GC-MS法同時測定扎沖十三味丸中麝香酮和丁香酚含量

韓春平 席海山 李 江

(1.內蒙古民族大學化學化工學院,內蒙古 通遼 028042；2.內蒙古民族大學分析測試中心，內蒙古 通遼 028042)

GC-MS法同時測定扎沖十三味丸中麝香酮和丁香酚含量

韓春平1席海山2李 江1

(1.內蒙古民族大學化學化工學院,內蒙古 通遼 028042；2.內蒙古民族大學分析測試中心，內蒙古 通遼 028042)

目的：建立GC-MS法同時測定蒙藥扎沖-13中麝香酮和丁香酚的含量。方法：色譜柱為HP-5MS(30m×0.25mm×0.25μm)；程序升溫，初始溫度50℃，以10℃ min-1升溫至120℃，再以20℃·min-1升溫至250℃；汽化室溫度為260℃；高純度He氣為載氣；載氣流速為2mL·min-1；進樣量為1μL；分流比為20：1。結果：麝香酮標準曲線為Y= 693570.6+1.43739×108×X(R=0.9993，N=5)；丁香酚標準曲線為Y = 1.65309×108+ 5.03683×108×X(R=0.9957，N=5)；樣品中丁香酚的平均含量為0.2325%、麝香酮的平均含量為0.0110%；RSD分別為1.2026%和0.6350%。結論：該方法簡便、快速、準確，適用于蒙藥中丁香酚、麝香酮的含量測定。

GC-MS法；扎沖-13；丁香酚；麝香酮；含量

扎沖-13丸是由丁香、麝香、訶子、甘草等13味藥材制成。此藥主要功能有祛風通竅，活血安神，用于治療半身不遂，身體癱瘓，四肢麻木，風濕，關節疼痛，言語不清，腰腿不利，神經麻痹等癥狀[1-2]。

丁香在我國主要分布于西南、西北、華北和東北地區，多年來在中藥領域已有很廣泛的應用，具有溫中降逆，補腎的功能，同時也可用于治療脾胃虛寒，食少吐瀉。丁香酚是丁香的主要成分之一，可用于抗菌、降低血壓和健胃，因丁香酚具有強烈的香氣,還可用于食物香精、香水和化妝品，天然丁香酚是由桃金娘科植物丁香的花蕾的揮發油經萃取，酸化，精餾等程序制得，難溶于水，可溶于乙醇、乙醚等溶劑[3]。

麝香在我國主要分布于東北、華北、陜西等地，麝香是成熟雄體香囊的干燥分泌物，主要功能是消腫止痛，活血通絡，用于治療中惡昏迷，麻木，心腹爆痛等[4]，其主要藥理作用成分為麝香酮，具有擴張冠狀動脈及增加冠狀脈血流量的作用，麝香酮具有特殊的香味，微溶于水，能與乙醇混溶。

本文利用氣相色譜-質譜聯用儀測定待測物的定量離子峰積分面積，采用標準曲線法，通過待測物的含量與定量離子峰的積分峰面積的線性關系測定蒙藥扎沖-13中丁香酚和麝香酮的含量。氣相色譜-質譜聯用儀是通過使樣品離子化，再利用質譜儀使離子分離，最后由檢測器檢測，從而測得分子的結構信息。具有操作簡單、實驗重現性好、分析準確和效率高的特點，旨在為蒙藥中各組分的含量分析提供科學可靠的方法。

1 實驗藥品與儀器

1.1 實驗材料及試劑：扎沖-13(內蒙古民族大學附屬醫院蒙藥制劑室，批號為9804-4)，無水乙醇，(國藥集團化學試劑北京有限公司，批號為10009259)，麝香酮(中國藥品生物制品檢定所，批號為110719-200512)，丁香酚(北京恒元啟天化工技術研究院，批號為MUST-10120607)。

1.2 實驗儀器：電子天平(上海精密儀器公司)，DSQ-SII-GCMS型氣相色譜-質譜聯用儀(美國-Thermo Fisher)。

2 實驗部分[5-10]

2.1 標準對照樣品的制備：在樣品管中準確加入1mL無水乙醇，再分別用微量進樣器精確加入1μL的丁香酚和麝香酮標準對照樣品，做好標簽；稱取標準對照樣品麝香酮加到樣品管中配制成濃度分別為0.0092mg/mL、0.0180mg/mL、0.0276mg/mL、0.0368mg/mL、0.0460mg/mL的標準對照樣品溶液，做好標簽；稱取標準對照樣品丁香酚加到樣品管中配制成濃度分別為0.2 mg/mL、0.4 mg/mL、0.6 mg/mL、0.8 mg/mL、1.0 mg/mL的標準對照樣品，做好標簽。

2.2 待測樣品的制備：將待測扎沖-13研磨成精細粉末，用電子天平稱取樣品1.0001g置于20mL燒杯中，同時加入約9mL的無水乙醇，再將燒杯中的樣品溶液轉移至10mL的容量瓶中，定容至10mL，經密塞、震搖，放置一小時后，取1mL該樣品經微孔過濾器進行過膜處理后加入到樣品管中，并做好標簽。

2.3 儀器測試條件：色譜柱HP-5MS(30m×0.25mm×0.25μm)；采取程序升溫方式，初始溫度為50℃，以10℃·min-1升溫至120℃，再以20℃min-1升溫至250℃；汽化室溫度為260℃；用高純度He氣做為載氣；載氣流速為2mL·min-1；進樣量為1μL；分流比為20：1。

2.4 標準樣品、待測樣品色譜圖：取做好標簽的待測樣品和標準樣品于該固定測試條件下，經氣相色譜-質譜聯用儀測得標準樣品色譜圖(見圖1)和待測樣品的色譜圖(見圖2)。

圖1中丁香酚的保留時間為12.63min，麝香酮的保留時間為16.37min，圖2中丁香酚的保留時間為12.63min，麝香酮的保留時間為16.37min

2.5 麝香酮和丁香酚標準曲線的建立：將上述麝香酮和丁香酚標準對照樣品溶液進樣、測定，記錄其積分峰面積，用其積分峰面積Y和標準對照品含量X進行線性回歸，求得麝香酮線性回歸方程為：Y= 693570.6+ 1.43739×108×X(R=0.9993，N=5)；丁香酚線性回歸方程為：Y=1.65309×108+ 5.03683×108×X(R=0.9957，N=5)

2.6 精密度實驗： 精確量取一定量的同一種試樣，在上述色譜條件下，重復進樣5次，測定其特征峰積分面積。測得丁香酚的峰面積分別為：2.74725×108、2.76745×108、2.69855×108、2.73825×108、2.74945×108，含量的RSD=2.34%(n=5)；麝香酮的峰面積分別為：2.40064×106、2.43215×106、2.39546×106、2.40943×106、2.41298×106，含量的RSD= 1.12%(n=5)，說明該儀器精密度優良。

2.7 穩定性實驗：取一定量的同一份制備好的供試品溶液，按以上色譜條件與于0h、6h、12h、18h、24h測定其特征峰積分面積，最終測得蒙藥扎沖-13中丁香酚與麝香酮含量的RSD=1.65%(n=5)，說明供試品溶液在24h內穩定性優良。

2.8 加樣回收實驗：精確量取已知質量分數的樣品0.1006 g，加入對照品麝香酮2.4mg，對照品丁香酚0.20 mg，按照本實驗的色譜條件，測定其含量，結果見表1。

表1 回收率測定結果

3 樣品含量的測定

取3份待測樣品溶液進樣1μL，在特定色譜條件下進行測定，計算麝香酮與丁香酚的含量，結果見表2。

表2 含量測定結果

4 結論

4.1 色譜柱的選擇：本實驗嘗試采用了其他色譜柱，經實驗發現，待測離子很難分離，而本實驗采用的色譜柱HP-5MS(30m×0.25mm×0.25μm)，實現了麝香酮和丁香酚良好的分離，峰型對稱。

4.2 萃取溶劑的選擇：本實驗嘗試了使用無水乙醇、環己烷、乙醚同時萃取麝香酮和丁香酚的效率，實驗發現使用無水乙醇作為萃取溶劑經密塞、震搖、放置1小時后，其萃取效率最高。

4.3 實驗方法：本文建立GC-MS法測定蒙藥扎沖-13的方法便捷快速、準確且易于操作，同時也有較好的重現性和回收率，并且，本方法即使在待測樣品是含多組分的情況下，也可以較好地完成其定性、定量的測定。

[1]趙淼，付沖，徐冰心.RP-HPLC測定丁桂散中的丁香酚的含量[J].光譜儀器與分析，2003，1(4)：40-41.

[2] 李曉松，葉銳彬等.氣相色譜法測定傷科止痛膏中麝香酮的含量[J].中藥與臨床，2010，1(2)：34-35.

[3] 國家藥典委員會.中國藥典(一部)[S].北京：化學工業出版社，2000：3-4.

[4] 中華人民共和國衛生部藥典委員會.中華人民共和國衛生部藥品標準蒙藥分冊[M].內蒙古自治區藥品檢驗所，1998：70-70.

[5] 袁勁松，湯翠娥.氣相色譜法測定紫金膠囊中麝香酮含量[J].中國醫院藥學雜志，2003，23(2)：89-91.

[6]周長征，馬長華，等.氣相色譜法測定細辛揮發油中甲基丁香酚和黃樟醚含量[J].中國藥學雜志，2007,42(13)：1031-1033.

[7]王靜，岳秀峰，等.蒙藥紅花清肝十三味丸中丁香酚含量的測定方法研究[J].內蒙古醫學院學報，2012，34(1)：65-68.

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[9]蔣受軍，王成芳，等.氣相色譜法測定同仁牛黃清心丸中麝香酮的含量[J].中國醫藥信息雜志，2012,19(9)：64-65.

[10]呂霞，郭青，等.氣相色譜法測定六神丸中麝香酮的含量[J].中國藥業，2010，19(21)：24-25.

2016年9月13日收稿

Simultaneous Determination of Muscone and Eugenol in Mongolia drug Zha Chong-13by GC-MS

HAN Chun-ping1，XI Hai-shan2，LI Jiang1

1.College of Chemistry and Chemical Engineering, Inner Mongolia University for Nationalities;2.Analysis and Testing Center.Tongliao 028042

Objective:To determine the contents of muscone and eugenol simultaneously in Mongolia drug Zha Chong-13 by Gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS) method. Methods: The GC system consisted of HP-5MS (30m×0.25mm×0.25μm) Chromatographi column. Programmed temperature was set from 50℃ to 120℃ with 10℃·min-1, and then raised the temperature from 120℃ to 250℃ with 20℃·min-1. High pure helium was used as carrier gas with the flow rate of 2mL·min-1and with an injection volume of 1μL(split ratio of 20:1). Results: The two components muscone and eugenol had good linear relationship in the corresponding concentration ranges respectively. The standard curve of muscone was Y= 693570.6+ 1.43739×108×X (R=0.9993, N=5), and the standard curve of eugenol was Y=1.65309×108+ 5.03683×108×X(R=0.9957, N=5). The average contents of muscone and eugenol are 0.0110% and 0.2325% respectively. Conclusion: The results indicated the GC-MS method is a rapid and efficient method for determination the contents of muscone and eugenol in Mongolia drug Zha Chong-13.

Gas chromatography-mass spectrometry method;Mongolia drug Zha Chong-13;Muscone;Eugenol; Content

國家民委科研項目(14NMZ002)

韓春平(1963—)，女(蒙古族)，副教授，碩士。從事化學教學和蒙藥化學研究。聯系電話：cel：13948558889； E-mail：hanchunping0475@163.com

R291.2

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1006-6810(2016)01-0046-02