血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子治療下肢缺血性疾病的研究進(jìn)展

劉永東

廣西柳州市柳鐵中心醫(yī)院血管外科，廣西柳州 545007

血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子治療下肢缺血性疾病的研究進(jìn)展

劉永東

廣西柳州市柳鐵中心醫(yī)院血管外科，廣西柳州 545007

臨床上采用血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子方法治療下肢動(dòng)脈硬化、血栓閉塞性脈管炎、糖尿病足等下肢缺血性疾病已經(jīng)出現(xiàn)了大量的研究報(bào)道，但均未取得十分滿意的治療效果。隨著在這一方面的研究工作的不斷深入，現(xiàn)已證實(shí)血管內(nèi)皮前體細(xì)胞能夠定向分化血管當(dāng)中的內(nèi)皮細(xì)胞，并可同時(shí)生成新生血管，其中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子發(fā)揮了至關(guān)重要的作用價(jià)值。對(duì)此，該文將對(duì)目前臨床上關(guān)于血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子治療下肢缺血性疾病的研究進(jìn)展綜述如下。

血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子；動(dòng)脈硬化；血栓閉塞性脈管炎；糖尿病足；下肢

下肢缺血性疾病患者將會(huì)隨著病情的逐步加重而無(wú)法采用血管成形與重建等常規(guī)治療措施，此時(shí)患者經(jīng)常不得不進(jìn)行截肢治療。而近些年來(lái)隨著血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子治療方法在臨床上的研究日漸深入，為下肢缺血性疾病患者提供了新的治療方法。作為一種特異性血管生長(zhǎng)因子，其在血管新生的治療過(guò)程中發(fā)揮著至關(guān)重要的作用價(jià)值。

1 血管新生

血管新生即為針對(duì)人體的現(xiàn)存血管采取一定的技術(shù)手段來(lái)使之能夠進(jìn)行延伸、拓展，并由此構(gòu)建起接近于健康血管網(wǎng)絡(luò)的組織架構(gòu)。血管新生的主要內(nèi)容就含括了血管基底膜、細(xì)胞外基質(zhì)降解；血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖、轉(zhuǎn)移；新生血管組織建立；血管外壁細(xì)胞積聚；血管附近產(chǎn)生基質(zhì)租住；血管網(wǎng)絡(luò)的調(diào)整與重建。治療性血管新生即為把血管新生誘導(dǎo)因子轉(zhuǎn)入進(jìn)組織當(dāng)中并促進(jìn)缺血部位側(cè)支血管能夠得以實(shí)現(xiàn)重生[1]。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子是目前在臨床醫(yī)學(xué)上應(yīng)用效果最好的一種促進(jìn)血管生長(zhǎng)的因子，其最為突出的優(yōu)勢(shì)特性即體現(xiàn)在以下兩個(gè)方面之中：①間質(zhì)細(xì)胞源性因子、腫瘤壞死因子、促血管生長(zhǎng)因子等通過(guò)對(duì)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子表達(dá)的增強(qiáng)來(lái)發(fā)揮效用；②血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的作用影響將始終存在于血管的整個(gè)重生階段。

2 蛋白治療

考慮到血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子在人體當(dāng)中的半衰期相對(duì)較短，采用血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子蛋白治療方式治療下肢缺血性疾病通常要重復(fù)多次給藥，不但成本高昂且極為不便[2]。隨著當(dāng)前載體控釋技術(shù)研究愈發(fā)趨向于成熟化以及相關(guān)工藝技術(shù)的快速發(fā)展，目前在臨床上越來(lái)越多的開(kāi)始采用載體緩釋血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的方式來(lái)加快促使血管能夠得以新生。當(dāng)前在臨床上所較常采用的控釋載體主要就包括了水凝膠、肝素、膠原基質(zhì)、藻酸鹽等。有研究人員就通過(guò)把血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子包裹于藻酸鈣微球當(dāng)中，經(jīng)臨床觀察表明含量在6 ng·mL/（L·d）的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子其有效釋放時(shí)間可達(dá)到10～14 d，并分別在向磷酸鹽緩沖液以及血清當(dāng)中同時(shí)進(jìn)行釋放其結(jié)果表明，在血清當(dāng)中的釋放速率明顯更快，分析其原因很有可能是由于在血清當(dāng)中藻酸鹽和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子所發(fā)生的靜電效應(yīng)有所下降所導(dǎo)致的。有研究人員就通過(guò)利用氣體發(fā)泡技術(shù)以及微粒濾過(guò)手段賴在血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子165內(nèi)新增加聚丙交酯以及聚乙交酯，其血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子釋放速率明顯降低，治療結(jié)果表明采取血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子緩釋治療方式在血管新生方面達(dá)到了更加優(yōu)異的效果。

3 基因治療

研究人員將編碼后的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子基因裸露質(zhì)粒DNA輸注進(jìn)試驗(yàn)小鼠的缺血性后肢肌肉中，經(jīng)治療1個(gè)月后通過(guò)造影結(jié)果表明缺血肢體側(cè)支循環(huán)顯著加強(qiáng)，內(nèi)收肌與腓腸肌當(dāng)中的內(nèi)毛細(xì)血管密度顯著升高，同時(shí)經(jīng)由組織學(xué)檢驗(yàn)出了標(biāo)記有血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的蛋白。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子基因治療當(dāng)前在臨床上的載體主要就包括了脂質(zhì)體DNA、裸露質(zhì)地DNA以及病毒載體DNA三種。其中前兩種轉(zhuǎn)染操作相對(duì)較為簡(jiǎn)單，而最后一種只能夠?qū)崿F(xiàn)轉(zhuǎn)染分裂細(xì)胞。有可能導(dǎo)致的免疫反應(yīng)與毒副作用為其主要切入點(diǎn)，基因輸入主要有肌肉輸注和導(dǎo)管腔內(nèi)輸注兩種[3]。病毒載體主要就包括了腺病毒與逆轉(zhuǎn)錄病毒兩種，其中后一種病毒的轉(zhuǎn)染效率相對(duì)偏低，并且也僅僅能夠?qū)Ψ至鸭?xì)胞實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)染；而腺病毒其在發(fā)生轉(zhuǎn)染現(xiàn)象之后血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子將不會(huì)被整合到宿主基因組當(dāng)中，仍然能夠保持長(zhǎng)達(dá)足月以上。然而有可能會(huì)發(fā)生的免疫反應(yīng)和毒副效應(yīng)則是其主要的切入點(diǎn)。基因輸注形式主要是通過(guò)肌肉輸注以及通過(guò)導(dǎo)管腔內(nèi)室進(jìn)行輸注。近些年來(lái)有研究人員就采用物理技術(shù)來(lái)加強(qiáng)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子基因?qū)Υ龠M(jìn)血管新生起到了較為滿意的臨床療效，其中主要就包括以下幾種技術(shù)：①離子照射療法：有研究人員就采用低劑量的的離子來(lái)對(duì)缺血性小鼠的下肢進(jìn)行照射，通過(guò)刺激作用來(lái)促使其肥大細(xì)胞能夠逐步轉(zhuǎn)移至缺血區(qū)域，同時(shí)利用肥大細(xì)胞來(lái)產(chǎn)生出血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子，以促使試驗(yàn)小鼠缺血部位的血管能夠得以重新生成。②超聲波輔助療法：有研究人員就通過(guò)采用低強(qiáng)度超聲波來(lái)對(duì)缺血性實(shí)驗(yàn)小鼠的下肢進(jìn)行照射治療，在持續(xù)照射3周以后缺血程度為中等的小鼠其缺血部位組織血液流動(dòng)情況取得了明顯恢復(fù)。③磁場(chǎng)效用療法：有研究人員就采用包含了血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的DNA裸質(zhì)粒磁性納米微粒子經(jīng)由動(dòng)脈輸注入實(shí)驗(yàn)小鼠體內(nèi)，經(jīng)由外部磁場(chǎng)以促使微粒子能夠集中于其缺血性部位，進(jìn)而促使血管得以重新生成。

4 細(xì)胞治療

當(dāng)前現(xiàn)已表明血管內(nèi)皮前體細(xì)胞能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的定向分化效果，同時(shí)還可產(chǎn)生出新生血管，特別是血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子在血管內(nèi)皮前體細(xì)胞定向分化、體內(nèi)擴(kuò)展增大以及轉(zhuǎn)染之后定向移植治療周?chē)毖约膊∨R床效果顯著[4]。有研究人員就采用免疫磁珠方式來(lái)由人體骨髓內(nèi)分離出CD34+細(xì)胞，并將之放置在涂抹了纖連蛋白的塑料板上，在對(duì)其培養(yǎng)24 h之后，將貼壁細(xì)胞取出，搜集懸浮細(xì)胞，將其中所包含的成熟內(nèi)皮細(xì)胞徹底清除。把懸浮細(xì)胞采用含括有血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的培養(yǎng)基質(zhì)進(jìn)行2～3周的培養(yǎng)后，產(chǎn)生出快速擴(kuò)張?jiān)龃蟮馁N壁細(xì)胞集落。此類(lèi)細(xì)胞具備有內(nèi)皮細(xì)胞的典型性特征，把擴(kuò)展增多以后的血管內(nèi)皮細(xì)胞的定向分化移植到無(wú)胸腺試驗(yàn)小鼠缺血性后肢上，可促使其卻血量與微血管密度明顯增大。

促使骨髓內(nèi)的EPC盡量存在于外周血內(nèi)，這一階段便是EPC的動(dòng)員過(guò)程。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子是EPC實(shí)現(xiàn)外部高效化動(dòng)員的主要因子。有研究人員就通過(guò)對(duì)試驗(yàn)小鼠腹腔內(nèi)進(jìn)行可溶性血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的注射，1次/d，持續(xù)注射7 d。在實(shí)施血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子處理的第1天，試驗(yàn)小鼠的外周血EPC未處理細(xì)胞數(shù)占總體細(xì)胞數(shù)的25%左右，在處理到第4天后其數(shù)值達(dá)到峰值，即37%。而后，研究人員損傷實(shí)驗(yàn)鼠角膜，結(jié)果表明EPC一同參與到了對(duì)損傷角膜新血管的構(gòu)建過(guò)程之中。和對(duì)照試驗(yàn)組的情況相比較，血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子動(dòng)員之后將會(huì)有為數(shù)更多的EPC一同參與進(jìn)血管的新生構(gòu)成之中。

5 結(jié)束語(yǔ)

在該次研究中，主要就血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子治療下肢缺血性疾病的研究進(jìn)展展開(kāi)了具體分析，其中就對(duì)這一治療方法的主要原理“血管新生”予以了具體闡述，而后就血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的蛋白治療方法、基因治療方法、細(xì)胞治療方法的研究進(jìn)展展開(kāi)了具體探究，最終希望通過(guò)該文的研究能夠?yàn)橄嚓P(guān)的研究人員提供一些有價(jià)值的參考。

[1]丁云,高淵,杜繼聰,等.下肢缺血性疾病干細(xì)胞治療相關(guān)的股內(nèi)側(cè)肌動(dòng)脈應(yīng)用解剖學(xué)[J].解剖學(xué)雜志,2014,37(4)：514-516.

[2]黃智,周石,宋杰,等.不同介入方法治療老年下肢缺血性疾病的近期療效[J].中國(guó)老年學(xué)雜志,2014,34(2).

[3]王芳,何雪梅,姚佐懿,等.miR-221-3p在下肢缺血性疾病中的表達(dá)變化[J].中國(guó)動(dòng)脈硬化雜志,2017,25(2).

[4]張滕,周為民.治療性血管新生在下肢缺血性疾病中的研究進(jìn)展[J].國(guó)際外科學(xué)雜志,2016,43(12)：856-860.

R6

A

1004-6569（2017）07（a）-0082-02

劉永東（1974-），男，湖南祁東人，碩士，副主任醫(yī)師，研究方向：主動(dòng)瘤診治及膝下動(dòng)脈閉塞介入治療。

2017-04-03）