不同劑量定癇丸治療癲癇的動物實驗研究

孫洋馨，王翔艷

不同劑量定癇丸治療癲癇的動物實驗研究

孫洋馨，王翔艷＊

定癇丸；癲癇；最佳劑量；動物實驗

中醫稱癲癇為癇癥，病位在腦竅，涉及心、肝、腎、脾四臟，病機特點是邪實證虛，治療的關鍵在痰，治療的原則是熄風定癇。從中醫的角度講，癲癇是由痰所致，應從痰論治。中藥治療有逐瘀、補虛法、滌痰息風、標本同治等方法。定癇丸源于《醫學心語》，被認為是治療癇病發作的主方之一。近年來，臨床上采用定癇丸治療癲癇，并取得了較好的療效，用定癇丸治療癇病也隨之被廣泛運用［1］。為進一步研究中醫治療癲癇的效果和安全性，本研究以80只斷乳6周齡小鼠作為研究對象，分析了不同劑量定癇丸治療癇病的治療效果，現將結果報告如下。

1 材料與方法

1.1 癲癇模型與藥物按照隨機數字表法將購取的80只斷乳6周齡小鼠隨機分為治療組和對照組，將這兩組再隨機分為4個不同的劑量組（每組10只）。實驗動物均由四川大學動物中心購得，飼養于SPF環境（光照時間、濕度、室溫分別為12 h、45%、24.5℃），動物都分籠飼養，兩組小鼠體重均在15~35 g左右，兩組小鼠一般資料比較無差異（P> 0.05），具有可比性。最大電休克發作型小鼠造模，齒狀夾用生理鹽水浸潤后，夾住小鼠兩耳尖部，進行交流電刺激，參數設定為44 V，0.3 s，單次刺激，以后肢強直性伸直為驚厥指標。藥物定癇丸選用廣東一方制藥有限公司生產的免煎顆粒配制，組方如下：節菖蒲1袋（相當于中藥飲片6 g）、云苓1袋（相當于中藥飲片10 g）、半夏1袋（相當于中藥飲片9 g）、杭芍0.5袋（相當于中藥飲片5 g）、天麻1袋（相當于中藥飲片10 g）、膽南星1袋（相當于中藥飲片6 g）、川貝9袋（相當于中藥飲片9 g）、僵蠶1袋（相當于中藥飲片10 g）、全蝎2袋（相當于中藥飲片6 g）、陳皮1袋（相當于中藥飲片6 g）等。

1.2 診斷標準西醫診斷標準：參照2005年國際抗癲癇聯盟（ILAE）提出的癲癇病的臨床診斷標準［2］。中醫診斷標準：參照1993年中醫藥管理局頒布的《中藥新藥治療癇癥臨床研究指導原則》中規定的“新藥治療癇癥的臨床研究指導原則”［3］。

1.3 研究方法對小鼠灌胃給予不同濃度的定癇丸提取液。定癇丸提取液配制方法：按上方組成，經過蒸餾水溶解，和澄清劑純化精制成濃度分別為100mg/m l，200mg/ml，400mg/m l，800mg/m l的定癇丸提取液。治療組的四個劑量小組分別按照100mg/ kg·d、200mg/kg·d、400 mg/kg·d、800mg/kg·d的劑量給予定癇丸提取液，對照組則在同一時間給予等量的生理鹽水，連續服用14 d時間，早晚各一次。在末次給藥1 h后再行上述電刺激，記錄其驚厥數，驚厥持續時間，計算驚厥率。2個月后，觀察兩組小鼠癲癇模型的臨床效果。

1.4 研究指標兩組小鼠癲癇模型經過14 d治療后的總體效果比較，治愈：用藥14 d后不再出現癲癇癥狀。好轉：癥狀減輕，或者復發過一次癲癇。無效：治療14 d后，癥狀沒有明顯的改善或者加重。兩組中4個劑量組治療前后小鼠的體重的變化。不同組對抗癲癇驚厥時間的比較［4］。

1.5 統計學方法用SPSS 18.0統計分析軟件進行，計量資料以均值±標準差（x±s）來表示，對于服從正態分布，方差齊性的資料應用兩組之間的t檢驗，對于符合條件的多個均值之間的比較應用方差分析；計數資料可以采用卡方檢驗；對于不符合條件的資料利用秩和檢驗。檢驗標準取ɑ=0.05，當P< 0.05時差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組抗癲癇效果的比較治療組的治療有效率為87.5%，顯著高于對照組的12.5%，兩組之間經過秩和檢驗后差異具有統計學意義（P<0.05），說明聯合定癇丸治療癲癇的總體有效率較高。見表1。

表1 兩組模型小鼠的總體抗癲癇效果

2.2 兩組治療前后體重及驚厥時間的比較治療組（40只）和對照組（40只）兩組小鼠在治療前體重、每次驚厥持續的時間、發生的次數在兩組之間的差異無統計學意義（P>0.05），說明兩組之間具有可比性。治療后體重、驚厥持續的時間、驚厥次數在兩組之間的差異具有統計學意義（P<0.05），治療組對癲癇控制的效果明顯；治療組中體重、驚厥持續時間、驚厥發生的次數治療前后的差異具有統計學意義（P<0.05），見表2。

表2 兩組小鼠治療前后體重、驚厥時間及次數比較（x±s）

2.3 不同劑量藥物的小鼠毒性反應不同劑量藥物對兩組小鼠發作性陣攣潛伏期的具體統計結果為：治療組1組為（62.99±5.58）s，2組為（125.57± 4.49）s，3組為（185.23±3.39）s，4組為（76.35±3.56）s，四組比較P=0.002，有統計學意義（P<0.05）；對照組1組為（65.59±5.45）s，2組為（70.47±6.58）s，3組為（71.29±3.39）s，4組為（73.46±4.49）s，四組比較P= 0.382，無統計學意義（P>0.05）。在治療組不同劑量陣攣潛伏期之間的差異具有統計學意義（P<0.05），經過兩兩之間的比較2組與1組之間以及3組與1組之間的差異具有統計學意義（P<0.05），對照組四組經過方差分析差異無統計學意義（P>0.05），表明在3組劑量時的效果更加明顯，經記錄，在1組和2組喂養一周時小鼠無死亡現象，3組時喂養第一周時就有1只鼠死亡。

3 討論

癲癇即“癇癥”，屬短暫性中樞神經系統功能失常臨床綜合慢性病，由神經元異常同步放電導致。目前中醫治法已發展為兩大類治法，分別為從痰論治法和從肝論治法［5］。痰與癲癇的發生有著密切的關系，所謂痰是導致癲癇發作的直接原因，所以應從痰著手［6］。中醫講肝主藏血、主疏泄，使全身的津氣血津液正常運行，則肝的功能失常會導致陽升風動，風動則痰升，痰升則致癲癇。定癇丸在臨床上經常用于癲癇的治療，包括節菖蒲、黨參、云苓、白術、半夏、杭芍、白蔻仁、木香、龍齒、甘草、天麻、膽南星、川貝、僵蠶、全蝎、陳皮等。方中的節菖蒲可開泄，化濕邪、祛痰濁，能陣發清陽；天麻可作風之潤劑，是治風之妙藥，因此在癲癇的治療上可治驚厥、平肝陽；膽南星、半夏可化痰濁、定驚熄風；川貝有清熱化痰之功效；僵蠶化痰散結、疏風散熱；全蝎善于搜風邪；陳皮能健脾燥濕，甘草具有調和諸藥的作用，能緩和藥性［7］。

本研究探討分析了聯合定癇丸治療癲癇的臨床效果，研究結果顯示治療組治療的有效率（87.5%）顯著高于對照組（12.5%），證明了中醫不同劑量定癇丸治療癲癇的效果；治療組和對照組兩組小鼠在治療前體重、每次驚厥持續的時間、發生次數上無差異，說明兩組的基線資料無差異，治療后差異顯著，說明治療組對癲癇控制的效果明顯，并且治療組就自身治療前后相比也有明顯差異；在治療組不同劑量陣攣潛伏期之間有明顯差異（P< 0.05），經過兩兩之間的比較，2組與1組之間以及3組與1組之間有明顯差異（P<0.05），對照組四組經過方差分析差異無統計學意義（P>0.05），說明給小鼠預定癇丸提取液按照3組的劑量（即按照400mg/ kg·d的量）時治療效果最佳，3組的小鼠在用藥后臨床表現明顯好轉，動作減少，體重下降，嗜睡、便溏等，停藥后，好轉的效果很快便消失［8］。定癇丸提取液治療癲癇的作用時間大多數都固定在用藥后第四天，隨著用藥劑量的增加效果更加明顯，與臨床上其他治療方法相比，無論是起效快慢還是長久的治療效果，定癇丸提取液都具有其獨特的優勢。對于某些特殊類型的癲癇病，定癇丸提取液更是有不可替代的作用。研究中還發現癲癇具有病程長、反復發作的特點，患者意識障礙且肌肉抽搐，行為、感覺、情感等功能異常［9］。定癇丸雖然效果較好，但是在疾病的治療上其藥效維持的時間較短，若停止用藥，患者體內的藥最多可以維持兩天的作用，但是這恰恰又是定癇丸的另外一個特點，即不良反應小，安全性較高。

綜上所述，定癇丸治療小鼠的癲癇，效果明顯，且當劑量為400mg/kg·d時治療效果最佳，具有一定的安全性，在臨床上有一定的研究價值。

［1］周勝利，龍子江，蔡永亮，等.定癇丸對青霉素致癇大鼠腦組織MDA、SOD的影響［J］.中醫藥臨床雜志.2012，24（3）：278-280.

［2］周勝利，龍子江，蔡永亮，等.定癇丸對青霉素致癇大鼠腦組織環核苷酸（cAMP、cGMP）影響［J］.安徽醫藥.2011，15（11）：1344-1345.

［3］黃運生，陳寶田，劉志良，等.柴胡疏肝湯對戊四氮致癇大鼠海馬及額葉皮質c-fos表達的影響［J］.中華神經醫學雜志，2011，10（7）：662-665.

［4］潘鵬克.成人難治性癲癇藥物治療研究進展［J］.海南醫學院學報，2011，17（8）：149-150.

［5］于云紅，謝煒，趙云燕，等.同病異治對戊四氮點燃大鼠海馬區谷氨酸代謝通路的影響［J］.中國中西醫結合雜志，2013，33（1）：95-99.

［6］中華醫學會神經病學分會腦電圖與癲癇學組.抗癲癇藥物應用專家共識［J］.中華神經科雜志，2011，44（1）：56-64.

［7］Pernot F，Heinrlch C，Barbier L.Inflammatory changes during epileptogenesis and spontaneous seizures in a mouse model of mesiotemproal lobe epilepsy［J］.Epilepsia，2011，52（12）：2315-2325.

［8］潘心.中藥對癲癇神經保護作用的研究進展［J］.中風與神經疾病雜志，2011，28（4）：381-382.

［9］舒錦.柴貝止癇湯輔助治療難治性癲癇臨床觀察［J］.現代中西醫結合雜志，2012，21（18）：1973-1974.

［2016－06－10收稿，2016－07－07修回］［本文編輯：劉一洋］

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10.14172/j.issn1671-4008.2017.01.018

250031山東濟南，濟南軍區總醫院中醫中西醫結合科（孫洋馨，王翔艷）

王翔艷，Email：mail_wxy@sina.com