任飛宇
(內蒙古自治區烏蘭察布市中心醫院,內蒙古 集寧 012000)
HPLC法測定達斡爾習用藥材柳蒿芽不同部位中金絲桃苷的含量
任飛宇
(內蒙古自治區烏蘭察布市中心醫院,內蒙古 集寧 012000)
目的:建立民族藥材柳蒿芽中金絲桃苷的HPLC測定方法。方法: HPLC法,流動相:甲醇-水-磷酸-三乙胺溶液(25:30:0.1:0.15),流速:1.0mL·min-1,檢測波長:350nm,柱溫:30℃。結果:金絲桃苷在0.007~0.464μg范圍內呈良好的線性關系,r=0.9999;平均回收率為98.56%,RSD為0.82%(n=6)。柳蒿芽不同部位金絲桃苷含量,葉0.29%、莖0.24%,根0.06%,金絲桃苷平均含量為0.197%。結論:HPLC法測定柳蒿芽中金絲桃苷含量,方法簡便、準確、快速,可做為柳蒿芽質量評價方法之一。
HPLC法;柳蒿芽;金絲桃苷
柳蒿芽學名蔞蒿Artemisin Selengensis Turcz,是菊科屬多年草本植物,又名柳葉蒿、香葉蒿,蒙古名庫木勒,既可食用,也可全草入藥,是達斡爾人藥食兩用的野生植物,具有養肝健胃、清熱解毒作用[1]。藥理學研究表明,柳蒿芽有降壓、降血脂、抗氧化、耐缺氧、免疫調節、消炎作用[2]。化學成分主要有蘆丁、胡蘿卜素、谷甾醇、芹菜素、木犀草素、揮發油類[2]。本文建立藥材金絲桃苷HPLC的質量評價方法,報道如下。
1.1 儀器:1100型高效液相色譜儀 (美國安捷倫公司),SPD-2A紫外檢測器(島津),TJ-912型色譜分析平臺(太極計算機公司),IN-180型柱溫箱(上海英泰科技研究所),SH6150D超生波清洗器(上海昆山),電子天平(梅特勒)。
1.2 試藥:金絲桃苷對照品(111521-200303)由中國藥品生物制品檢定所提供;甲醇為色譜純;其他均為分析純試劑;水為純化水;柳蒿芽于2014年6月采自內蒙古和林格爾南天門林場。
2.1 色譜條件:Kromasi -C18柱(200mm×4.6mm,5μm);流動相:甲醇-水-磷酸-三乙胺溶液(25:30:0.1:0.15);流速:1mL·min-1;溫度:30℃;檢測波長:350nm nm;進樣量10μL。在此條件下待測組分可達到基線分離。樣品中金絲桃苷與其它組分有較好的分離,見圖1。

2.2 對照品溶液的制備:精密稱取金絲桃苷對照品適量,加甲醇制成0.58mg·mL-1的溶液,即得。
2.3 供試品溶液的制備:取本品干燥、粉碎,過篩,精密稱定400mg,置具塞錐形瓶中,精密加入甲醇10mL,稱質量,超聲處理30min ,放冷,稱重,用甲醇補足減失的質量,搖勻,濾過,取續濾液備用,即得。
2.4 線性關系考察:精密吸取對照品溶液0.1、0.2、0.4、1、2、4、8mL,分別加到10mL量瓶中,加甲醇稀釋到刻度,搖勻,注入高效液相色譜儀,測定峰面積;以峰面積為縱坐標(Y),進樣量為橫坐標(X)做線性回歸, 回歸方程為Y = 2284159 X +58465,r=0.9999。結果表明,金絲桃苷在0.0058~0.464μg范圍內呈良好的線性關系。
2.5 穩定性實驗:取同1份供試品溶液,分別在0,2,4,8h進樣測定,以金絲桃苷峰面積值計算RSD為0.36%。結果表明,供試品溶液在8h內穩定。
2.6 精密度實驗:吸取同一批供試品溶液,在上述色譜條件下重復進樣6次,測得金絲桃苷峰面積RSD為0.42%,符合測定要求。
2.7 重復性實驗:取同批藥材(葉)按2.3項下平行制備6份樣品溶液,并按2.1項下測定,金絲桃苷的平均含量為0.29%, RSD=1.21%,符合測定要求。
2.8 加樣回收率實驗:取同批藥材(葉)已知含量的樣品6份,每份取約300mg,精密稱定,精密加入金絲桃苷對照品溶液0.2 mL(0.58 mg/mL),按2.3項下制備樣品溶液,同法操作,測定含量,計算回收率。結果,金絲桃苷平均回收率為98.56%,RSD為0.82%,符合測定要求。
按2.3 項下方法制備供試品溶液,按擬定的色譜條件測定柳蒿芽不同部位金絲桃苷含量,葉0.29%、莖0.24%,根0.06%,柳蒿芽金絲桃苷平均含量0.197%。
柳蒿芽為達斡爾人習用的野菜,營養豐富、美味可口、風味獨特,特別對于脾胃肝腎受損或亞健康狀態者極為適合。目前市場有售,多為由人工栽培品。藥理學研究已經證實,柳蒿芽無毒副作用,具有調節血脂、血糖、抗氧化作用,是一個具有開發潛力,藥食同源的藥材。本文初步建立柳蒿芽有效成分含量測定方法,為柳蒿芽的進一步的研究開發提供參考數據。
[1]托亞,金曉紅.達翰爾人喜食-柳蒿芽[J].中國民間療法,2007,8(15):10.
[2]董強.東北林業大學碩士學位論文[D].2010
2016年10月11日收稿
R292.2
B
1006-6810(2017)01-0045-02