嘌呤類似物治療炎癥性腸病的藥理作用和臨床應用

王燕

【中圖分類號】R574 【文獻標識碼】B 【文章編號】2095-6851（2017）03-0-02

炎癥性腸?。↖BD）是一種慢性非特異性腸道炎癥性疾病，病因尚不明確，包括潰瘍性結腸炎（UC）和克羅恩?。–D）。其中硫唑嘌呤（AZA）為維持治療和誘導緩解炎癥性腸病的藥物，1.5～2.5mg·kg-1·d–1為常用劑量，是一種較常見的免疫制劑，可以實現減少患者激素的耐藥性和依賴性[1]。由于個體差異，部分患者服用常規劑量的AZA后，臨床癥狀并無緩解，甚至嚴重者出現毒副反應或骨髓移植以及肝臟毒性，因此限制了臨床應用。

1.資料與方法

1.1 一般資料

選取確診為炎癥性腸病并擬接受嘌呤類似物治療的患者15例，男性7例，女性8例，其中3例為潰瘍性結腸炎患者，12例為克羅恩病患者。

潰瘍性結腸炎的診斷：病程超過半年，伴有反復黏液膿血便，排除了細菌性菌痢、慢性血吸蟲病、阿米巴痢疾、腸結核病等，且病變處明顯可見彌漫性多發潰瘍。

克羅恩病的診斷：病程超過半年，右下腹或臍周腹痛、腹瀉并伴有肛瘺、腹部腫塊、貧血、肛周病變等全身癥狀，排除腸結核、阿米巴痢疾等慢性腸道感染、缺血性腸炎、白塞病等，內鏡下可見節段性病變、阿弗他潰瘍等表現。

1.2 方法

1.2.1 6-TGNs濃度測定法 在酸性條件下，6-TGNs上的磷酸基團水解脫落成為6-TG，可作為定量TGNs濃度。

1.2.2 TPMT基因基因檢測方法 采用基因擴增儀、高速離心機、焦磷酸測序儀等儀器進行人外周血基因組DNA提取。

2.結果

2.1 紅細胞內6-TGNs濃度測定

采用色譜法進行相關測定，得出結果，得回歸方程Y=0.0223X-0.0325，紅細胞中6-TGNs濃度在7.87～787.40pmol范圍內線性關系良好（r=0.9997）；RSD在0.46%～7.64%之間（日內、日間精密度），高、中、低質控液方法回收率在99.10%～102.07%之間，RSD在3.65%～6.71%之間（穩定性實驗結果）。

2.2 TPMT基因檢測

TPMT*3野生型為460位G90%，A10%，719位A%，G10%。雜合型突變位460位G，A堿基頻率30%～70%；719位A，G堿基頻率30%～70%，純合子突變為460位G10%，A90%；719位A0%，G90%?；驒z測序列和結果。

2.3 測定結果

15例患者在接受AZA治療前進行TPMTA719G和G460A位點的檢測。長期服用嘌呤類似物的炎癥性腸病患者（每日劑量50mg、75mg、100mg），分別測定紅細胞內6-TGNs的濃度，平均值位319.44pmol/（8*108）RBC?；颊叻肁ZA首次檢測結果，見表2。

所有患者在服用AZA之前或治療過程中進行基因位點的檢測，G460A位點可見基因型位GG、GA、AA，A719G位點可見基因型為AA、AG、GG，結果均為野生型，這個結果提示患者使用嘌呤類似物時發生骨髓毒副作用的風險較低。

3.討論

炎癥性腸病和自身免疫疾病及相關疾病的治療可以應用非特異性的免疫抑制劑，例如6-巰基嘌呤和AZA等嘌呤類藥物。嘌呤類似物為無活性的前體藥物，需要經過體內代謝轉變為6-TGNs后才能發揮療效。臨床上測定人紅細胞中6-TGNs的濃度，大多通過6-TGNs在酸性條件下磷酸基團水解后生成6-TG后采用高效液相色譜法進行測定，這種測定方法專屬性強并且簡單快捷。

本研究采用的焦磷酸測序法適用于對已知的短序列的測序分析，來證明它適用于基因的多形態的分析，并且具有林敏度高、精確性好的特點，可以直觀、快速、適時、低成本、高通量的進行單核苷酸多態性研究[2]。本研究檢測了15例患者的紅細胞6-TGNs濃度，對于部分患者的血藥濃度進行了相應的劑量調整，結果表明，嘌呤類似物治療炎癥性腸病取得了較好的療效，同時也可以預防產生的毒副作用。但本研究檢測的15例患者的G460A和A719G基因序列，并未發現TPMT*3C的突變，因此今后需擴大病例數來進一步檢測證實TPMT基因聯合6-TGNs濃度檢測對于臨床治療炎癥性腸病的指導意義。

參考文獻

[1]奎映仙.糖皮質激素及嘌呤類私物在炎癥性腸病治療中的應用與評價[J].中國社區醫生，2016，32（2），18-20.

[2]萬子睿，謝海棠，俞競等.焦磷酸測序分析ABCG2基因多態性方法的建立[J].中國臨床藥理學與治療學，2012，17（7）：779-784.