尿液分析儀檢測尿蛋白與尿微量白蛋白結果分析探討

宋瑞英

山東青島膠州市北關街道辦事處衛生院檢驗科，山東青島 266300

尿液分析儀檢測尿蛋白與尿微量白蛋白結果分析探討

宋瑞英

山東青島膠州市北關街道辦事處衛生院檢驗科，山東青島 266300

目的 通過尿液分析儀檢測尿蛋白與尿微量白蛋白(MAU)結果的比較,了解尿液分析儀檢測尿蛋白的準確性、局限性及影響因素。方法 對235份新鮮尿液標本分別進行尿蛋白干化學檢測和免疫熒光分析儀尿微量白蛋白定量檢測。結果 在尿液干化學法檢測尿蛋白 （-）的130份標本中,有36份檢測到＞20 mg/L的尿微量白蛋白，呈假陰性（27.7%）；45份尿蛋白（±）標本中36份尿微量白蛋白呈陽性（80.0%）,9份呈假陽性（20.0%）。結論 干化學法測定尿蛋白因靈敏性差及干擾因素較多,其準確性受到一定限制,需做好尿檢質量控制,避免漏診誤診；尿微量白蛋白檢測具有靈敏度高、特異性強、測定結果較為準確等優點,在糖尿病腎病,高血壓腎病等疾病的早期診斷中更具有臨床價值。

尿液分析儀；尿蛋白；尿微量白蛋白；影響因素

目前尿液分析儀已廣泛應用于各級醫療單位,用其檢測尿蛋白,費用低廉，操作簡便,結果迅速,已成為臨床的常規檢測方法[1]。但因其敏感性差,干擾因素多,只能作為一種過篩試驗。而免疫熒光分析儀檢測尿微量白蛋白(MAU)具有特異性強,靈敏度高,可準確定量等優點,彌補了這方面的不足。該文用尿液分析儀檢測尿蛋白的同時,采用免疫熒光檢測儀檢測尿 MAU,以兩者含量之差異作為研究的切入點,結果分析如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇235例住院患者,其中男110例,女125例。年齡35～85歲,平均59歲。同時記錄有關患者資料(患者病情,臨床用藥等)。

1.2 儀器和試劑

尿蛋白檢測采用URIT-180型尿液分析儀,配套URIT-11A試紙條。尿微量白蛋白(MAU)檢測使用WF-0901/型免疫熒光檢測儀及公司配套試劑盒。

1.3 方法

患者留取中段晨尿10 mL,盛置于干凈的容器中,及時送檢,將URIT-11A試紙條放在尿液中10 s取出,放在衛生紙上瀝干多余液體,用尿液分析儀測尿蛋白。同一份標本用TopPette移液器準確吸取75 μL,滴加到尿微量蛋白檢測卡的加樣孔中,室溫放置3 min,插入免疫熒光檢測儀中測試。

2 結果

以MAU＞20 mg/L視為陽性，從表格中可以看出,用尿液分析儀干化學法檢測的這批標本,在尿中含有大量白蛋白（++～+++）時，與免疫熒光分析儀測定尿微量白蛋白結果相符,而蛋白含量相對較少時出現了假陽性和假陰性的情況：尿蛋白（-）的130份標本中,36份檢測到＞20 mg/L的尿微量白蛋白,即36例假陰性（27.7%）；45份尿蛋白 （±）標本中僅36份尿微量白蛋白呈陽性（80.0%），即9份假陽性（20.0%）；32份尿蛋白（+）標本中31份尿微量白蛋白呈陽性,有1份假陽性（3.1%）。結果見表1。

表1 尿液分析儀檢測尿蛋白和尿微量白蛋白檢測結果比較

3 討論

尿液分析儀檢測尿蛋白是采用指示劑的蛋白誤差原理,即蛋白質模塊中主要含有酸堿指示劑溴酚藍、檸檬酸緩沖系統和表面活性劑。在pH為3.2時溴酚藍產生出陰離子,與蛋白攜帶的陽離子（主要是清蛋白）結合發生顏色變化而產生半定量。這種顏色變化的幅度與蛋白含量呈正比。試紙只對白蛋白敏感,對球蛋白等其它蛋白敏感性差,對血紅蛋白、肌紅蛋白、黏蛋白等蛋白一般不呈陽性反應,只能作為一種過篩試驗[2]。

該實驗檢測尿微量白蛋白（MAU）所用萬孚免疫熒光檢測儀,是基于免疫熒光定量技術、干化學層析技術和激光誘導技術原理進行檢測的儀器。MAU檢測試劑預先在硝酸纖維素膜上包被熒光標記鼠抗白蛋白單克隆抗體,和尿液中的白蛋白抗原形成復合物,在層析作用下,反應復合物沿硝酸纖維素膜向前移動被檢測區的單克隆抗體捕獲,尿液樣本中的白蛋白越多,檢測區上的復合物集聚越多，熒光抗體的信號強度反映了被捕獲的白蛋白數量。萬孚檢測儀可根據熒光強度的大小自動檢測計算出樣本中白蛋白的濃度。此方法特異性強,靈敏度高,可準確定量尿液中的微量白蛋白含量。

鑒于尿液分析儀檢測尿蛋白與尿微量白蛋白檢測原理的不同,兩者的靈敏度也不同,尿液分析儀檢測尿蛋白的靈敏度為150 mg/L,而熒光免疫分析儀尿微量白蛋白檢測的靈敏度為5 mg/L,因此,尿微量白蛋白檢測的準確性遠高于尿液分析儀,從檢測結果觀察隨著尿蛋白含量的增加,在尿蛋白（++）、（+++）的標本與尿微量白蛋白測定完全相符,兩種結果的符合率為100.0%。但在尿液干化學檢測尿蛋白（-）的130份標本中,有36份檢測到＞20 mg/L的尿微量白蛋白,假陰性達27.7%,即尿液分析儀漏診率達27.7%。該文中45份尿蛋白（±）的標本,有9份假陽性（20.0%）,32份尿蛋白（+）標本中,有1份假陽性（3.1%）。出現這種情況主要原因除兩者靈敏度不同外,還因為尿液分析儀檢測尿蛋白還受其他因素的影響[3]。

假陰性:①根據干化學法檢測尿蛋白的原理,試紙只對白蛋白敏感,對球蛋白其他蛋白敏感性差,對血紅蛋白、肌紅蛋白、黏蛋白等蛋白一般不呈陽性反應,可影響對一些疾病的檢出,如多發性骨髓瘤患者排出的本周蛋白尿（實質為免疫球蛋白輕鏈或其聚合體）、溶血性疾病所致的血紅蛋白尿、大面積肌肉創傷或炎癥時的肌紅蛋白尿、單核細胞白血病時的溶菌酶蛋白尿等。②強酸性尿液：尿液pH＜4時,則抑制蛋白與染料呈色反應,故而尿蛋白的敏感性大為降低,造成假陰性需要稀堿來校正pH為5～7后,再測定尿蛋白。③試劑帶浸入尿液不足,量不夠,致使反應不完全,可使尿蛋白偏低。④輸注大劑量青霉素,在一定的時間內(2～6 h),尿液分析儀測定尿蛋白易出現假陰性由于這些標本來自住院患者,其用藥多此類病例,需在輸注青霉素6 h以后,再留取標本進行檢測[4]。

假陽性：①患者服用奎寧和磺胺嘧啶等藥物引起的堿性尿液（pH＞9.0）時,試帶染色的電離度增大,堿離子濃度增加出現與尿蛋白一樣的蘭色,造成假陽性。應盡量避免在服用有干擾作用藥物后不久留取標本。②青霉素、氨芐青霉素的干擾：由于與染料結合,使其在尿液濃縮引起假陽性。③尿路感染的尿液使尿液蛋白呈陽性。④膽紅素呈強陽性的尿液：當尿膽紅素（+++）時,蛋白也呈陽性。⑤另外一些可致假陽性的因素如高比重尿,試紙條如浸尿過多將緩沖劑沖脫也可致假陽性[5]。

4 結論

血液中有一定量的蛋白質存在,一部分的蛋白質在隨血液經過腎臟時被過濾至尿液中,隨后又在腎小管處被重吸收而進入血液。但是當腎臟或者輸尿管出現病變時就會透過更多的蛋白質,超出了腎小管的吸收能力,從而形成蛋白尿。人體正常代謝情況下,尿中的白蛋白極少,具體到每升尿白蛋白不超過20 mg（＜20 mg/L）。尿分析儀法測尿蛋白遠不及尿微量蛋白檢測敏感,糖尿病腎病,高血壓腎病發病隱匿,初始濃度低,受靈敏度限制尿常規檢測蛋白的顯示為陰性（-）或（+-）,而MAU的測量正可以彌補這一缺陷。此時經過規范的治療,可修復腎單位消除蛋白尿,故早期發現診斷,對于腎病的預防及早期治療都起的了積極作用。避免尿蛋白檢測陽性時,患者腎臟已經進入不可逆的損傷期。不僅如此尿 微量白蛋白還對高血壓和心血管疾病的進展、預測、治療效果評價等具有重要參考價值[6]。

綜上所述,尿MAU的檢測具有特異性強,靈敏度高,可準確定量等特點,在懷疑有早期腎損傷時,檢測尿微量蛋白比尿蛋白更有臨床意義。尿液分析儀檢測尿蛋白只是一個半定量分析方法,如果將檢查結果誤認為是尿蛋白定量結果,就會影響到臨床醫生對患者疾病的分析和判斷,以致造成誤診或漏診。

[1]范世珍,陳安彬,林松青.尿微量白蛋白在高血壓和糖尿病腎病早期診斷中意義[J].臨床研究雜志,2013,2（10）：35-36.

[2]叢玉隆,王淑娟.今日臨床檢驗學[M].北京:中國科學技術出版社,1997：236.

[3]胥伯如.尿液分析儀檢驗尿蛋白與尿微量蛋白結果分析[J].中國藥物經濟學雜志,2013,11（8）：292-293.

[4]叢玉隆，陳建良.大劑量青霉素中尿蛋白定性結果的探討[J].中華醫學檢驗雜志,1994,17(3):167.

[5]桂滿元,黃成文，兩種尿蛋白測定方法的比較[J].檢驗醫學與臨床雜志，2007,1（4）：34-35.

[6]胥鳳,趙敏,尿微量白蛋白的檢測及臨床意義[J].西藏醫藥雜志,2005,26(4):85.

R446.1

A

1672-5654（2017）02（c）-0048-02

2016-11-24）

宋瑞英（1974.4-），女，山東青島人，本科，主管技師，研究方向：尿蛋白和尿微量白蛋白在臨床中的診斷價值。

10.16659/j.cnki.1672-5654.2017.06.048