探討高鉛血癥兒童腸道菌群變化情況

李秋燕　李樹然　彭鎮(zhèn)委

【摘要】 目的 研究分析高鉛血癥兒童腸道菌群構(gòu)成變化情況。方法 30例高鉛血癥兒童為觀察組， 30例健康兒童為對照組， 均檢測兩組兒童腸道菌群中乳酸桿菌、雙歧桿菌、腸球菌和大腸桿菌的數(shù)量以及腸道內(nèi)雙歧桿菌和大腸桿菌數(shù)量對數(shù)值的比值（B/E值）。結(jié)果 兩組兒童腸道菌群數(shù)量比較結(jié)果顯示， 觀察組兒童的雙歧桿菌、乳酸桿菌、大腸桿菌明顯低于對照組兒童， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。觀察組兒童B/E值為（0.784±0.334）， 對照組兒童B/E值為（1.213±0.351）， 兩組B/E值比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 高鉛血癥兒童的體內(nèi)有腸道菌群紊亂的情況發(fā)生。

【關(guān)鍵詞】 高鉛血癥；兒童；腸道菌群；變化

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2017.07.054

鉛作為不可降解的日常生活中多見的一種污染物。由于發(fā)育的特點(diǎn)以及代謝特點(diǎn)的原因兒童與成年人存在較大的差別， 在相同環(huán)境下的正常人群相比， 兒童對鉛中毒更為敏感更為明顯， 特別是對兒童行為能力的生長發(fā)育以及嬰幼兒智力的發(fā)育有重要影響。兒童鉛中毒途徑主要由受鉛污染的食物和消化道接觸鉛， 上述兩種中毒途徑占總中毒病例的85%以上[1]。小腸的主要功能是吸收， 同時(shí)對鉛也同樣吸收， 然而大腸對鉛也有部分吸收的功效。為此腸道菌群接觸就不可避免地存在一起， 但這二者之間的相互性至今尚不明白同時(shí)也未見相關(guān)的報(bào)道。本次研究作者經(jīng)過對高鉛血癥患兒糞便中的菌落數(shù)變化情況和B/E情況進(jìn)行系統(tǒng)分析， 探討高鉛血癥患兒和腸道菌群的構(gòu)成之間的關(guān)系。現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 將本社區(qū)健康服務(wù)中心在2015年4月～2016年4月收治的30例高鉛血癥兒童為觀察組， 30例患兒均符合相關(guān)文獻(xiàn)資料中的兒童高鉛血癥的診斷標(biāo)準(zhǔn)， 即兒童的血鉛值≥100 μg/L（0.483 μmol/L）。觀察組患兒中男18例， 女12例；年齡2～6歲。為了有效排除混雜等因素對本次研究的影響， 特采用1：1配對法選取同期參加體檢的健康兒童30例為對照組， 其中男18例， 女12例；年齡2～6歲， 兒童的血鉛值<100 μg/L。兩組兒童的年齡、性別等一般資料， 比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）， 具有可比性。

1. 2 腸道菌群檢測方法 ① 采集受檢兒童1 h內(nèi)新鮮糞便， 使用無菌方法進(jìn)行收集同時(shí)在-80℃的條件下進(jìn)行保存。②稱取標(biāo)本（采集的新鮮糞便）0氣袋進(jìn)行10倍系類的稀釋到10-1～10-9， 與原液一起共計(jì)10個(gè)稀釋度。③ 采用微量移液器分別抽取受試標(biāo)本10 μl， 分別接種于PZ、 MRSA、 EMB、 TPY選擇性培養(yǎng)基礎(chǔ)上， 采用L棒均勻的涂抹標(biāo)本， 給予培養(yǎng)受試新鮮糞便的各種有益菌， 最后收集數(shù)據(jù)。④將 TPY培養(yǎng)基和MRSA培養(yǎng)基放入?yún)捬豕拗校?同時(shí)置于厭氧后封閉氣袋， 在孵育箱中（溫度設(shè)置在37℃）培養(yǎng)2 d；與此同時(shí)將EMB、PZ培養(yǎng)基直接放入孵育箱中（溫度設(shè)置在37℃）培養(yǎng)1 d。⑤細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)束后， 再選取具有特征性的菌落進(jìn)行菌落圖片染色及鏡檢， 采用細(xì)菌的形態(tài)學(xué)特征和革蘭染色學(xué)特征進(jìn)行判斷目的菌。在準(zhǔn)確確定目的菌之后， 按照計(jì)算平板上的稀釋度計(jì)數(shù)以及活菌計(jì)數(shù)， 采用活菌計(jì)數(shù)公式計(jì)算出結(jié)果后進(jìn)行計(jì)數(shù)， 其結(jié)果采用每克糞便濕質(zhì)量中的菌落， 形成單位的對數(shù)值進(jìn)行表示（即log CFU/g）。

1. 3 觀察指標(biāo) 觀察兩組兒童腸道內(nèi)的雙歧桿菌和大腸桿菌以及乳酸桿菌、腸球菌的數(shù)量；B/E情況。當(dāng)B/E值<1時(shí)說明腸道的抵抗力降低， 說明菌群結(jié)構(gòu)發(fā)生紊亂；當(dāng)菌群結(jié)構(gòu)正常則B/E值≥1。

1. 4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ x-±s）表示， 采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2. 1 兩組兒童腸道菌群數(shù)量比較 觀察組患兒的雙歧桿菌、乳酸桿菌、大腸桿菌數(shù)量明顯低于對照組兒童， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

2. 2 兩組兒童B/E值比較 觀察組兒童B/E值<1， 對照組兒童B/E值>1， 兩組B/E值比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表2。

3 討論

人體的腸道中棲息著一千多個(gè)細(xì)菌， 其中絕大多數(shù)為厭氧菌， 其中主要有大腸埃希菌屬、擬桿菌屬、雙歧桿菌屬和梭菌以及乳酸桿菌等， 在遠(yuǎn)端小腸和結(jié)腸中分布著眾多細(xì)菌中的有益菌， 其中十二指腸和胃等消化系統(tǒng)中均存在有菌群， 人體胃腸道中的生物學(xué)屏障是由眾多的腸道菌群所構(gòu)成， 在維持腸道結(jié)構(gòu)和維持腸道正常生理功能中腸道菌群發(fā)揮了具有重要作用。由于年齡關(guān)系兒童腸道菌群處在生理性演變過程中， 年齡越小的患兒腸道的微生態(tài)平衡便越差， 進(jìn)而造成腸道微生態(tài)紊亂癥狀[2-4]。鉛作為不可降解的日常生活中多見的一種污染物， 由于發(fā)育的特點(diǎn)以及代謝特點(diǎn)的原因兒童與成年人存在較大的差別， 與在相同環(huán)境下的正常人群相比， 兒童對鉛中毒更為敏感更為明顯， 特別是對兒童行為能力的發(fā)育和智力的發(fā)育有重要影響。低濃度的鉛中毒能引起患兒智能損傷， 患兒出現(xiàn)學(xué)習(xí)行為等異常出現(xiàn)。相關(guān)研究顯示[5-7]， 小腸和大腸均能對鉛給予有效吸收， 然而大腸內(nèi)主要寄居為腸道菌群， 為宿主提供豐富發(fā)熱能量底物， 進(jìn)而腸道菌群的紊亂導(dǎo)致代謝系統(tǒng)混亂， 進(jìn)而影響對鉛物質(zhì)的吸收。其次， 腸道菌群的相對穩(wěn)定對維持人體正常排便功能具有十分重要意義， 然而腸道菌群的紊亂與否， 對便秘的產(chǎn)生和加重有重要接影響， 從而加重了對鉛的吸收[8-10]。最后由于微量元素（如銅、鈣、鋅、鐵、鎂）在腸道吸收過程中和鉛一起在同一部位轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白， 為此鉛與鋅、鐵、鈣之間均有拮抗功效， 進(jìn)而充分的補(bǔ)充鋅劑和鈣劑以及鐵劑等均能降低血鉛在體內(nèi)的含量。由于腸道正常菌群中雙歧桿菌可有效利用對碳水化合物的發(fā)酵， 促進(jìn)短鏈脂肪酸等產(chǎn)物不斷增多， 進(jìn)而有效的降低了pH值， 促進(jìn)腸道對鈣、鐵、鎂等離子的吸收[11-13]。同時(shí)部分益生菌對鉛有驅(qū)逐的功效。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)雙歧桿菌菌株和乳酸桿菌菌株能快速清除重金屬鉛和鎘。

本次研究顯示， 觀察組兒童的雙歧桿菌、乳酸桿菌、大腸桿菌數(shù)量明顯低于對照組兒童， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。觀察組兒童B/E值<1， 對照組兒童B/E值>1， 兩組B/E值比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。這充分的有力的證實(shí)了雙歧桿菌菌株和乳酸桿菌菌株能快速清除重金屬鉛和鎘。同時(shí)， 相關(guān)研究證實(shí)[14]雙歧桿菌L46和乳酸桿菌ME3能在人體外經(jīng)過可逆性的表面結(jié)合的形式， 充分清除水溶液中的鉛和鎘。由于充分考慮體內(nèi)腸道益生菌具有對鉛有效結(jié)合的能力， 同時(shí)益生菌數(shù)量的不斷增加能有效的降低鉛吸收。

總之， 高鉛血癥兒童的體內(nèi)有腸道菌群紊亂的情況發(fā)生。

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[收稿日期：2017-01-12]