阿尼芬凈合成前體棘白菌素B發(fā)酵條件優(yōu)化

牛 坤,吳 豪,毛 健,鄒樹平

(浙江工業(yè)大學 生物工程研究所,浙江 杭州 310014)

阿尼芬凈合成前體棘白菌素B發(fā)酵條件優(yōu)化

牛 坤,吳 豪,毛 健,鄒樹平

(浙江工業(yè)大學 生物工程研究所,浙江 杭州 310014)

阿尼芬凈為新一代棘白菌素類抗生素,其前體物質(zhì)棘白菌素B(ECB)發(fā)酵單位的高低將直接影響阿尼芬凈的市場前景.利用構(gòu)巢曲霉發(fā)酵合成ECB,采用單因素實驗考察不同參數(shù)對ECB產(chǎn)量的影響.結(jié)果顯示:低溫培養(yǎng)有利于ECB的合成,選擇前3天37 ℃培養(yǎng),后9天25 ℃培養(yǎng),ECB產(chǎn)量可達1 237 mg/L,比25 ℃恒溫培養(yǎng)提高了69.9%;最佳的初始pH為6.5;添加0.6 g/L ZnCl2可使ECB產(chǎn)量達到1 100 mg/L,比初始發(fā)酵培養(yǎng)基提高了69.2%;前體物質(zhì)脯氨酸及鳥氨酸的添加可以顯著提高ECB產(chǎn)量,在第6天添加2 g/L脯氨酸或在第3天添加2 g/L鳥氨酸可使ECB產(chǎn)量分別提高57.4%和55.2%.

棘白菌素B;構(gòu)巢曲霉;發(fā)酵;條件優(yōu)化

棘白菌素類抗生素是20世紀70年代發(fā)現(xiàn)的一組天然產(chǎn)物,具有類似的環(huán)狀多肽核心和不同的脂肪酸側(cè)鏈,能夠非競爭性地抑制真菌細胞壁β-1,3-葡聚糖合成酶的活性,從而達到抗真菌的目的[1].FDA已批準上市的這類藥物包括卡泊芬凈(Caspofungin)、米卡芬凈(Micafungin)和阿尼芬凈(Anidulafungin),其中前兩者已在國內(nèi)上市,阿尼芬凈已在國內(nèi)臨床中[2-3].阿尼芬凈是由前體化合物棘白菌素B(ECB)經(jīng)猶他游動放線菌產(chǎn)生的酰化酶作用脫去側(cè)鏈亞油酰基,然后在DMF中與活性中間體4″-戊氧基-[1,1′,4′,1″]三苯基-4-甲酸-2,4,5-三氯-苯基酯反應制得.ECB與阿尼芬凈的化學結(jié)構(gòu)式[4]分別為ECB是合成阿尼芬凈的主要前體化合物,其發(fā)酵單位的高低將直接影響阿尼……