本，簡稱正3.0和正1.5；用EV71-IgM陽性患者血清同高總膽紅素血清稀釋，使EV71-IgM含量3.0 ng/mL，膽紅素分別為100 μmol/L、200 μmol/L、400 μmol/L、800 μmol/L和1 600 μmol/ L的5個樣本，分別簡稱為TB 100、TB 200、TB 400、TB 800和TB 1 600；用EV71-IgM陽性患者血清用高甘油三酯血清稀釋，使EV71-IgM含量3.0 ng/mL，甘油三酯分別為4 mmol/L、8 mmol/L和16 mmol/L的3個樣本，分別簡稱為TG4、TG8和TG16；EV71-IgM陽性患者血清用高溶血血漿稀釋，使EV71-IgM含量3.0 ng/mL，血紅蛋白含量分別為0.2 g/L、0.4 g/L、0.6 g/L和0.8 g/L的4個樣本，分別簡稱為Hb 0.2、Hb 0.4、Hb 0.6和Hb 0.8。分別用EV71-IgM全血診斷試劑(對照組)和EV71-IgM膠體金血清診斷試劑(試驗組)按照試劑和儀器操作說明測定14個樣本，每種試劑對14個樣本測定20次，用金標試紙條智能測定儀讀出OD值。

結果

不同濃度膽紅素、不同濃度甘油三酯以及血紅蛋白0.2 g/L、EV71-IgM含量3 ng/mL的標本對EV71-IgM膠體金法檢測影響不明顯(P＞0.05)；血紅蛋白0.4 g/L、EV71-IgM 含 量 3 ng/mL的 標 本 對EV71-IgM膠體金法檢測略有影響(P約等于0.05)；血紅蛋白0.6 g/L和0.8 g/L、EV71-IgM 含 量 3 ng/mL的 標 本 對EV71-IgM膠體金法檢測影響顯著(P＜0.01)。見表1。

討論

手足口病是一種常見的多發性傳染病，以小于3歲的嬰幼兒發病為主。多種腸道病毒均能引起手足口病，EV71病毒是其中最主要的一種，一般全年均可發生，5～7月為高發期。手足口病患者癥狀一般較輕，輕癥患者出現發熱、咳嗽、流涕等類似上呼吸道感染的癥狀，發熱1～2 d后開始出現皮疹，通常出現于手足、臀部，或出現口腔皰疹。部分患兒不發熱，只表現為手、足、臀部皮疹或皰疹性咽峽炎，病情較輕，患兒大多數在1周內病情緩解。重癥患者病情進展十分迅速，發病1～5 d會出現精神障礙、循環障礙等，極少數患者病情危重，可致患兒死亡，存活患者可留有后遺癥。手足口病目前沒有專門的疫苗，也沒有專門的特異性強的抗手足口病病毒藥物，但早發現、早治療完全可防可治，患兒檢測血清EV71-IgM可幫助臨床醫生確診手足口病，醫務工作人員應非常重視手足口病的診斷。

表1 兩種試劑對14個樣本測定的平均OD值

本研究發現，重度溶血(血紅蛋白＞0.4 g/L)對EV71-IgM膠體金法檢測的影響很大，輕度溶血、黃疸和脂血對EV71-IgM膠體金法檢測的影響不明顯。因此檢驗科抽血檢測血清EV71-IgM時，務必做到采血順利和促凝管潔凈等，防止標本發生重度溶血，造成假陰性結果，導致漏診誤診，對于重度溶血標本必須重新采血。

溶血、脂血和黃疸是臨床上經常出現的標本現象。大部分溶血現象可通過正確采血和正確保存標本而避免。脂血原因分為飯后采血、自身高血脂。空腹采血可避免飯后采血出現的脂血。黃疸不易改變。但脂血和黃疸對EV71-IgM膠體金法檢測影響非常小。

綜上所述，正確采血和正確保存標本是EV71-IgM膠體金法檢測結果準確、可靠的保證。為避免漏檢、減少因漏檢等引發的醫患糾紛，臨床應注意溶血對弱陽性標本的影響，EV71-IgM的復檢應采用穩定性好、特異性強、靈敏度高的定量新方法，以確保和提高檢測EV71-IgM的準確性[3，4]。

[1] 王連友.HBsAg快速金標法在街頭無償獻血中的應用[J].中國輸血雜志,1999,12(3): 175.

[2]仇銘華,張學亮,楊一軍.金標試紙血清法與全血法篩選獻血者HBsAg比較[J].中國輸血雜志,2001,14(4):229.

[3]魏來,陶其敏.努力規范肝臟疾病的免疫學診斷[J].中華檢驗醫學雜志,2003,26(2): 69-71.

[4] 王小光,汪萍,陳國強,等.上海市閔行區飲食服務人員HBsAg、HBeAg檢測結果分析[J].職業與健康,2005,21(5):689-690.

Effect of hemolysis,lipemia and jaundice on EV71-IgM colloidal gold detection

Dai Chunyu
Clinical Laboratory,the First People's Hospital of Nanyang City,Henan Province 473000

Objective:To investigate the effect of hemolysis,lipemia and jaundice on EV71-IgM colloidal gold detection.Methods: EV71-IgM colloid gold detection was used to detect the specimen with EV71-IgM 3 ng/mL and different degrees of hemolysis, lipemia and jaundice.Results:The specimen with different degrees of bilirubin,different concentrations of three acyl glycerol and hemoglobin0.2 g/L and EV71-IgM 3 ng/mL did not have obvious effect on EV71-IgM colloidal gold detection(P＞0.05).The specimen with hemoglobin 0.6 g/L and 0.8 g/L,EV71-IgM 3 ng/mL had significant effect on EV71-IgM colloidal gold detection (P＜0.01).Conclusion:Severe hemolysis had great effect on EV71-IgM colloidal gold detection.Mild hemolysis,jaundice and lipemia had no obvious effect on EV71-IgM colloidal gold detection.

Hemolysis;Lipemia;Jaundice;EV71-IgM colloidal gold method

10.3969/j.issn.1007-614x.2017.4.75