HPV-DNA聯合HPV-E6蛋白檢測在宮頸癌篩查中的價值

張建華, 趙宗霞, 張 瑾

(西安醫學院第二附屬醫院 婦產科, 陜西 西安, 710038)

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HPV-DNA聯合HPV-E6蛋白檢測在宮頸癌篩查中的價值

張建華, 趙宗霞, 張 瑾

(西安醫學院第二附屬醫院 婦產科, 陜西 西安, 710038)

目的 探討HPV-DNA聯合HPV-E6蛋白檢測用于篩查宮頸癌的價值。方法 選取近期來我院門診就診檢查的患者中選取宮頸液基細胞學檢查(TCT)為陽性的患者作為觀察對象，共計525例，并對以上患者分別行HPV-DNA檢測、HPV-E6蛋白檢測及宮頸活組織檢查，比較HPV-DNA及HPV-E6蛋白兩種單獨檢測及聯合檢測對于宮頸癌篩查的臨床價值。結果 TCT陽性的患者中, 375例為子宮頸正常或宮頸炎, 134例為上皮內瘤變, 14例為宮頸癌。HPV-DNA檢測出的陽性率在宮頸癌前病變中均顯著高于HPV-E6蛋白檢測法(P<0.05)。宮頸癌的檢測率均為100.0%。在上皮內瘤變和宮頸癌的檢出率比較中, 3組比較差異有統計學意義(P<0.05), 其中聯合檢測陽性率高于HPV-DNA及HPV-E6蛋白單獨檢測。結論 隨著宮頸病變程度的加重，檢測的陽性率也逐漸升高, HPV-DNA檢測具有較高的靈敏度, HPV-E6蛋白檢測有較高的特異度, 二者聯合檢測可提高宮頸病變檢出的靈敏度。

HPV-DNA; HPV-E6蛋白檢測; 宮頸癌; 篩查

宮頸癌屬于女性常見的惡性腫瘤疾病之一，近年來該病發病率呈現上升趨勢和年輕化，已嚴重威脅女性的生命健康[1]。宮頸癌的主要治療在于預防，早期發現并采取必要的措施是治療宮頸癌的重要手段，也是降低宮頸癌患者發病率及死亡率的重要途徑[2]。目前臨床上關于宮頸癌發病的重要致病因素報道較多，但最為主要的致病因素仍然以高危型人乳頭瘤病毒(HPV)為主[3]。中國已逐步加強對于宮頸癌的篩查工作，其中以HPV-DNA檢測作為重要的輔助手段，然而HPV-DNA在凋亡細胞及細胞碎屑中也可表達，故單純的采用HPV-DNA檢測有可能造成宮頸病變的過度治療[4]。有研究[5]發現, HPV-E6基因能夠抑制腫瘤抑制因子p53的凋亡作用，可導致HPV癌蛋白的表達，在抑制細胞凋亡、促進腫瘤表達等方面起到至關重要的作用。本文通過比較HPV-DNA與HPV-E6蛋白聯合檢測在正常宮頸組織、宮頸上皮內瘤變及宮頸癌中的檢出率，評價其在宮癌篩查中的靈敏度及特異度，現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2012年3月—2015年3月來本院門診就診檢查的患者中宮頸液基細胞學檢查(TCT)為陽性(以無明確意義的非典型細胞的改變及其以上者判斷為細胞學結果陽性)的患者作為觀察對象，共計525例。年齡20～85歲，平均年齡(42.5±12.5)歲，對所有患者均行HPV-DNA檢測、HPV-E6蛋白及宮頸活組織檢查，最終診斷以病理結果為準。所有患者均簽署知情同意書。納入標準: ① 所有患者自愿行宮頸癌篩查; ② 所有患者否認宮頸癌病史; ③ 患者近期至少1周內無性生活, 1年內未行宮頸活檢; ④ 患者近期無陰道感染史，未行陰道及宮頸操作或治療史; ⑤ 檢查期間月經未來潮。排除標準：患者有自身免疫性疾病，自身合并有嚴重心、肝、腎功能障礙，無性生活史，既往有宮頸癌病史或合并有惡性腫瘤病史，既往行全子宮切除術或治療史。

1.2 方法

所有患者仰臥于婦科專用檢查床上，用陰道內窺器充分暴露宮頸，并用無菌紗布擦凈宮頸口分泌物。使用TCT采樣專用宮頸刷，沿宮頸鱗柱狀交界部位順序旋轉10圈，并將采集的脫落細胞裝在專用固定液的收集瓶內，收集完畢后，填寫患者相關信息送病理科待檢。HPV-DNA采樣使用專用采樣刷，沿宮頸鱗柱狀交界部位順序旋轉5圈，將采集的脫落細胞裝在含有保存液的HPV-DNA專用采樣管內，收集完畢后，填寫患者相關信息送病理科待檢。HPV-E6蛋白采樣使用專用棉簽，沿宮頸鱗柱狀交界部位刷取脫落細胞，并置于干凍管中，送實驗室凍存并檢測。本次診斷結果以病例檢查結果為金標準, 525例中TCT檢查陽性的患者中有375例患者病理結果提示宮頸正常或宮頸炎; 136例患者病理結果提示宮頸上皮內瘤變，其中CINⅠ70例、CINⅡ40例、CINⅢ26例; 14例病理結果診斷為宮頸癌。所有病理診斷結果均由病理科的病理技師和病理醫師完成。

2 結 果

2.1 單獨使用HPV-E6蛋白、HPV-DNA與聯合

檢測病理結果的比較

經病理科組織病理學檢查結果確診的上皮內瘤變(CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ)及宮頸癌共150例，HPV-DNA陽性率分別為87.1%、90.0%、88.5%、100.0%。HPV-E6蛋白陽性率分別為48.6%、55.0%、84.6%、100.0%。二者聯合陽性率分別為91.4%、92.5%、100.0%、100.0%。對以上4種病理結果進行分析、比較，發現隨著宮頸病變程度的加重，檢測的陽性率也逐漸升高，其中HPV-DNA檢測出的陽性率在宮頸癌前病變中均顯著高于HPV-E6蛋白檢測法(P<0.05)。宮頸癌的檢測率均為100.0%, 無1例漏診。病理陽性者中, HPV-DNA、HPV-E6蛋白及二者聯合檢測在上皮內瘤變和宮頸癌的檢出率比較中, 3組比較差異有統計學意義(P<0.05), 其中聯合檢測陽性率高于HPV-DNA及HPV-E6蛋白單獨檢測。見表1。

表1 單獨使用HPV-E6蛋白、HPV-DNA與聯合檢測病理結果的比較[n(%)]

2.2 單獨使用HPV-E6蛋白、HPV-DNA與聯合檢測相關評價指標的對比

分析、比較HPV-DNA、HPV-E6蛋白與聯合檢測的靈敏度、特異度、漏診率、誤診率，發現HPV-DNA靈敏度高于HPV-E6蛋白檢測，漏診率少, HPV-E6蛋白檢測特異度高達90.7%, 但靈敏度相對較低，僅為61.3%, 漏診率較高，較HPV-DNA檢測方法差異有統計學意義(P<0.05)。聯合檢測相對于單獨檢測稍提高靈敏度，降低了漏診率。見表2。

表2 單獨使用HPV-DNA、HPV-E6蛋白與聯合檢測相關評價指標的對比 %

3 討 論

宮頸癌在婦科惡性腫瘤發病率中位居第2位，該病屬于漸進性疾病，宮頸上皮內瘤變是發展為宮頸癌的必經之路，而由上皮內瘤變發展為宮頸癌是一個較為漫長的過程，因此對于預防宮頸癌發生的患者來說，早期診治是預防發生的宮頸癌的重要措施[6]。近年來關于宮頸癌發病因素最重要的因素之一就是HPV感染，檢測HPV的方法是目前普遍用于篩查宮頸癌的重要措施[7]。該檢測方法敏感度較高，可重復性好，對于低級別的CIN特異度高。由于HPV-DNA在壞死及凋亡細胞中也可被表達，對于區分是宮頸炎還是宮頸癌較為受限，因此在篩查后會造成過度診治的可能，對患者造成不可預估的傷害[8]。為了提高篩查宮頸癌及癌前病變的特異度，研究[9]發現HPV-E6是導致宮頸癌及其癌前病變的主要基因, HPV-E6蛋白的表達與病情的嚴重程度呈正比。

本研究探討HPV-DNA檢測及HPV-E6蛋白檢測兩種單獨檢測與聯合檢測應用于篩查宮頸癌的價值。結果發現, TCT陽性的患者中375例為子宮頸正常或宮頸炎, 134例為上皮內瘤變，14例為宮頸癌。HPV-DNA檢測出的陽性率在宮頸癌前病變中均顯著高于HPV-E6蛋白檢測法(P<0.05)。宮頸癌的檢測率均為100.0%, 無1例漏診。在上皮內瘤變和宮頸癌的檢出率比較中, 3組比較差異有統計學意義(P<0.05), 其中聯合檢測陽性率高于HPV-DNA及HPV-E6蛋白單獨檢測。HPV-DNA靈敏度高于HPV-E6蛋白檢測，漏診率少, HPV-E6蛋白檢測特異度高達90.7%, 但靈敏度相對較低，僅為61.3%, 漏診率較高，較HPV-DNA檢測方法有顯著差異(P<0.05)。隨著宮頸癌的程度的加重，兩種檢測聯合檢測的陽性率也呈上升趨勢[10]。該結果也從側面反映出，宮頸癌的發生、發展與HPV的感染關系密切，因此臨床上在篩查宮頸癌時，尤其要著重檢測HPV[12]。有報道[13]指出, HPV感染的陽性率與宮頸病變的程度平行，在宮頸癌篩查的早期，檢測HPV感染具有重要的意義。盡管HPV-DNA檢測操作簡單，可重復性好，靈敏度高，但也存在不足之處，由于該檢測特異度低，會導致誤診率的增高，在一定程度上會發生過度治療的可能，因此，結合其他輔助檢查，幫助提高宮頸病變的特異度顯得尤為重要[14]。本研究發現HPV-DNA檢測的靈敏度高，特異度低, HPV-E6蛋白檢測特異度高，但靈敏度較低。因此采用聯合檢測，可進一步降低漏診率，且增加靈敏度，在臨床上篩查宮頸癌時具有較高的參考價值。

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Value of HPV-DNA combined with HPV-E6 protein in screening of cervical cancer

ZHANG Jianhua, ZHAO Zongxia, ZHANG Jin

(DepartmentofGynecologyandObstetrics,TheSecondAffiliatedHospitalofXi′anMedicalCollege,Xi′an,Shaanxi, 710038)

Objective To explore the value of HPV-DNA combined with HPV-E6 protein in the detection of cervical cancer. Methods A total of 525 patients with positive TCT were selected and treated with HPV-DNA detection, HPV detection of E6 protein and cervical biopsy. Value of HPV-DNA and HPV-E6 proteins single application and combined detection for cervical cancer screening was compared. Results In the patients with positive TCT, 375 cases were normal or cervicitis, 134 cases were intraepithelial neoplasia, and 14 cases were cervical cancer. The positive rate of HPV-DNA was significantly higher than that of HPV-E6 protein in cervical precancerous lesions (P<0.05). The detection rate of cervical cancer was 100%. In comparison of the detection rate of intraepithelial neoplasia and cervical cancer, there were significant differences between the three groups (P<0.05), and the positive rate of combined detection was higher than that of HPV-DNA and HPV-E6 protein. Conclusion With the increasing severity of cervical lesions, the positive detection rate increases gradually. HPV-DNA has higher detection sensitivity, and detection of HPV-E6 protein has high specificity. The combined detection can improve the sensitivity of cervical lesions.

HPV-DNA; HPV-E6 protein detection; cervical cancer; screening

2017-01-12

陜西省教育廳科研課題(2013JK0797)

R 737.33

A

1672-2353(2017)07-074-03

10.7619/jcmp.201707020