高效液相色譜法測定蒲地藍消炎片中 R，S－告依春含量

姜雪敏，楊立志

（黑龍江省雞西市食品藥品檢驗檢測中心，黑龍江 雞西 158100）

·檢驗檢測·

高效液相色譜法測定蒲地藍消炎片中 R，S－告依春含量

姜雪敏，楊立志

（黑龍江省雞西市食品藥品檢驗檢測中心，黑龍江 雞西 158100）

目的建立測定蒲地藍消炎片中 R，S－告依春含量的高效液相色譜（HPLC）法。方法 色譜柱采用Agilent Extend－C18柱(250 mm× 4.6 mm，5 μm)，流動相為甲醇－0.04%磷酸溶液（8∶92），檢測波長為245 nm，流速為1.0 mL／min。結果R，S－告依春進樣量在0.010 9～0.218 9 g范圍內(nèi)與峰面積積分值線性關系良好(r＝0.999 9)；R，S－告依春的平均回收率為98.01%，RSD為0.56% (n＝6)。結論 該法操作簡便，重復性好，結果準確，可作為蒲地藍消炎片的質(zhì)量控制方法。

R，S－告依春；蒲地藍消炎片；高效液相色譜法；含量測定

蒲地藍消炎片是由黃芩、蒲公英、苦地丁、板藍根制成的中成藥，具有清熱解毒、抗炎消腫的功效，用于治療癤腫、腮腺炎、淋巴腺炎、扁桃體炎等癥。其質(zhì)量標準[1]收載于衛(wèi)生部藥品標準，標準中無含量測定項，不能有效控制產(chǎn)品的質(zhì)量和療效。板藍根為方中主藥，R，S－告依春是其主要成分。為完善質(zhì)量控制標準，參考文獻[2－16]，采用高效液相色譜（HPLC）法測定蒲地藍消炎片中 R，S－告依春的含量。現(xiàn)報道如下。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

2010A型高效液相色譜儀（島津紫外檢測器，LC solution色譜工作站，日本島津公司）；AG285型電子分析天平(瑞士梅特勒托利多公司)；KQ－400KDE型超聲波清洗器(江蘇省昆山市超聲儀器有限公司)。

1.2 試藥

R，S－告依春對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號為111753－201103）；蒲地藍消炎片（伊春五加參藥業(yè)有限責任公司，批號為20141101，吉林道君藥業(yè)股份有限公司，批號為130902，140802）；水為屈臣氏蒸餾水，甲醇為色譜純，其余試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 色譜條件

色譜柱：Agilent Extend－C18柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)；流動相：甲醇－0.04%磷酸溶液（8∶92）；流速：1.0 mL／min；檢測波長：245 nm；柱溫30℃；進樣量：10 μL。理論板數(shù)按 R，S－告依春峰計算不低于5 000，分離度大于1.5。

2.2 溶液制備

對照品溶液：稱取 R，S－告依春對照品（含量為99.5%）11.00 mg，精密稱定，加甲醇制成 1 mL含10.94 μg／mL對照品的溶液，即得。

供試品溶液：稱取本品粉末2.055 2 g（規(guī)格為每片0.302 8 mg），精密稱定，置圓底燒瓶中，加50%甲醇50 mL，稱定質(zhì)量，加熱回流2 h，取出，放冷，再稱定質(zhì)量，用50%甲醇補足減失的質(zhì)量，用0.45 μm微孔濾膜濾過，即得。

陰性對照品溶液：按處方比例以相同工藝制成不含板藍根的陰性對照樣品，按供試品溶液的制備方法制備陰性對照品溶液。

2.3 方法學考察

陰性干擾試驗：取2.2項下3種溶液，按擬訂色譜條件進樣測定。結果陰性對照品溶液色譜中，在 R，S－告依春色譜峰相應位置無干擾峰出現(xiàn)，表明陰性樣品的其他組分對 R，S－告依春的測定無干擾（圖1）。

圖1 高效液相色譜圖

線性關系考察：分別精密吸取 R，S－告依春對照品溶液2，5，10，15，20，25 μL，注入液相色譜儀，記錄峰面積，以對照品進樣量為橫坐標（X，μg）、峰面積積分值為縱坐標（Y），進行線性回歸，得回歸方程 Y＝1.000 0× 107X－1.487 3×104，r＝0.999 9（n＝6），結果表明，R，S－告依春進樣量在0.010 9～0.218 9 μg范圍內(nèi)與峰面積積分值線性關系良好。

精密度試驗：精密吸取同一對照品溶液10 μL，連續(xù)進樣6次，計算峰面積。結果 R，S－告依春的平均峰面積值為1 087 324，RSD為0.72%（n＝6），表明儀器精密度良好。

穩(wěn)定性試驗：精密吸取同一供試品溶液（批號為20141101），分別于0，2，4，8，12，24 h時進樣10 μL，記錄峰面積。結果6次進樣 R，S－告依春峰面積的平均值為745 301，RSD為0.96%（n＝6），表明供試品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

重復性試驗：取同一批（批號為20141101）樣品，依法制備6份供試品溶液并進樣測定。結果 R，S－告依春平均含量為每片0.055 mg，RSD為0.96%（n＝6），表明方法重復性較好。

加樣回收試驗：稱取已知含量的同一批（批號為20141101，含量為每片 0.055 mg）樣品 6份，每份約1.0 g，精密稱定，置圓底燒瓶中，分別精密加入 R，S－告依春對照品溶液(109 μg／mL)2 mL，再精密加入50%甲醇48 mL，依法制備供試品溶液，并按擬訂色譜條件進樣測定，計算回收率。結果見表1。

表1 R，S－告依春加樣回收試驗結果（n＝6）

2.4 樣品含量測定

取蒲地藍消炎片3批，依法制備供試品溶液，按擬訂色譜條件測定本品中 R，S－告依春含量。結果批號為20141101，130902，140802的樣品中 R，S－告依春的含量分別為每片0.055，0.051，0.062 mg。

3 討論

3.1 流動相選擇

分別以乙腈－水、甲醇－0.5%甲酸溶液、甲醇－0.04%磷酸溶液為流動相進行試驗，結果以甲醇 －0.04%磷酸溶液為流動相時分離效果較好，基線平穩(wěn)，出峰時間縮短。故選擇甲醇－0.04%磷酸溶液作為流動相。

3.2 提取條件選擇

分別考察了以水、甲醇、50%甲醇作為溶劑，結果50%甲醇提取效果好，故以50%甲醇為溶劑；分別超聲提取20，40 min及加熱回流2 h，結果加熱回流2 h提取較完全，故采用加熱回流2 h。

3.3 檢測波長選擇

對 R，S－告依春于200～400 nm波長范圍內(nèi)進行紫外掃描，結果245 nm波長處有最大吸收，故選擇該波長作為檢測波長。

[1]WS3－B－0649－91.衛(wèi)生部藥品標準·中藥成方制劑(第三冊)[S].

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Content Determinating of R,S－Epigoitrin in Pudilanxiaoyan Tablets by HPLC

Jiang Xuemin,Yang Lizhi
(Jixi Inspection and Testing Center for Food and Drug,Jixi,Heilongjiang,China 158100)

Objective To develop an HPLC method for the content determination ofR,S－epigoitrin in Pudilanxiaoyan Tablets by HPLC.M ethods The separation was performed on a Agilent Extend－C18column(250 mm×4.6 mm，5 μm)using Methanol－0.04% Phosphoric acid solution(8∶92),The detection wave length was 245 nm and the flow rate was 1.0 mL／min.Results There was good linearity between the peak area and injection volume in the ranges of 0.010 9－0.218 9 μg(r＝0.999 9).The average recovery of R,S－epigoitrin was 98.01%,RSD＝0.56%(n＝6).Conclusion The method is simple,reproducidility and accurate,which can be used for the content determination of Pudilanxiaoyan Tablets.

R,S－epigoitrin;Pudilanxiaoyan Tablets;HPLC;content determination

R284.1；R286.0

A

1006－4931(2017)05－0035－03

2016－11－23；

2016－12－23)

10.3969／j.issn.1006－4931.2017.05.009

姜雪敏（1979－），女，大學本科，副主任藥師，主要從事食品藥品檢驗檢測工作，（電子信箱）jiangxuemin88＠163.com。