抗幽門螺旋桿菌感染治療對(duì)兒童腸道菌群的影響分析

趙汝勤

[摘要] 目的 研究抗幽門螺旋桿菌感染治療對(duì)兒童腸道菌群的影響分析。 方法 按標(biāo)準(zhǔn)選取2015年1月～2016年10月在我院就診患兒104例，所有患者入院后13C呼氣試驗(yàn)，其中59例患者經(jīng)檢測(cè)后確定Hp感染陽(yáng)性，45例患者Hp感染陰性，取所有患兒新鮮糞便2.0g，用10倍稀釋法分別稀釋至10-1、10-3、10-5、10-7進(jìn)行厭氧和需氧培養(yǎng)，選擇培養(yǎng)腸道中的典型菌落，如腸球菌、腸桿菌、酵母菌、雙歧桿菌、乳桿菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌、類桿菌進(jìn)行培養(yǎng)。培養(yǎng)檢測(cè)后所有患者采取阿莫西林+克拉霉素+奧美拉唑聯(lián)合用藥，治療1周后，所有患者再次進(jìn)行糞便菌群培養(yǎng)。 結(jié)果 Hp陽(yáng)性組和Hp陰性組組間腸道菌落數(shù)量及B/E比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。與治療前比較，Hp陽(yáng)性患兒治療后酵母菌及產(chǎn)氣莢膜梭菌檢出率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；而其余菌落無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與治療前比較，Hp陽(yáng)性患兒治療后腸道菌菌落數(shù)量均有較大變化，雙歧桿菌及腸桿菌較原來(lái)增多，其余皆減少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），B/E值治療后較治療前減小，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。 結(jié)論 抗Hp感染影響兒童腸道菌群，減少體內(nèi)有益的厭氧菌數(shù)量，增加原本體內(nèi)不占優(yōu)勢(shì)的需氧桿菌，且更容易受到病原菌的侵襲。

[關(guān)鍵詞] 幽門螺旋桿菌；抗感染治療；兒童腸道菌群；影響

[中圖分類號(hào)] R725.7 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 2095-0616（2017）06-49-04

[Abstract] Objective To study the impact of Helicobacter pylori infection therapy to intestinal flora of children. Methods 104 children cured in our hospital from January 2015 to October 2016 were standardly selected.All the patients were given 13C breath test after admission.There were 59 cases of positive Hp infection，and 45 cases of negative Hp infection.Taking fresh stool 2.0g，and they were diluted to 10-1，10-3，10-5，10-7 to carry on anaerobic and aerobic culture by 10 fold dilution method.Typical colonies in the intestine were selected to culture，cuch as Enterococcus faecalis，enterobacter，yeast，Bifidobacterium，Lactobacillus，Clostridium perfringens，Bacteroides.After culture test，all the patients were treated with combination of amoxicillin，clarithromycin and omeprazole.After 1 weeks of treatment，all the patients were followed up by fecal bacteria culture. Results There was no significant difference between Hp positive group and Hp negative group in intestinal colony number and B/E（P>0.05）.Compared with before treatment，there was significant difference in the detection rate of yeast and Clostridium perfringens in Hp positive children （P<0.05）.There was no significant difference in other colonies.Compared with before treatment，there were significant changes in the number of intestinal bacterial colonies in Hp positive children.Bifidobacteria and Enterobacteriaceae were increased，while others were reduced.The difference was statistically significant （P<0.05）.B/E value after treatment decreased than before treatment，the difference was statistically significant （P<0.05）. Conclusion Anti Hp infection will impact the intestinal flora in children，reduce the number of beneficial bacteria in the body，and increase the original body does not take advantage of aerobic bacteria.It is more susceptible to invasion by pathogens.

[Key words] Helicobacter pylori；Anti infective therapy；Intestinal flora of children；Impact

幽門螺旋桿菌（helicobacter pylori，Hp）目前證實(shí)是胃、十二指腸潰瘍發(fā)病的主要原因，它不僅可以在強(qiáng)酸性條件下存活，難以消滅，更可以引發(fā)胃癌[1]。近年來(lái)研究表明，全球一半以上的人都患有Hp感染，而在兒童中，Hp感染者的數(shù)量則是以每年7%的增長(zhǎng)率遞增，且隨著年齡的增長(zhǎng)，感染者數(shù)量進(jìn)一步增加[2]。Hp感染不僅導(dǎo)致兒童出現(xiàn)胃、十二指腸潰瘍，更容易導(dǎo)致患兒營(yíng)養(yǎng)不良及貧血[3]，大大危害兒童的發(fā)育及身體健康。目前，臨床上一般采取三聯(lián)療法（兩種抗生素聯(lián)合質(zhì)子泵抑制劑或鉍劑）治療感染，療效較為顯著，但長(zhǎng)期大量服用抗生素容易發(fā)生不良反應(yīng)，如肝功能損害、腸道菌群失調(diào)等，且容易造成耐藥性并增加療程，根治率下降[4-6]。因此，本研究觀察104例患兒抗Hp治療前后的腸道菌群狀態(tài)，明確抗Hp治療對(duì)兒童腸道菌群狀態(tài)的影響，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

按標(biāo)準(zhǔn)選取2015年1月～2016年10月在我院就診患兒104例，年齡9～14歲，平均（12.5±3.1）歲，其中男56例，女48例。本研究?jī)?nèi)容獲得醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)并監(jiān)督執(zhí)行。所有患兒入院后行13C呼氣試驗(yàn)，其中59例患者經(jīng)檢測(cè)后確定Hp感染陽(yáng)性（設(shè)為Hp陽(yáng)性組），其中男30例，女29例，平均年齡（12.9±2.4）歲；45例患者Hp感染陰性（設(shè)為Hp陰性組），其中男20例，女17例，平均年齡（12.2±3.2）歲。兩組患者性別、年齡等一般資料比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。入選標(biāo)準(zhǔn)：（1）經(jīng)電子胃鏡確診為慢性胃炎、十二指腸炎，近1個(gè)月未使用抗生素及抑酸劑；（2）年齡在14歲以下；（3）患兒家屬對(duì)研究?jī)?nèi)容知情并同意完成研究。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）有其他消化系統(tǒng)疾病；（2）有變態(tài)反應(yīng)性疾病。

1.2 方法

取所有患兒新鮮糞便2.0g，用10倍稀釋法分別稀釋至10-1、10-3、10-5、10-7。將四個(gè)稀釋法的糞便用L棒分別涂抹于不同的培養(yǎng)基上，進(jìn)行厭氧和需氧培養(yǎng)。選擇培養(yǎng)腸道中的典型菌落，如腸球菌、腸桿菌、酵母菌、雙歧桿菌、乳桿菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌、類桿菌進(jìn)行培養(yǎng)。培養(yǎng)檢測(cè)后所有患者采取阿莫西林+克拉霉素+奧美拉唑聯(lián)合用藥，治療1周后，所有患者再次進(jìn)行糞便菌群培養(yǎng)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

腸道菌群菌落取對(duì)數(shù)后進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，使用SPSS22.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量資料用（）表示，采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，通過(guò)計(jì)算雙歧桿菌和腸桿菌的比值代表腸道定植抗力[7]。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患兒腸道菌檢出率比較

Hp陽(yáng)性組酵母菌的檢出率為18.6%，產(chǎn)氣莢膜梭菌的檢出率為30.5%，其余菌群皆為100%；Hp陰性組酵母菌為26.7%，產(chǎn)氣莢膜梭菌為33.4%，乳桿菌為95.6%，其余菌群皆為100%，兩組間酵母菌及產(chǎn)氣莢膜梭菌的檢出率進(jìn)行組間比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見表1。

2.2 兩組患兒腸道菌菌落數(shù)量及B/E值比較

Hp陽(yáng)性組雙歧桿菌、乳桿菌、腸球菌、腸桿菌菌落數(shù)量比Hp陰性組少，類桿菌菌落數(shù)量比Hp陰性組多，但差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；兩組患兒B/E比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見表2。

2.3 兩組Hp陽(yáng)性患兒三聯(lián)抗Hp治療前后腸道菌檢出率比較

治療前后，所有Hp陽(yáng)性患兒雙歧桿菌、乳桿菌、類桿菌、腸桿菌均可在腸道檢出。與治療前比較，Hp陽(yáng)性患兒治療后酵母菌及產(chǎn)氣莢膜梭菌檢出率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；而其余菌落差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見表3。

2.4 Hp陽(yáng)性患兒三聯(lián)抗Hp治療前后腸道菌菌落數(shù)量及B/E值比較

與治療前比較，Hp陽(yáng)性患兒治療后腸道菌菌落數(shù)量均有較大變化。其中，Hp陽(yáng)性患兒治療后雙歧桿菌及腸桿菌較治療前增多，其余皆減少，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。B/E值治療后較治療前減小，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表4。

3 討論

Hp感染后定植于胃內(nèi)，近年來(lái)有研究發(fā)現(xiàn)糞便中也同樣含有幽門螺桿菌，作為一種外源性感染細(xì)菌，Hp的含量對(duì)于正常菌群是否存在一定影響[8-9]，值得我們探討，從本研究結(jié)果來(lái)看，Hp感染陽(yáng)性患者和陰性患者腸道菌落差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，因此我們可以認(rèn)為Hp感染后并不影響患兒的腸道菌群成分。Hp感染現(xiàn)在已經(jīng)發(fā)展成為一種全球性疾病，與許多胃腸道疾病密切相關(guān)[10]。臨床上治療Hp感染通常采取三聯(lián)法，但長(zhǎng)期大量使用抗生素會(huì)存在許多副作用，腸道菌群失調(diào)是其中最常見的并發(fā)癥[11-13]。

從本次研究結(jié)果可以看出，抗Hp治療后酵母菌及產(chǎn)氣莢膜梭菌檢出率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），且治療前后腸道菌菌落數(shù)量均有較大變化，B/E值治療后較治療前減小，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），這提示抗Hp治療影響腸道正常菌群，除雙歧桿菌及腸桿菌外，其余定植菌皆減少，腸道定植抗力也減少。抗Hp治療的三種藥物（兩種抗生素和質(zhì)子泵抑制劑）通過(guò)口服后進(jìn)入腸道內(nèi)進(jìn)行代謝，腸道菌群在達(dá)到一定濃度藥物的影響下，發(fā)生顯著的變化，主要是有益的厭氧菌得到抑制而導(dǎo)致數(shù)量減少，而原本不占優(yōu)勢(shì)的需氧菌則大量繁殖。

本研究使用的阿莫西林和克拉霉素是常用的抗Hp治療的抗生素藥物，而抗生素對(duì)腸道菌群的影響主要取決于其給藥途徑、抗菌譜及藥物代謝特征。如經(jīng)口服吸收后阿莫西林通過(guò)膽汁分泌重新回到腸道，腸道中的阿莫西林濃度迅速增加，這是給藥途徑的影響。另外，腸道菌群受抗生素影響還表現(xiàn)在其他方面：（1）腸道生態(tài)平衡被干擾甚至破壞，定植抗力迅速下降，腸道中的外籍致病菌更容易定植；（2）抗生素可以殺滅敏感菌（如厭氧菌），造成耐藥菌種大量繁殖，篩選出耐藥菌株（需氧菌居多）。而本研究聯(lián)合使用的抗Hp藥物奧美拉唑是抑酸劑，胃酸被抑制分泌后，低胃酸水平的胃腸道環(huán)境對(duì)外源性細(xì)菌的清除作用大大減弱，胃腸道自身的保護(hù)能力降低，腸道更加容易受到病原菌的定植和侵襲，增加了腸道菌群的紊亂。抗Hp治療不僅擾亂腸道內(nèi)定植菌的分布，同樣的也會(huì)增加外源性細(xì)菌侵略人體的機(jī)會(huì)，加重腸道菌群的紊亂，危害患兒健康。

近年來(lái)，有學(xué)者提出在抗Hp治療的同時(shí)口服益生菌來(lái)穩(wěn)定腸道菌群，減輕抗生素的副作用，同時(shí)益生菌也有助于抗Hp的治療[14-15]，這需要我們進(jìn)一步的研究。同時(shí)兒童腸道微生態(tài)不平衡，易受疾病和環(huán)境的影響，因此在治療兒童的Hp感染時(shí)應(yīng)時(shí)刻注意腸道菌群失調(diào)，及時(shí)干預(yù)。綜上所述，抗Hp感染影響兒童腸道菌群，減少體內(nèi)有益的厭氧菌數(shù)量，增加原本體內(nèi)不占優(yōu)勢(shì)的需氧桿菌，且更容易受到病原菌的侵襲。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 張?jiān)路迹R芳蓮，朱亞寧，等.兒童抗幽門螺旋桿菌感染治療腸道菌群影響的研究[J].現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2015，30（5）：32-35.

[2] 錢明，袁君君，李文輝，等.糞便涂片在診斷腹瀉患兒腸道菌群失衡中的臨床意義[J].中國(guó)醫(yī)學(xué)創(chuàng)新，2011，8（19）：80-81.

[3] 陳雪貞，陳德明，梁建雄，等.小兒腸道手術(shù)后腸道菌群失調(diào)的預(yù)防及護(hù)理分析[J].中國(guó)醫(yī)藥科學(xué)，2014，4（12）：213-215.

[4] 巨愛萍.小兒腸道菌群失調(diào)性腹瀉臨床分析[J].山西醫(yī)藥雜志，2011，40（11）：1134.

[5] 趙軍魁，張小平.腸道屏障功能評(píng)估方法的現(xiàn)狀及研究進(jìn)展[J].河北醫(yī)藥，2009，31（22）：3134-3136.

[6] 金忠芹，武慶斌.抗生素致腸道菌群失調(diào)性腹瀉患兒血清降鈣素原變化的意義[J].實(shí)用兒科臨床雜志，2011，26（22）：1734-1735.

[7] 吳仲文，李蘭娟，馬偉杭，等.腸道微生物定植抗力的新指標(biāo)-B/E值[J].浙江預(yù)防醫(yī)學(xué)，2000，12（7）：4-6.

[8] 謝睿，楊曉鐘，高成城，等.標(biāo)準(zhǔn)三聯(lián)加益生菌療法和鉍劑四聯(lián)方案治療幽門螺桿菌感染的對(duì)照研究[J].山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2014，45（12）：1180-1182.

[9] 胡伏蓮.以菌制菌—益生菌對(duì)幽門螺桿菌抑制作用的探討[J].中華醫(yī)學(xué)雜志，2011，91（29）：2017-2018.

[10] 蔡銳，肖新云，尹抗抗，等.戊己丸對(duì)幽門螺桿菌感染胃炎小鼠胃內(nèi)微生物及酶的影響[J].中國(guó)微生態(tài)學(xué)雜志，2015，27（3）：249-252.

[11] 馬麗瓊，陳德昌，劉紹澤，等.廣譜抗生素對(duì)腸道菌群的選擇作用[J].中國(guó)危重病急救醫(yī)學(xué)，2007，19（8）：456-459.

[12] 顧軍，李維勤，李珍大，等.抗生素相關(guān)性腸炎[J].腸外與腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)，2006，13（1）：42-43.

[13] 吳麗麗，彭麗華，楊云生，等.根除幽門螺桿菌療法對(duì)腸道菌群影響的研究現(xiàn)狀[J].中華內(nèi)科雜志，2013，52（12）：1075-1076.

[14] 李琳，李巖.腸道菌群失調(diào)與功能性腹瀉[J].胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜志，2014，23（7）：723-726.

[15] 許冬，王惠吉，李敏，等.老年人腸道菌群檢測(cè)及分析[J].山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2009，40（7）：632-634.

（收稿日期：2017-01-30）