GC-MS法同時測定扎沖十三味丸中麝香酮和丁香酚含量

韓春平 席海山 李 江

(1.內(nèi)蒙古民族大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院,內(nèi)蒙古 通遼 028042；2.內(nèi)蒙古民族大學(xué)分析測試中心，內(nèi)蒙古 通遼 028042)

GC-MS法同時測定扎沖十三味丸中麝香酮和丁香酚含量

韓春平1席海山2李 江1

(1.內(nèi)蒙古民族大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院,內(nèi)蒙古 通遼 028042；2.內(nèi)蒙古民族大學(xué)分析測試中心，內(nèi)蒙古 通遼 028042)

目的：建立GC-MS法同時測定蒙藥扎沖-13中麝香酮和丁香酚的含量。方法：色譜柱為HP-5MS(30m×0.25mm×0.25μm)；程序升溫，初始溫度50℃，以10℃ min-1升溫至120℃，再以20℃·min-1升溫至250℃；汽化室溫度為260℃；高純度He氣為載氣；載氣流速為2mL·min-1；進樣量為1μL；分流比為20：1。結(jié)果：麝香酮標(biāo)準(zhǔn)曲線為Y= 693570.6+1.43739×108×X(R=0.9993，N=5)；丁香酚標(biāo)準(zhǔn)曲線為Y = 1.65309×108+ 5.03683×108×X(R=0.9957，N=5)；樣品中丁香酚的平均含量為0.2325%、麝香酮的平均含量為0.0110%；RSD分別為1.2026%和0.6350%。結(jié)論：該方法簡便、快速、準(zhǔn)確，適用于蒙藥中丁香酚、麝香酮的含量測定。

GC-MS法；扎沖-13；丁香酚；麝香酮；含量

扎沖-13丸是由丁香、麝香、訶子、甘草等13味藥材制成。此藥主要功能有祛風(fēng)通竅，活血安神，用于治療半身不遂，身體癱瘓，四肢麻木，風(fēng)濕，關(guān)節(jié)疼痛，言語不清，腰腿不利，神經(jīng)麻痹等癥狀[1-2]。

丁香在我國主要分布于西南、西北、華北和東北地區(qū)，多年來在中藥領(lǐng)域已有很廣泛的應(yīng)用，具有溫中降逆，補腎的功能，同時也可用于治療脾胃虛寒，食少吐瀉。丁香酚是丁香的主要成分之一，可用于抗菌、降低血壓和健胃，因丁香酚具有強烈的香氣,還可用于食物香精、香水和化妝品，天然丁香酚是由桃金娘科植物丁香的花蕾的揮發(fā)油經(jīng)萃取，酸化，精餾等程序制得，難溶于水，可溶于乙醇、乙醚等溶劑[3]。

麝香在我國主要分布于東北、華北、陜西等地，麝香是成熟雄體香囊的干燥分泌物，主要功能是消腫止痛，活血通絡(luò)，用于治療中惡昏迷，麻木，心腹爆痛等[4]，其主要藥理作用成分為麝香酮，具有擴張冠狀動脈及增加冠狀脈血流量的作用，麝香酮具有特殊的香味，微溶于水，能與乙醇混溶。

本文利用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀測定待測物的定量離子峰積分面積，采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法，通過待測物的含量與定量離子峰的積分峰面積的線性關(guān)系測定蒙藥扎沖-13中丁香酚和麝香酮的含量。氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀是通過使樣品離子化，再利用質(zhì)譜儀使離子分離，最后由檢測器檢測，從而測得分子的結(jié)構(gòu)信息。具有操作簡單、實驗重現(xiàn)性好、分析準(zhǔn)確和效率高的特點，旨在為蒙藥中各組分的含量分析提供科學(xué)可靠的方法。

1 實驗藥品與儀器

1.1 實驗材料及試劑：扎沖-13(內(nèi)蒙古民族大學(xué)附屬醫(yī)院蒙藥制劑室，批號為9804-4)，無水乙醇，(國藥集團化學(xué)試劑北京有限公司，批號為10009259)，麝香酮(中國藥品生物制品檢定所，批號為110719-200512)，丁香酚(北京恒元啟天化工技術(shù)研究院，批號為MUST-10120607)。

1.2 實驗儀器：電子天平(上海精密儀器公司)，DSQ-SII-GCMS型氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(美國-Thermo Fisher)。

2 實驗部分[5-10]

2.1 標(biāo)準(zhǔn)對照樣品的制備：在樣品管中準(zhǔn)確加入1mL無水乙醇，再分別用微量進樣器精確加入1μL的丁香酚和麝香酮標(biāo)準(zhǔn)對照樣品，做好標(biāo)簽；稱取標(biāo)準(zhǔn)對照樣品麝香酮加到樣品管中配制成濃度分別為0.0092mg/mL、0.0180mg/mL、0.0276mg/mL、0.0368mg/mL、0.0460mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)對照樣品溶液，做好標(biāo)簽；稱取標(biāo)準(zhǔn)對照樣品丁香酚加到樣品管中配制成濃度分別為0.2 mg/mL、0.4 mg/mL、0.6 mg/mL、0.8 mg/mL、1.0 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)對照樣品，做好標(biāo)簽。

2.2 待測樣品的制備：將待測扎沖-13研磨成精細粉末，用電子天平稱取樣品1.0001g置于20mL燒杯中，同時加入約9mL的無水乙醇，再將燒杯中的樣品溶液轉(zhuǎn)移至10mL的容量瓶中，定容至10mL，經(jīng)密塞、震搖，放置一小時后，取1mL該樣品經(jīng)微孔過濾器進行過膜處理后加入到樣品管中，并做好標(biāo)簽。

2.3 儀器測試條件：色譜柱HP-5MS(30m×0.25mm×0.25μm)；采取程序升溫方式，初始溫度為50℃，以10℃·min-1升溫至120℃，再以20℃min-1升溫至250℃；汽化室溫度為260℃；用高純度He氣做為載氣；載氣流速為2mL·min-1；進樣量為1μL；分流比為20：1。

2.4 標(biāo)準(zhǔn)樣品、待測樣品色譜圖：取做好標(biāo)簽的待測樣品和標(biāo)準(zhǔn)樣品于該固定測試條件下，經(jīng)氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀測得標(biāo)準(zhǔn)樣品色譜圖(見圖1)和待測樣品的色譜圖(見圖2)。

圖1中丁香酚的保留時間為12.63min，麝香酮的保留時間為16.37min，圖2中丁香酚的保留時間為12.63min，麝香酮的保留時間為16.37min

2.5 麝香酮和丁香酚標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立：將上述麝香酮和丁香酚標(biāo)準(zhǔn)對照樣品溶液進樣、測定，記錄其積分峰面積，用其積分峰面積Y和標(biāo)準(zhǔn)對照品含量X進行線性回歸，求得麝香酮線性回歸方程為：Y= 693570.6+ 1.43739×108×X(R=0.9993，N=5)；丁香酚線性回歸方程為：Y=1.65309×108+ 5.03683×108×X(R=0.9957，N=5)

2.6 精密度實驗： 精確量取一定量的同一種試樣，在上述色譜條件下，重復(fù)進樣5次，測定其特征峰積分面積。測得丁香酚的峰面積分別為：2.74725×108、2.76745×108、2.69855×108、2.73825×108、2.74945×108，含量的RSD=2.34%(n=5)；麝香酮的峰面積分別為：2.40064×106、2.43215×106、2.39546×106、2.40943×106、2.41298×106，含量的RSD= 1.12%(n=5)，說明該儀器精密度優(yōu)良。

2.7 穩(wěn)定性實驗：取一定量的同一份制備好的供試品溶液，按以上色譜條件與于0h、6h、12h、18h、24h測定其特征峰積分面積，最終測得蒙藥扎沖-13中丁香酚與麝香酮含量的RSD=1.65%(n=5)，說明供試品溶液在24h內(nèi)穩(wěn)定性優(yōu)良。

2.8 加樣回收實驗：精確量取已知質(zhì)量分?jǐn)?shù)的樣品0.1006 g，加入對照品麝香酮2.4mg，對照品丁香酚0.20 mg，按照本實驗的色譜條件，測定其含量，結(jié)果見表1。

表1 回收率測定結(jié)果

3 樣品含量的測定

取3份待測樣品溶液進樣1μL，在特定色譜條件下進行測定，計算麝香酮與丁香酚的含量，結(jié)果見表2。

表2 含量測定結(jié)果

4 結(jié)論

4.1 色譜柱的選擇：本實驗嘗試采用了其他色譜柱，經(jīng)實驗發(fā)現(xiàn)，待測離子很難分離，而本實驗采用的色譜柱HP-5MS(30m×0.25mm×0.25μm)，實現(xiàn)了麝香酮和丁香酚良好的分離，峰型對稱。

4.2 萃取溶劑的選擇：本實驗嘗試了使用無水乙醇、環(huán)己烷、乙醚同時萃取麝香酮和丁香酚的效率，實驗發(fā)現(xiàn)使用無水乙醇作為萃取溶劑經(jīng)密塞、震搖、放置1小時后，其萃取效率最高。

4.3 實驗方法：本文建立GC-MS法測定蒙藥扎沖-13的方法便捷快速、準(zhǔn)確且易于操作，同時也有較好的重現(xiàn)性和回收率，并且，本方法即使在待測樣品是含多組分的情況下，也可以較好地完成其定性、定量的測定。

[1]趙淼，付沖，徐冰心.RP-HPLC測定丁桂散中的丁香酚的含量[J].光譜儀器與分析，2003，1(4)：40-41.

[2] 李曉松，葉銳彬等.氣相色譜法測定傷科止痛膏中麝香酮的含量[J].中藥與臨床，2010，1(2)：34-35.

[3] 國家藥典委員會.中國藥典(一部)[S].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2000：3-4.

[4] 中華人民共和國衛(wèi)生部藥典委員會.中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)蒙藥分冊[M].內(nèi)蒙古自治區(qū)藥品檢驗所，1998：70-70.

[5] 袁勁松，湯翠娥.氣相色譜法測定紫金膠囊中麝香酮含量[J].中國醫(yī)院藥學(xué)雜志，2003，23(2)：89-91.

[6]周長征，馬長華，等.氣相色譜法測定細辛揮發(fā)油中甲基丁香酚和黃樟醚含量[J].中國藥學(xué)雜志，2007,42(13)：1031-1033.

[7]王靜，岳秀峰，等.蒙藥紅花清肝十三味丸中丁香酚含量的測定方法研究[J].內(nèi)蒙古醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2012，34(1)：65-68.

[8]趙陽，張純，等.高效液相色譜法測定蘇和香丸中丁香酚的含量[J].中國中藥雜志，2001，26(3)：175-177.

[9]蔣受軍，王成芳，等.氣相色譜法測定同仁牛黃清心丸中麝香酮的含量[J].中國醫(yī)藥信息雜志，2012,19(9)：64-65.

[10]呂霞，郭青，等.氣相色譜法測定六神丸中麝香酮的含量[J].中國藥業(yè)，2010，19(21)：24-25.

2016年9月13日收稿

Simultaneous Determination of Muscone and Eugenol in Mongolia drug Zha Chong-13by GC-MS

HAN Chun-ping1，XI Hai-shan2，LI Jiang1

1.College of Chemistry and Chemical Engineering, Inner Mongolia University for Nationalities;2.Analysis and Testing Center.Tongliao 028042

Objective:To determine the contents of muscone and eugenol simultaneously in Mongolia drug Zha Chong-13 by Gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS) method. Methods: The GC system consisted of HP-5MS (30m×0.25mm×0.25μm) Chromatographi column. Programmed temperature was set from 50℃ to 120℃ with 10℃·min-1, and then raised the temperature from 120℃ to 250℃ with 20℃·min-1. High pure helium was used as carrier gas with the flow rate of 2mL·min-1and with an injection volume of 1μL(split ratio of 20:1). Results: The two components muscone and eugenol had good linear relationship in the corresponding concentration ranges respectively. The standard curve of muscone was Y= 693570.6+ 1.43739×108×X (R=0.9993, N=5), and the standard curve of eugenol was Y=1.65309×108+ 5.03683×108×X(R=0.9957, N=5). The average contents of muscone and eugenol are 0.0110% and 0.2325% respectively. Conclusion: The results indicated the GC-MS method is a rapid and efficient method for determination the contents of muscone and eugenol in Mongolia drug Zha Chong-13.

Gas chromatography-mass spectrometry method;Mongolia drug Zha Chong-13;Muscone;Eugenol; Content

國家民委科研項目(14NMZ002)

韓春平(1963—)，女(蒙古族)，副教授，碩士。從事化學(xué)教學(xué)和蒙藥化學(xué)研究。聯(lián)系電話：cel：13948558889； E-mail：hanchunping0475@163.com

R291.2

B

1006-6810(2016)01-0046-02