盔狀黃芩中的新克羅烷型二萜化合物

肖凱+張雷+韓慶通+戴勝軍

[摘要]應用硅膠柱色譜、Sephadex LH-20柱色譜及高效制備薄層等方法對盔狀黃芩中的二萜單體進行分離純化，根據理化性質和波譜數據對其化學結構進行解析，發現并鑒定了14個新克羅烷型二萜，分別為半枝蓮堿D（1），scutolide A（2），scutol-ide K（3），scutebata J（4），scutebata I（5），6-乙酰氧基河南半枝蓮堿A（6），半枝蓮素C（7），scutolide E（8），barbatine C（9），半枝蓮堿Y（10），半枝蓮堿B（11），scutestrigillosin A（12），scutebata O（13），scutolide B（14）。化合物1～14均為首次從盔狀黃芩中發現。

[關鍵詞]唇形科；黃芩屬；盔狀黃芩；新克羅烷型二萜

盔狀黃芩為唇形科黃芩屬植物盔狀黃芩的干燥全草，為多年生草本植物，國內主產于陜西、內蒙古、新疆等地，國外主要分布于歐洲各國、蒙古、日本等國家。盔狀黃芩性寒、味苦，歸肺膽、脾胃、大腸經，具有清熱解毒、活血止痛、利尿消腫等功效，臨床主要用于治療淋癥、肝炎、瘧疾等疾病。

預實驗中，課題組應用四甲基偶氮唑鹽微量酶反應比色法（MTT），對盔狀黃芩95%乙醇提取物的細胞毒活性進行研究，發現其95%乙醇提取物對肺癌A549、淋巴癌P288及乳腺癌MCF-7細胞株有顯著的生長抑制作用。文獻調研發現，研究人員對盔狀黃芩中抗腫瘤物質基礎的研究主要集中于黃酮、苷類、酚類等化合物。通過TLC，HPLC.MS等方法發現，盔狀黃芩95%乙醇提取物含有二萜化合物，為此，通過多種色譜分離技術，對盔狀黃芩95%乙醇提取物中的二萜化合物進行了研究，共發現14個新克羅烷型二萜單體。根據理化性質及波譜數據，對其化學結構進行了確定，包括：6個二萜（化合物2～5，7～8），8個二萜生物堿（化合物1，6，9～14），化合物1～14均為首次從盔狀黃芩中發現。

1材料

XT4微型熔點測定儀（溫度未校正），Perkin.ElreeF 241型旋光儀，Autospec-ultima ETOF型質譜儀，AVANCE IIITM 500型核磁共振儀（TMS內標）；聚酰胺（30～60目）購自上海今瑞化工產品有限公司，Sephadex LH-20為北京金歐亞進口分裝產品，薄層色譜硅膠（、柱色譜硅膠（200～300目）及高效制備薄層硅膠板（HPTLC，20cmX20cm）均為青島海洋化工廠產品。盔狀黃芩全草采自新疆烏魯木齊，由煙臺大學藥學院生藥學教研室李桂生博士鑒定，標本（YPl3065）保存于煙臺大學藥學院標本室。

2提取和分離

取干燥的盔狀黃芩全草40.0kg，粉碎后用95%乙醇回流提取3次，每次1h。提取液合并、減壓濃縮，得總浸膏2.8kg。將浸膏懸浮于水中，依次用石油醚、氯仿、醋酸乙酯、正丁醇反復萃取，萃取液分別合并、減壓濃縮，得氯仿部位305.7g。氯仿部位首先使用聚酰胺柱色譜，分別用去離子水、45%乙醇洗脫，45%乙醇洗脫液減壓濃縮，得浸膏109.8g；浸膏通過硅膠柱色譜（10cmx120cm），環己烷.丙酮梯度洗脫（90：10～50：50），分為20個組分。組分7（9.0g），8（13.0g）先后經Sephadex LH-20柱色譜（氯仿.甲醇洗脫，1：4）、高效制備薄層（20cmx20cm，氯仿-丙酮展開，92：8）分離得化合物1（232mg），2（65mg）；組分11（14.1g）先后經過SephadexLH-20柱色譜（氯仿.甲醇洗脫，1：4）、高效制備薄層色譜（氯仿.丙酮展開，9：1）分離得到化合物3（68mg），9（132mg）；組分15（10.2g），16（13.1g）先后通過Sephadex LH-20柱色譜（氯仿.甲醇洗脫，1：4）、高效制備薄層色譜（氯仿.丙酮展開，82：18）分離得到化合物4（31mg），5（113mg），6（70mg），7（43mg），8（110mg），10（64mg），11（58mg），12（44mg），13（60mg），14（10mg）。

3結構鑒定

4討論

預實驗顯示，盔狀黃芩95%乙醇提取物對肺癌A549、淋巴癌P288及乳腺癌MCF-7細胞株有顯著的生長抑制作用。從盔狀黃芩的95%乙醇提取物中分離鑒定了14個新克羅烷型二萜化合物，均為首次從該植物中獲得。根據之前的文獻報道，實驗得到的新克羅烷型二萜對多種腫瘤細胞具有抑制活性，結合預試驗中該植物95%乙醇提取物具有的的抗腫瘤活性，對新克羅烷型二萜作為盔狀黃芩的抗腫瘤藥效物質基礎進行了初步探明，為進一步開發利用盔狀黃芩提供了科學依據。